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文档简介

蛋白质分离纯化的基本原则蛋白质分离纯化的基本原则l粗提：粗提：l 盐析盐析 有机溶剂沉淀有机溶剂沉淀l 结晶结晶 等电点沉淀等电点沉淀l精提精提 ：l 离心（离心（centrifugation）l 电泳（电泳（electrophoresis）l l 层析（层析（chromatography）l沉降系数（sedimentation constant）与蛋白质的密度和形状有关，也与介质的密度和粘度有关l离心可用于两个方面：l作为一种分离技术从混合物中分离一种成分l作为一种分析技术测定物质的物理性质，如分子量，密度，形状及平衡结合常数（equilibrium binding constants）速度 时间蔗糖梯度速率区带离心（速率区带离心（rate-zonal centrifugation）IEFSDS-PAGE每一个点代表一条多肽链，每一条多肽链有自己的等电点和分子量。多肽链可以用染色法或放射自显影进行检测流动相固定相大分子小分子葡聚糖小株洗脱示意图结合 洗脱曲线IEF 原理IEF 测 pI氨基酸层析图谱

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