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文档简介
1、会计学1AFTB酶联免疫检测酶联免疫检测Hangzhou, Sept. 24, 20022第1页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 20023第2页/共30页样品样品黄曲霉毒素B1分子Hangzhou, Sept. 24, 20024第3页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 20025第4页/共30页微微 孔孔 表表 面面 情情 况况 AFB1抗抗体体Hangzhou, Sept. 24, 20026第5页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 20027第6页/共30页标准溶液Hangzhou, Sept. 24, 20028第7页/共30页Hangzh
2、ou, Sept. 24, 20029第8页/共30页酶酶标抗原标抗原酶AFB1Hangzhou, Sept. 24, 200210第9页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 200211第10页/共30页样品酶标抗原 样 品 孔先加后加Hangzhou, Sept. 24, 200212第11页/共30页标准品酶标抗原标 准 孔先加后加Hangzhou, Sept. 24, 200213第12页/共30页孵育孵育30分钟分钟 抗抗 原原 与与 抗抗 体体 结结 合合Hangzhou, Sept. 24, 200214第13页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 200
3、215第14页/共30页洗涤洗涤5次,间隔次,间隔2分钟分钟Hangzhou, Sept. 24, 200216第15页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 200217第16页/共30页加入加入反应底物反应底物A和和B孵孵 育育 15 分分 钟钟Hangzhou, Sept. 24, 200218第17页/共30页显显 色色Hangzhou, Sept. 24, 200219第18页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 200220第19页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 200221第20页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 20022
4、2第21页/共30页阴阴性对照孔性对照孔=没有黄曲霉毒素没有黄曲霉毒素B1分子与酶标抗原竞争分子与酶标抗原竞争所有所有抗体都与酶标抗原结合抗体都与酶标抗原结合Hangzhou, Sept. 24, 200223第22页/共30页Hangzhou, Sept. 24, 200224第23页/共30页1 ng/ml 标准孔标准孔 = 黄曲霉黄曲霉毒素毒素B1分子结合到抗体上分子结合到抗体上剩余剩余的抗体再与酶标抗原结合的抗体再与酶标抗原结合Hangzhou, Sept. 24, 200225第24页/共30页阳阳 性性 样样 品品酶标酶标抗原结合得越少,颜色越浅抗原结合得越少,颜色越浅Hangzhou, Sept. 24, 200226第25页/共30页加加入终止液,反应液由蓝色变成黄色,入终止液,反应液由蓝色变成黄色,上酶标仪读取数据,画标准曲线上酶标仪读取数据,画标准曲线Hangzhou, Sept. 24, 200227第26页/共30页调零孔阴性孔0.1 ng/ml0.5 ng/ml1 ng/ml5 ng/ml10 ng/ml 0.1 1 10 ng/mlO.D.Hangzhou, Sept. 24, 200228第27页/共30页 0.1 1 10 ng/mlO.D.调零孔阴性孔
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