HPV基因分型演示教学

1、HPV基因分型人乳头瘤病毒（人乳头瘤病毒（human papillomavirus， HPV）简介）简介v 小分子小分子dsDNA病毒，外形呈病毒，外形呈20面体对称型，无包膜，直面体对称型，无包膜，直径约为径约为45-55nm，相对分子量，相对分子量5106v 属于乳多空病毒科属于乳多空病毒科(Papovaviridae)的乳头瘤病毒属的乳头瘤病毒属 v 具有严格的宿主范围和组织特异性，主要感染人的皮肤或具有严格的宿主范围和组织特异性，主要感染人的皮肤或粘膜上皮细胞粘膜上皮细胞v HPV有多种亚型，目前已发现的就达一百多种，其中至少有多种亚型，目前已发现的就达一百多种，其中至少四十多种与宫颈

2、癌病变有关四十多种与宫颈癌病变有关HPV基因结构特点基因结构特点v 为双链环状为双链环状DNA，长约，长约8kb，由，由8个个ORF框组成，按基因框组成，按基因功能可分为长控制区（上游调控区）、早期基因区（功能可分为长控制区（上游调控区）、早期基因区（E1、E2、E4-E7）编码六个早期蛋白和晚期基因区（）编码六个早期蛋白和晚期基因区（L1、L2）编码两个晚期蛋白编码两个晚期蛋白HPV基因结构特点基因结构特点v E1、E2与病毒的复制有关，与病毒的复制有关，E6、E7是癌基因，分别与抑是癌基因，分别与抑癌基因癌基因P53、pRb结合并导致其失活，这是高危型结合并导致其失活，这是高危型HPV感感

3、染与子宫颈癌发生的重要分子机制染与子宫颈癌发生的重要分子机制v L1、L2编码病毒的结构蛋白形成病毒外壳，编码病毒的结构蛋白形成病毒外壳，L2蛋白在病蛋白在病毒感染靶细胞的过程中及其感染后的生命周期中都发挥着毒感染靶细胞的过程中及其感染后的生命周期中都发挥着重要的作用重要的作用 。不同型别。不同型别HPV L2蛋白蛋白8-81、90-115和和280-333(以以HPV16为基准为基准)区域的氨基酸序列高度保守区域的氨基酸序列高度保守 HPV基因结构图基因结构图HPV-DNA检测方法检测方法v核酸杂交技术v聚合酶链反应技术v基因芯片技术v杂交捕获技术vSP染色检测HPV早期蛋白E6v多种检测方

4、法联合使用HPV基因分型基因分型v依据依据HPV与宫颈癌发生相关性高低可分为高危型与宫颈癌发生相关性高低可分为高危型和低危型和低危型v经美国FDA确认的HPV高危型有：vHPV16、18、31、33、35、39、45、51、 52、56、58、59、66、68 等14种v低危型有：HPV6、11、42、43、44等5种 现有文献报道的HR类型中基本都包含有：HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，82等17种国内外国内外HPV检测试剂盒分析检测试剂盒分析v坎普HPV分型检测试剂盒能检测出HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68等15种高危型和HPV6,11,42,43,44,CP8304等 6种低危型v Roche产品linear array HPV gentyping检测型别包括：16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73 (MM9), 81, 82 (MM4)等18种高危型和 6,11,26,40,