小吞噬实验 - 辽宁医学院基础医学实验教学中心ppt课件

1、免疫学实验四免疫学实验四辽宁医学院辽宁医学院免疫与病原生物学教研室免疫与病原生物学教研室实验内容实验内容一、中性粒细胞吞噬功能测定一、中性粒细胞吞噬功能测定二、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定二、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定 实验原理实验原理 实验资料实验资料 实验方法实验方法 察看结果察看结果【原理】【原理】 利用注入腹腔的淀粉肉汤液作为刺激物，利用注入腹腔的淀粉肉汤液作为刺激物，使使 M向腹腔移行，再将向腹腔移行，再将CRBC注入小鼠腹腔注入小鼠腹腔 而被而被M吞噬。吞噬。 【资料】【资料】 1.安康小鼠、安康小鼠、2%淀粉肉汤液、生理盐

2、水、淀粉肉汤液、生理盐水、 5%CRBC。 2.注射器、载玻片。注射器、载玻片。1.实验前两天，给小鼠腹腔注射灭菌的实验前两天，给小鼠腹腔注射灭菌的2%淀粉肉汤液淀粉肉汤液1ml。2. 5% CRBC 1ml腹腔注射，轻揉腹部，使腹腔注射，轻揉腹部，使CRBC散散开，开，30min后脱颈处死小鼠，剖开腹腔，用毛细吸后脱颈处死小鼠，剖开腹腔，用毛细吸管吸出腹腔渗出液后滴加在载玻片管吸出腹腔渗出液后滴加在载玻片 ，涂片，自然枯，涂片，自然枯燥。燥。 3.用用G-W染色液，初染染色液，初染1min，蒸馏水复染，蒸馏水复染5min，水，水洗，吸干后镜检。洗，吸干后镜检。【方法】【方法】 胞浆呈淡紫色，

3、胞浆呈淡紫色，胞核呈紫蓝色，一胞核呈紫蓝色，一个个M可吞噬多个可吞噬多个CRBC，有的，有的M胞内遗留胞内遗留CRBC被被消化的痕迹。消化的痕迹。【结果察看】【结果察看】中性粒细胞吞噬功能测定中性粒细胞吞噬功能测定 实验原理实验原理 实验资料实验资料 实验方法实验方法 察看结果察看结果 【原理】【原理】 中性粒细胞具有非特异性吞噬功能，中性粒细胞具有非特异性吞噬功能，将细菌与中性粒细胞混合孵育，可促使中性将细菌与中性粒细胞混合孵育，可促使中性粒细胞吞噬细菌，去除外来异物。粒细胞吞噬细菌，去除外来异物。 【资料】【资料】 1.金黄色葡萄球菌菌液。金黄色葡萄球菌菌液。 2.载玻片、采血针、接种环、

4、载玻片、采血针、接种环、G-W染液。染液。【方法】【方法】1.取干净载玻片加一滴金黄色葡萄球菌菌液。取干净载玻片加一滴金黄色葡萄球菌菌液。2.用采血针采耳血一大滴，用载玻片一角取下与菌液混用采血针采耳血一大滴，用载玻片一角取下与菌液混合合(载玻片要先用酒精消毒载玻片要先用酒精消毒)。3.将载玻片放入湿盒将载玻片放入湿盒37孵育孵育2530min。4.用接种环取表层菌血混合液涂片，枯燥，用用接种环取表层菌血混合液涂片，枯燥，用G-W染色染色液，初染液，初染1min，蒸馏水复染，蒸馏水复染5min，水洗，吸干后镜，水洗，吸干后镜检。检。 【结果察看】【结果察看】胞浆呈淡紫色，胞浆呈淡紫色，胞核与细菌呈紫胞核与细菌呈紫蓝色。蓝色。本卷须知本卷须知v用后的玻片一定要放到玻片缸内用后的玻片一定要放到玻片缸内!v接种环运用前后要烧灼灭菌接种环