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文档简介
1、仪器分析、检验仪器原理及维护典型例题、填空题1 .在光学显微镜下所观察到的细胞结构称为(显微结构)。2 .光学显微镜的分辨率(最小分辨距离)是(0.2印)。3 .当显微镜的目镜为10X,物镜为10X时,在视野直径范围内看到一行相连的8个细胞。若目镜不变,物镜换成40X时,则在视野中可看到这行细胞中的(2)个。4 .普通光镜上决定放大倍数的部件有(目镜、物镜)。5 .按转速分,离心机可分成(低速离心机、高速离心机、超速离心机)。P516 .低速离心机的相对离心力在(15000沟)以内。P517 .卤鸨灯的适用波长范围是(3202500nm)。P658 .紫外-可见分光光度计的单色器主要组成部件有
2、(入射狭缝、色散元件、准直镜、出射狭缝)。P669 .目前所使用的毛细管柱内径是(25小75m)0P13010 .电解质分析仪电极系统是测定样品的关键,它包括(指示电极、参比电极)。P14511 .生物安全等级4级(P4)的媒质指(烈性/致命细菌、病毒等微生物等,感染后不可治愈)。P17712 .二氧化碳培养箱调节CO2浓度范围为(0%20%)。P19013 .培养细胞的生存条件(培养液、合适的温度、一定的湿度、恰当的气体成分)。14 .在流式细胞分析技术中,若每秒钟产生4万个水滴,每秒钟流出的细胞是1000个,则平均每40个水滴中有(1个)细胞。15 .白细胞的三分群分类中,第三群细胞区中主
3、要是(中性粒细胞)。P21216 .连续流动式自动生化分析仪中气泡的作用是防止管道中的(交叉污染)。P26317 .TaqDNA聚合酶酶促反应最适温度为(70C75C)。P29718 .一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为(梯度PCR仪)。P29819 .PCR技术的过程包括(变性、退火、延伸)。P29620 .蛋白质测序仪主要检测(肽链中的氨基酸序列)。P31321 .目前DNA测序仪的工作原理,主要是利用(双脱氧链末端终止法和化学降解法)。P306二、单选题1 .要将视野内的物像从右侧移到中央,应向哪个方向移动标本(B)A,左侧B,右侧C.上方D.下方2 .关于光学显微镜,下列有误的
4、是(D)A.是采用日光作光源,将微小物体形成放大影像的仪器B,细菌和线粒体是光镜能清晰可见的最小物体C.由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成D.光学显微镜的分辨率由目镜决定3 .适于观察培养瓶中活细胞的显微镜是(D)A.透射电镜B.扫描电镜C.荧光显微镜D.倒置显微镜P254 .关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是(C)A.是光学显微镜的主要性能指标B,也可称为分辨本领C.与照明光的波长成反比D.指分辨出标本上两点间最小距离的能力5 .在普通光学显微镜下,一个细小物体若被显微镜放大50倍,这里被放大50倍”是指该细小物体的(D)A.体积B.表面积C.像的面积D.长度或宽度6 .在光学显微镜
5、下,观察透明的、染色较浅的细胞时,必须注意做到(D)A.把光圈缩小一些,使视野暗一些B.把光圈开大一些,使视野暗一些C.把光圈缩小一些,使视野亮一些D.把光圈开大一些,使视野亮一些7 .关于光学显微镜的使用,下列有误的是(D)A.用显微镜观察标本时,应双眼同睁8 .按照从低倍镜到高倍镜再到油镜的顺序进行标本的观察C,使用油镜时,需在标本上滴上镜油D,使用油镜时,需将聚光器降至最低,光圈关至最小8 .用显微镜观察细胞时,应选择下列哪种目镜和物镜的组合在视野内所看到的细胞数目最多(A)A.目镜10X,物镜4XB.目镜10%物镜10XC.目镜10%物镜40XD.目镜15%物镜40X9 .差速离心法和
6、速率区带离心法进行分离时,主要的根据是不同样品组份的(B)A.密度B.沉降系数C.体积D.形状10 .测定生物大分子的相对分子重量应用最广泛的方法是(B)A.差速离心法B.沉降速率法C.沉降平衡法D.速率区带离心法11 .高速离心机由于运转速度高,一般都带有(C)A.自动控制装置B,平衡控制装置C.低温控制装置D.速度可调装置12 .超速离心机的相对离心力可达(B)A.410000gB.510000gC.610000gD.810000g13 .等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是(A)A.液柱顶部密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度B.液柱顶部密度明显大于样品组
7、份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度C.液柱顶部密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显小于样品组份的密度D.液柱顶部密度明显大于样品组份的密度,液柱底部的密度明显小于样品组份的密度14 .不同的离心方法选择的离心时间不同,对于等密度梯度离心而言是(C)A.某种颗粒完全上浮的时间B.某种颗粒完全下沉的时间C.全部组份颗粒完全到达各自的等密度点的平衡时间D.全部组份沉降在离心管的底部15.一般来说,颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是(A)A.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快B.颗粒带净电荷量越小或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快C.颗粒带净电荷量越
