病原微生物实验室生物安全风险评估

1、病原微生物实验室生物安全风险评估起草人：部门审核：EHS审核：批准：病原微生物实验室生物安全风险评估1. 风险评估目的:保障病原微生物实验室的生物安全，减少职业暴露风险，使环境污染降低到最低限度。2. 生物风险评估依据1）病原微生物实验室生物安全管理条例2）病原微生物实验室生物安全通用准则3）医疗废物管理条例3. 风险评估概述病原微生物，是指能够使人或者动物致病的微生物。国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类：第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人类或者

2、动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定，将实验室分为一级（BiosafetyLevel1,BSL-1）、二级（BSL-2）、三级（BSL-3）、四级（BSL-4）。生物安全防护水平为二级的实

3、验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。重庆医工院制药有限责任公司（以下简称我公司）QC微生物实验室属二级生物安全实验室（BSL-2），实验室布局分为培养室、清洗间、灭菌间、准备间、培养基存放间、细菌内毒素室、微生物限度检测室、阳性菌检测室。实验室存在的病原微生物有：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、沙门氏菌、白色念珠菌、黑曲霉7种。实验室从事菌种的相关活动包括菌种的复苏、传代、保存、培养使用及灭活。因此评估所涉及到的仪器设备、操作环境、标准规范等

4、能否符合法规要求，达到保护操作人员，减少环境污染的目的。4. 风险评估内容4.1病原微生物的特征4.1.1大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌为革兰氏阴性杆菌，菌体短小、有鞭毛、有菌毛，部分菌株有荚膜。其广泛分布于自然界，尤其不干净的、变质的食物，人食用后易引起腹泻，是食品和水源卫生监督的指示菌。是人类腹泻、肠炎、感染等疾病的致病菌之一。大肠埃希氏菌的致病作用主要是侵袭力、内毒素、肠毒素。所致疾病为腹泻，肠外感染。4.1.2金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性，其在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，

5、可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶。4.1.3枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌。枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌生长，对人体无危害。4.1.4铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌为革兰氏阴性杆菌。菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛。常引起术后伤口感染，也可引起褥疮、脓肿、化脓性中耳炎等。本菌引起的感染病灶可导致血行散播，而发生菌血症和

6、败血症。烧伤后感染了铜绿色假单胞菌可造成死亡。4.1.5沙门式菌沙门式菌无芽胞，一般无荚膜，大多有周身鞭毛。在人类身上造成的症状一般是食物中毒，出现发烧、腹泻、腹痛等症状。4.1.6白色念珠菌白色念珠菌位圆形或卵圆形革兰阳性，但着色不均匀，出芽方式繁殖。能引发有肺炎、肠胃炎、阴道炎、心内膜炎、脑膜炎、脑炎等。4.1.7黑曲霉：子囊菌亚门，丝孢目，丛梗孢科，分生孢子头球状，褐黑色，蔓延迅速。有的能产生致癌性毒素控制措施：1）要求在实验室内不得进食、饮水、吸烟、化妆和储存，食品和饮料，严禁将实验材料置于口内，按要求洗手。标本的操作在生物安全柜内进行，操作人员加强消毒。定期对操作人员进行健康检查，患

7、局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员要暂时停止其工作或调换岗位。4.2病原微生物的相关实验活动：我公司菌种从接收后，有以下几项活动：传代，保存，使用，销毁。所有的实验活动均在生物安全柜内进行。实验完成后，在培养室完成菌种的计数观察。培养完成的带菌样本通过高压灭菌后集中处理。整个过程可能会存在菌种的泄露、感染，菌种的数量不对，菌种污染环境等风险。控制措施：1）管理人员和实验人员都必须经过专门培训，2）张贴生物危害警告标志，在有可能接触到带菌样本的地方均戴上手套操作或者及时消毒手。3）在生物安全柜以外的地方，如遇带菌样本泄露，及时对污染区域进行覆盖消毒，同时控制进入污染区域的人数。4）菌种的管控严格施行双人收发，双人双锁，对所有的实验过程均动态记录在案。4.3人员因素：实验人员违规操作或者对操作技能不熟悉，有可能会导致带菌样本的泄露、实验设备的损坏，增加职业暴露的风险控制措施：所有进入微生物检测室的人员均应经过相应的培训，经考核合格后方可进入。培训设备的原理及使用，让每个人合理的使用设备，延长设备的生命周期，减少感染的风险。4.4环境因素实验室也应具备相应的设施和文件供操作人员使用，保障操作人员的安全。若硬件设施达不到要求，标识不清晰瞩目，造成设备的混用，交叉污染，增加感染的风险。控制措施：1）精密贵重仪器