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文档简介
1、原 料(A+B)萃 取溶剂+萃取物质A分 离萃取物质A循环萃取剂萃去残质B萃取剂补充 4. 免疫化学检测方法免疫化学检测方法 A. 概况概况 国外国外: : 1971 1971年年ErcegovichErcegovich等首次用等首次用ELISAELISA检测检测 DDTDDT和马拉硫磷农药残留。和马拉硫磷农药残留。 8080年代以后,美国化学会将免疫化学方法与年代以后,美国化学会将免疫化学方法与GCGC、 HPLCHPLC一起列为农药残留分析三大支柱技术。一起列为农药残留分析三大支柱技术。 可达到超微量检测。可达到超微量检测。 美国美国EPAEPA、USDAUSDA和和AOACAOAC分别制
2、订了农残分别制订了农残ELISAELISA试剂试剂 盒标准盒标准 ELISAELISA不仅可以定性,而且可以定量检测农残。不仅可以定性,而且可以定量检测农残。 目前有目前有6060多种农药建立了多种农药建立了ELISAELISA检测方法,检测检测方法,检测 限可达限可达ngng甚至甚至pgpg 试剂盒: Immunosystems Inc. Res-I-Mune. Neo Gen Inc.: Agriscreen Titets Milligore Inc. 国内国内: : 大多数农药品种免疫分析方法未建立。大多数农药品种免疫分析方法未建立。 已有的免疫分析试剂盒技术性能不过关。已有的免疫分析试
3、剂盒技术性能不过关。 新方法建立:新方法建立: * * 建立方法,检验特异性,建立标准曲线,建立方法,检验特异性,建立标准曲线, 确定最小检出限。确定最小检出限。 * * 检测精确度、准确度、灵敏度,试验回收率。检测精确度、准确度、灵敏度,试验回收率。 * * 优化条件,研制试剂盒。优化条件,研制试剂盒。 * * 与与GBGB方法比较。方法比较。 试剂盒研制与应用:试剂盒研制与应用: * * 确定反应缓冲液,洗涤液,酶标抗原,显确定反应缓冲液,洗涤液,酶标抗原,显 色剂,终止剂的工作浓度。色剂,终止剂的工作浓度。 * * 研究固定抗体的基体,反应缓冲体系。研究固定抗体的基体,反应缓冲体系。 * * 研究酶标抗原及抗体和其它反应试剂的稳定研究酶标抗原及抗体和其它反应试剂的稳定 性、保存期和保存条件。性、保存期和保存条件。 建立免疫分析的关键问题建立免疫分析的关键问题 免疫抗原的制备。免疫抗原的制备。 反应的特异性
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