8、大或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快D.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越慢16 .聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质,除一般电泳电荷效应外,欲使分辩力提高还应有的作用是(D)A.浓缩作用B.扩散作用C.电渗作用D.分子筛作用17 .电泳时pH值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系,下列描述中正确的是(D)A. pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越慢B. pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快C. pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快D. pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快18.聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝
9、胶,具优点是(D)A.机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高B.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高C.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低D.机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高19 .电泳时pH值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系,下列描述中正确的是(D)A. pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越慢B. pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快C. pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快D. pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快P11820 .下述对毛细管凝胶电泳原理的叙述中,不正确的是(C)A,是将板上的凝胶移到
10、毛细管中作支持物进行的电泳B.凝胶具有多孔性C.能根据待测组分的离子强度不同而进行分离P128(质荷比和分子体积)D.起类似分子筛的作用21.自动化抗生素敏感性试验的实质是(A)A.微型化的肉汤稀释试验P169B.琼脂稀释法C.肉汤法D.扩散法22 .微生物自动鉴定系统的工作原理是(D)A.光电比色原理B.荧光检测原理C.化学发光原理D.微生物数码鉴定原理P16823 .维持细胞较快的生长增殖速度,需添加的血清量为(D)A.1%2%B.2%5%C.5%10%D.10%20%P18734.培养细胞传代时,通常是(A)A.根据不同细胞采取不同的方法B.贴壁生长的细胞添加新鲜培养液C.EDTA与胰蛋
11、白酶按不同比例混合使用D,悬浮生长的细胞直接添加胰蛋白酶”25.下述细胞传代的概念中,正确的是(D)A.当细胞增殖至一定密度后,分离出一部分细胞接种到其他容器的过程B.从体内取出细胞接种到培养容器,细胞继续增殖的过程C.培养细胞期间更新培养液的过程D.当细胞增殖至一定密度后,分离出一部分细胞接种到其他容器并及时更新培养液使细胞增殖继续的过程P18726 .二氧化碳培养箱结构的核心部分,主要是(D)A,湿度调节装置B,湿润的含水托盘C.温度调节器D.CO2调节器、温度调节器和湿度调节装置27 .氧培养箱内厌氧菌最佳的气体生长条件是(D)A. 80%N2、5%CO2和15%H2B. 80%N2、1
12、5%CO2和5%H2C. 80%N2、10%CO2和10%H2D. 85%N2、5%CO2和10%H228 .二氧化碳培养箱结构的核心部分,主要是(D)A,湿度调节装置B,湿润的含水托盘C.温度调节器D.CO2调节器、温度调节器和湿度调节装置29 .厌氧培养箱通过自动连续循环换气系统保持箱内的厌氧状态,具换气过程是(D)A.气体排空-净化-气体排空-N2净化-气压平衡B.N2净化气体排空N2净化气压平衡C.N2净化-气体排空N2净化-气体排空-气压平衡D.气体排空-N2净化-气体排空-N2净化-气体排空-气压平衡30 .流式细胞术中,前向角散射可以检测(B)A.细胞膜厚薄B.被测细胞的大小C.
