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1、会计学1分子生物学分子生物学8DNA重组技术重组技术DNA重组(重组(DNA recombination )。)。第1页/共76页第2页/共76页第3页/共76页第4页/共76页第5页/共76页第6页/共76页由此产生的粘性末端称为由此产生的粘性末端称为配伍末端配伍末端(compatible end),),可进行相互连接,在可进行相互连接,在DNA重组中具有更大灵活性。重组中具有更大灵活性。第7页/共76页第8页/共76页第9页/共76页第10页/共76页第11页/共76页第12页/共76页第13页/共76页第14页/共76页第15页/共76页第16页/共76页第17页/共76页lacZ第18
2、页/共76页n galactosidase 半乳糖苷酶半乳糖苷酶,nX-gal: 5-溴溴-4-氯氯-3-吲哚吲哚-D-半乳糖苷半乳糖苷nlac- E.coli: 半乳糖苷酶基因突变型大半乳糖苷酶基因突变型大肠杆菌肠杆菌第19页/共76页第20页/共76页n重组的噬菌体容易筛选和储存。重组的噬菌体容易筛选和储存。第21页/共76页第22页/共76页第23页/共76页第24页/共76页第25页/共76页第26页/共76页第27页/共76页第28页/共76页第29页/共76页第30页/共76页第31页/共76页第32页/共76页第33页/共76页第34页/共76页5G AATT C3连接酶连接酶5
3、GAATT C3 3C TTAA G5 3C TTAAG5第35页/共76页第36页/共76页.TCGAAAAACGTA.TCGAAAAACGTA.第37页/共76页第38页/共76页第39页/共76页。n此种方法转化频率很低(大约此种方法转化频率很低(大约0.01-0.1%),故需一个很强的选择性标志),故需一个很强的选择性标志基因。基因。第40页/共76页第41页/共76页第42页/共76页第43页/共76页第44页/共76页第45页/共76页第46页/共76页第47页/共76页第48页/共76页第49页/共76页第50页/共76页第51页/共76页第52页/共76页第53页/共76页第54页/共76页第55页/共76页第56页/共76页第57页/共76页第58页/共76页第59页/共76页AGGAGGUCCUCCAUG53mRNA3516S rRNAsmall ribosomal subunit第60页/共76页第61页/共76页第62页/共76页第63页/共76页第64页/共76页第65页/共76页第66页/共76页第67页/共76页a螺旋与DNA双螺旋的大沟接触来调控转录第68页/共76页第69页/共76页
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