13、细胞质多少D.核膜的折射率31 .流式细胞仪测定的标本,不论是外周血细胞,还是培养细胞,首先要保证是(D)A.单倍体细胞悬液B,双倍体细胞悬液C.红细胞悬液D.单细胞悬液32 .流式细胞仪中的光电倍增管接收(B)A.散射光B.荧光C.激光D,射线33 .双磁路磁珠法判定凝固终点是钢珠摆动幅度衰减到原来的(D)A.80%B.70%C.100%D.50%34 .有关光学法血凝仪的叙述错误的是(B)A,可使用散射比浊法或透射比浊法B.透射比浊法的结果优于散射比浊法C.光学法血凝仪测试灵敏度高D.仪器结构简单、易于自动化35.有关光学法与双磁路磁珠法血凝仪叙述正确的是(D)A.光学法是检测血浆凝固过程
14、中光信号的变化B.两者都属于生物化学法C,双磁路磁珠法是检测血浆凝固过程中磁电信号的变化D.光学法散射比浊比透射比浊结果好36 .严重影响双磁路磁珠法血凝仪测定的因素是(D)A.测试杯光洁度B,严重脂血C.溶血或黄疸D.仪器周围磁场37 .下述中不符合尿液分析仪10项检测试剂带内容的是(D)A.白细胞酯酶B.亚硝酸盐C.pHD.球蛋白38 .尿液分析仪试剂带空白块的作用是(A)A,消除不同尿液标本颜色的差异B.消除试剂颜色的差异C.消除不同光吸收差异D.增强对尿标本的吸收39 .有关尿液分析仪质控的表达,下列说法中错误的是(D)A.质控物成分应稳定B.选择质控物时,最好使用多项复合控制品C.在
15、一天内最好使用统一份质控物D,使用不同批号的试剂带前不需做质控40 .自动分析仪中采用顺序分析”原理的是(D)A.分立式自动生化分析仪B.干化学式自动生化分析仪C.离心式自动生化分析仪D.连续流动式自动生化分析仪41 .离心式自动分析仪的待测样品在离心力作用下,在各自反应槽内与试剂混合并完成化学反应,这种测定模式称为(D)A.离心分析B.连续分析C.顺序分析D.同步分析42 .化学发光免疫检测的物质不包括(D)A.甲状腺激素C.血清总IgE含量43.PCR技术的本质是A.核酸杂交技术B.生殖激素D,血清IgG含量(C)B.核酸重组技术C.核酸扩增技术D.核酸变性技术44 .PCR基因扩增仪最关
16、键的部分是(A)A.温度控制系统B.荧光检测系统C.软件系统D.热盖45 .下列有关测序反应体系反应原理的叙述中,错误的是(C)A.加入的核甘酸单体为-脱氧核甘三磷酸B.低温退火时,引物与模板形成双链区C.沿着-的方向形成新链46.下列有关Edman降解法基本原理的叙述中,错误的是(C)A. PTC-多肽的生成是在弱碱性条件下B. PTC-多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C.在无水强碱的作用下,可使靠近PTC基的氨基酸环化,形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D.剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环47.下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中,不正确的是(D)A.
17、其基本原理是利用DNA的体外合成过程B.反应体系中需加入dNTP和ddNTPC. ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D. dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止三、多选题1 .电镜标本制备时常用的固定剂(AB)A.钺酸B.戊二醛C.丙酮D.联苯胺E.过碘酸2 .普通光镜上的下列物镜中哪些不能浸在香柏油中使用(ABCD)A.4砌镜B.10砌镜C.40冽镜D.45渤镜E.100阳镜3 .物象在低倍镜(10的下清晰可见,换高倍镜(40X)后看不见了,这是因为(ABCD)A.玻片放反了B.高倍物镜故障C.物象不在视野正中央D.焦距没调好E.低倍物镜故障4 .低速离心机用途包括(ABC
18、D)A,血清分离B,血浆分离C.脑脊液有形成份分离D.胸腹水有形成份分离E.生物大分子分离5 .为了保证离心机的正常使用,必须做到下述中的(ABC)A.平衡离心管和其内容物,要对称放置B.装载溶液时,使用开口离心机不能装得过多,防止离心甩出C.离心过程中应随时观察离心机上的仪表是否正常工作,如有异常声音应立即停机检查,及时排出故障。D.规定时间内进行E.以上答案都正确6 .离心机按结构可分成的类型包括(ABCDE)A.台式离心机B,多管微量式离心机C.细胞涂片式离心机D,血液洗涤式离心机E.高速冷冻式离心机7 .原子吸收光谱仪在工作过程中出现没有吸收的故障时,常见原因有(ABCE)A.光源选择
19、不正确B.波长选择不对C.工作电流选择过大D.火焰温度选择不当E.标准溶液配制不合适8 .原子吸收光谱仪在工作过程中出现分析结果偏高的故障时,常见的原因有(ABCDE)A.溶液中的固体未溶解B.背景吸收C.标准溶液变质D.空白没有校正E.假吸收9 .原子吸收光谱仪在工作过程中出现重现性差的故障时,常见的原因有(ABDE)A.火焰不稳定B.废液流动不畅通C.波长选择不对D.喷雾器没调好E,乙烘流量不稳定10 .原子吸收光谱仪在工作过程中出现没有吸收的故障时,常见原因有(ABCE)A.光源选择不正确B.波长选择不对C.工作电流选择过大D.火焰温度选择不当E.标准溶液配制不合适11 .影响分光光度法
20、准确性的因素包括(ABCD)A.单色性不纯B.杂散光C,吸收池D.检测器负高压波动E.溶液浓度12 .影响电泳的外界因素(ABCE)A.电场强度B.溶液的pH值C.溶液的离子强度D.带电性质E.吸附作用13 .下列对醋酸纤维素薄膜电泳描述中,正确的是(BCDE)A,薄膜对蛋白质样品吸附性大B.几乎能完全消除纸电泳中出现的拖尾”现象C,分离速度快、电泳时间短D.样品用量少E.特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测14 .微生物自动鉴定及药敏分析系统的基本结构主要包括(BCDE)A.培养瓶B.测试卡(板)C.菌液接种器D.培养和监测系统E.数据管理系统15 .微生物自动鉴定及药敏分析系统的维护应注
21、意以下方面(ABCDE)A.严格按手册规定进行开、关机及各种操作B.定期清洁比浊仪、真空接种器、封口器、读数器及各种传感器C.定期校正比浊仪,用标准菌株测试各种试卡,并作好质控记录D.建立仪器使用以及故障和维修记录E.定期由工程师作全面保养,并排除故障隐患16 .根据其检测原理的不同,自动血培养仪可分为(ABC)A,以检测培养基导电性和电压为基础的血培养系统B,应用测压原理的血培养系统C.采用光电原理监测的血培养系统D.采用化学发光原理检测的血培养系统E,采用气液色谱原理监测的血培养系统17 .自动血培养系统的工作原理,主要是通过自动监测培养基中(ABCDE)A.混浊度的变化B.pH值的变化C
22、.代谢终产物CO2的浓度的变化D.荧光标记底物的变化E.代谢产物的变化18 .生物安全柜空气过滤系统的主要功能包括(ACD)A.保证洁净空气不断地进入工作室B.维持柜内负压状态C.使工作室内的垂直气流保持一定的流速D,使外排的气体被净化,防止环境污染E.保证柜内有一定浓度的氧气19.下列哪些类型的生物安全柜柜内70%的气体可经HEPA过滤器再循环至工作区(BE)A.I级生物安全柜B.II级A1型生物安全柜C.II级B1型生物安全柜D.II级B2型生物安全柜E.II级A2型生物安全20.应尽量避免将离心机、漩涡振荡器等仪器安装在生物安全柜柜内的原因包括(BD)A.影响生物安全柜柜内的电压B.此类
23、仪器使用时产生震动,使积留在滤膜上的颗粒物质抖落C,占用柜内的空间D.散热片排风口气流可能会影响柜内的正常气流方向E.此类仪器不易清洁21 .流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是(AC)A.应用流式细胞术B.应用流式细胞术和原子发射C.应用电阻抗D.应用流式细胞术和液相色谱E.应用流式细胞术和原子吸收22 .流式细胞仪在免疫学中的应用包括(ABCD)A.淋巴细胞功能分析B.淋巴细胞及其亚群分析C.化疗药物对月中瘤细胞的凋亡机制D.月中瘤细胞的免疫检测E.免疫分型23 .血细胞分析仪按对白细胞分类的水平可分为(ABCD)A.二分群B,三分群C,五分群D.五分群+网织红BCAE.网织红BCA24 .
24、血凝仪凝固法按检测原理可分为(BCDE)A.酶标法B.电流法C.超声分析法D.光学法E.双磁路磁珠法25 .有关凝固比浊法血凝仪叙述正确的是(ABC)A.属生物物理法B.属光电比浊原理C.无抗原抗体反应D.以血浆凝固达100%时作为判定终点E.不能检测纤维蛋白原含量26 .血细胞分析仪白细胞三分群的第二群主要包括了(ABCD)A.单核细胞B,嗜酸性粒细胞C,嗜碱性粒细胞D,幼稚细胞E,中性粒细胞27 .下列关于尿液分析仪的叙述中,正确的是(ABCD)A.此类仪器采用球面分析仪接受双波长反射光B.尿试剂带简单、快速、用尿量少C.尿蛋白测定采用指示剂蛋白误差原理D.细胞检查不可弃代镜检E,尿葡萄糖
25、检查的特异性不如班氏定性法28 .下述中哪几项属于尿干化学分析前质量控制的内容(ACD)A,正确的尿标本收集方法B.有效的尿标本标记C.适宜的防腐剂D.检测后仪器的清洗E.检测报告的审核、签发29 .全自动生化分析仪抗交叉污染的措施有(ABCD)A.自动清洗加样针和试剂探针B.自动扫描比色皿剔除不合格者C.比色皿自动冲洗功能D,应用惰性液胶膜技术减少探针内外管壁交叉污染的几率E.自动将加完的标本移出30 .自动生化分析仪常用的分析方法主要有(ABCD)A.终点分析法B.连续监测法C.比浊测定法D.离子选择电极法E.电泳法31 .ELISA临床上主要用于(ABCDE)A.病原体及抗体测定B.蛋白
26、质测定C.非肽类激素测定D.药品测定E.毒品测定32 .下列哪些荧光标记法必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行(ABC)A,单色荧光标记引物法B,单色荧光标记终止底物法C.多色荧光标记引物法D.多色荧光标记终止底物法E.多色荧光标记法33 .目前常用的PCR基因扩增仪控温方式有(CD)A.水浴锅控温B,压缩机控温C.半导体控温D.离心式空气控温E.金属控温34 .PCR基因扩增仪的温度控制主要是指(ABD)A,温度的准确性控制B,温度的均一性控制C.退火温度控制D.升降温速度控制E.延伸温度控制35 .在Sanger双脱氧链末端终止法测序反应体系中,ddNTP与dNTP相比的异同点有(BD
27、E)A. ddNTP在脱氧核糖的位置上缺少一个羟基B. ddNTP在脱氧核糖的位置上缺少一个羟基C. DNA链在掺入dNTP的位置终止链的延伸D.均可与正在延伸的DNA链的末端脱氧核糖3'-OH发生反应E.ddNTP不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键36.POCT在医院外的应用主要包括(ABCDE)A.戒毒中心B.救护车上C.出入境检疫D.公安部门E.社区医疗四、简答题1 .光学显微镜的工作原理。P17答:显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统,是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜
28、,而焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。2 .什么是密度区带离心法和速率区带离心法?答:密度区带离心法又称为区带离心法,是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。速率区带离心方法是根据分离的粒子在离心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内形成几条分开的样品区带,达到彼此分离的目的。3 .微生物数码鉴定分析原理。P1
29、68答:数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式,给每种细菌的反应模式赋予一组数码,建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字(编码),查阅检索本或数据库,得到细菌名称。其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。4 .有下列情况之一时,应对生物安全柜进行现场检测。P183答:生物安全实验室竣工后,投入使用前,生物安全柜已安装完毕;生物安全柜被移动位置;对生物安全柜进行检修;生物安全柜更换HEPA过滤器后;生物安全柜一年一度的常规检测。5 .按照美国1992年版NSF49标准,生物安全等级分级的微生物
30、是如何界定的。P177答:按照美国1992年版NSF49标准,生物安全等级1级(P1)的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生物;生物安全等级2级(P2)的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等微生物;生物安全等级3级(P3)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物,但感染后可治愈;生物安全等级4级(P4)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物,感染后不可治愈。6 .HEPA过滤器。P181答:高效空气过滤器(high-efficiencyparticulateairfilter,HEPAfilter),绝大多数HEPA过滤器采用特殊防火材料制成框架,框架内被波纹状的铝片分隔成栅状,里面填充乳化玻璃纤维亚微
31、粒。HEPA过滤器的过滤效率可达99.99%100%,是生物安全柜的主要生物防护结构。7 .检测培养细胞霉菌和细菌的污染.P187答:一般肉眼可见在培养液中形成白色或浅黄色飘浮物;倒置显微镜下可见于细胞之间悬浮飘荡在培养液中的纵横交错穿行的丝状、管状及树枝状菌丝或卵圆形单细胞真菌,为霉菌污染。培养液短期内颜色变黄并出现明显混浊现象;倒置显微镜下观察,可见培养液中有大量细小的圆球状颗粒飘浮,有时在细胞表面和周围有大量细菌存在,为细菌污染。8 .气套式CO2培养箱的结构特点。P190答:直接加热,加热组件环绕所有外夹套,能均匀加热并用玻璃纤维绝缘包绕;箱体不需注水、排水,无溢出或缺水警报;CO2取
32、样口处于箱体的前部;与水套式相比重量较轻;采用过温保护系统,当温度过高可自动切断电源;可选配HEPA过滤系统,箱体内气体每分钟被过滤一次,快速达到100级气体质量,能为细胞提供理想环境。9 .如何使用厌氧培养系统?P193答:所有要转移的物品被放入缓冲室后,关闭外门;按下“CycleStar0即可进行自动去除缓冲室中的氧气。经循环换气的三个气体排空阶段和两个氮气净化阶段,使缓冲室气体达98%的无氧状态,再经缓冲室气压平衡,操作箱与缓冲室平衡,厌氧状态灯显示为ON,此时即可将内门打开,钳催化剂将除去余下的少量02。操作者经手套伸入箱内进行标本接种、培养和鉴定等全部工作。10 .流式细胞仪细胞分选
33、原理。P196答:当某类细胞的特性与要分选的细胞相同时,流式细胞仪就会在这类细胞形成液滴时给含有这类细胞的液滴充以特定的电荷,带有电荷的液滴向下落入偏转板间的静电场时,依所带电荷的不同分别向左偏转或向右偏转,落入指定的收集器内,不带电的液滴不发生偏转,垂直落入废液槽中被排出,从而达到细胞分类收集的目的。11 .电阻抗(库尔特)血细胞检测原理。P211答:血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体,其电阻值大于稀释溶液的电阻值;当血细胞通过检测器的孔径感受区时,检测器内外电极之间的恒流源电路的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号;脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞大小成正比。12
34、.顺序式”分析。P264(分立式自动生化分析仪原理)答:分立式自动生化分析仪按手工操作的方式编排程序,并以有序的机械操作代替手工操作,用加样探针将样品加入各自的反应杯中,试剂探针按一定时间自动定量加入试剂,经搅拌器充分混匀后,在一定条件下反应。反应杯同时作为比色杯进行比色测定。各环节用传送带连接,按顺序依次操作,故称为顺序式”分析。13 .连续流动式和分立式自动生化分析仪在结构上有哪些区别?p264答:分立式与连续流动式自动生化分析仪在结构上的主要区别为:前者各个样品和试剂在各自的试管中起反应,而后者是在同一管道中起反应;前者采用由加样器和加液器组成的稀释器来加样和加试剂,而不用比例泵;前者一
35、般没有透析器,如要除蛋白质等干扰,需另行处理。前者恒温器必须能容纳需保温的试管和试管架,所以比连续流动式分析仪的体积要大。14 .PCR扩增仪的操作规程。P301答:普通PCR扩增仪的操作通常为打开电源,仪器自检,设置温度程序或调出储存的程序,运行即可。定量PCR扩增仪的操作一般都是先打开PCR仪电源,再打开相连电脑中的相应软件,分别设置温度程序、采集通道,并可根据不同仪器的要求进行一些特殊设置,在仪器中放好PCR管,盖好仪器,运行设置好的反应程序。关机时通常先关软件,再关PCR仪,最后关电脑。15 .什么是聚合酶链反应(PCR)技术?答:PCR技术的本质是核酸扩增技术,通过加热使双链DNA解
36、开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述变性-退火引物延伸”过程至25-40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数,可以在体外对目的核酸进行大量复制。五、论述题1 .等电聚焦电泳法的原理、特点。P121-122答:原理:不同的蛋白质等电点不同,如果分子处于pH和等电点一致的溶液中,则泳动就停止进行。如果溶液内的pH是位置的函数,或者说有一个pH的位置梯度,那么在一个稳定连续的线性pH梯度的溶液(两性载体电解质)中进行分离,每一种被分离的两性物质都移向与它的等电点相一致的pH位置,在那里不再移动(称为
37、聚焦)。由于在这点净电荷(正负抵消)为零,因而又称等电聚焦。特点:使用两性载体电解质,在电极之间形成稳定的、连续的、线性的pH梯度。由于聚焦效应”,即使很小的样品也能获得清晰的、鲜明的区带界面电泳速度快。分辨率高。加入样品的位置可任意选择。可用于测定蛋白质类物质的等电点。适用于中、大分子量(如蛋白质、肽类、同工酶等)生物组分的分离分析。2 .现代尿液分析仪的光学系统有几种答:有三种。滤光片分光系统:采用光源灯(卤灯)发出的白光通过球面积分仪的通光筒照射到试剂带上,试剂带把光反射到球面积分仪中,透过滤色片,得到特定波长的单色光,照射到光电二极管上,实现光电转换。LED系统:采用了可发射特定波长的
38、发光二极管(LED)作为检测光源,两个检测头上都有三个不同波长的光电二极管,对应于试剂带上特定的检测项目分别为红、橙、绿单色(660nm、620nm、555nm),它们相对于检测面以60°照射在反应区上。作为光电转换器件的光电二极管垂直安装在反应区的上方,在检测光照射的同时接收反射光。CCD系统:采用了目前比较尖端的光学元件CCD技术进行光电转换。它是把反射光分解为红绿蓝(RGB:610nm、540nm、460nm)三原色,又将三原色中的每一种颜色分为2592色素,这样整个反射光分为7776色素,可精确分辨颜色由浅到深的各种微小变化。CCD的基本单元是MOS(金属氧化物半导体),当光
39、照射到CCD硅片上时,在栅极附近的半导体内产生电子-空穴对,其多数载流子被栅极电压排开,少数载流子则被收集在势阱中形成信号电荷。将一定规则变化的电压加到CCD各电极上,电极上的电子或空穴(信号电荷)就能沿着半导体表面按一定方向移动,形成电信号。3 .双脱氧链末端终止法测序原理。P306答:双脱氧链末端终止法测序原理是利用DNA的体外合成过程。反应体系中的核甘酸单体除了4种dNTP外,还有ddNTP。反应过程中ddNTP虽然可以与正在延伸的DNA链的末端形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中,但它们本身没有3'-OH,不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,从而使正在延伸的DNA链在此终止。据此原
40、理分别设计四个反应,每一反应中存在相同的DNA模板、引物、四种dNTP和一种ddNTP(如ddATP),则新合成的DNA链在可能掺入正常dNTP的位置都有可能掺入ddNTP而导致新合成链在不同的位置终止。由于存在ddNTP与dNTP的竞争,生成的反应产物是一系列长度不同的多核甘酸片段。通过PAGE对长度不等的新生链进行分离后,就可根据片段大小直接读出新生DNA链的序列4 .流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理。P242答:测定是应用流式细胞术和电阻抗的原理进行的。当一个尿液标本被稀释并经染色液染色后,靠液压作用通过鞘液流动池。反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时,被一种无粒子颗粒的鞘液包围,使每
41、个细胞以单个纵列的形式通过流动池的中心(竖直)轴线,在这里每个尿液细胞被氮激光光束照射。每个细胞有不同程度的荧光强度、前向散射光强度和电阻抗的大小。仪器将这种荧光.散射光等光信号转变成电信号,并对各种信号进行分析,最后得到每个尿液标本产生出的直方图(histogram)和散射图(scattergranrj)。通过分析这些图形,即可区分每个细胞并得出有关细胞的形态5 .流式细胞仪依据什么进行分类?各类型有什么特点?P197答:流式细胞仪根据功能不同可分为临床型和科研型。临床型只有分析功能,没有分选功能,仪器的光路调节系统固定,自动化程度高,操作简便,易学易掌握。科研型既有分析功能又有分选功能,可
42、快速将所感兴趣的细胞分选出来,并可将单个或指定个数的细胞分选到特定的容器里,同时可选配多种波长和类型的激光器,适用于更广泛更灵活的科学研究。流式细胞仪根据其结构不同又可分为一般流式细胞仪和狭缝扫描流式细胞仪。前者的激光光斑为椭圆形,光斑直径大于被检细胞体积,只能提供细胞内某种生物化学成分的参数,不能对细胞形态和亚细胞形态进行分辨。狭缝扫描流式细胞仪是一种高分辨率的检测仪器,被检细胞直径大于激光光斑直径,细胞通过光束时各部分被依次扫描,根据荧光信号的先后,就可得到一维的细胞轮廓组方图,可计算出细胞直径大小、核直径大小、核浆比例等一系列的形态学信息。6 .简述多色荧光标记引物法和多色荧光标记终止底物法的原理。二者有哪些不同之处?P307答:荧光标记引物法是指将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的端。当相同碱基排列的寡核甘酸链作为骨架分别被4种荧光染料标记后,便形成了一组(4种)标记引物。这四种引物的序列相同,但端标记的荧光染料颜色不同。在测序反应中,模板、反应底物、D
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