第3章培养基1-dong

1、MS培养基20世纪30、40年代的简单培养基无机盐浓度低，杂质高，培养效果差维生素氨基酸生长调节物质调节无机盐浓度胡萝卜黑樱桃MS基本培养基（含有较高浓度的硝酸盐、铵盐、钾盐）改良MS培养基椰乳、水解酪蛋白、氨基酸等增加各种无机盐浓度，尤其是氮和钾的浓度生长调节物质图图 3.1培养基改良过程中营养物质的变化培养基改良过程中营养物质的变化1865年Knop盐溶液培养基1939年 Gautheret 愈伤组织培养基1925年Uspenski和Uspenskaia海藻培养基1943年White根培养基1962年Murashige & Skoog的MS培养基B5十字花科植物(Gamborg等，1968

2、)N6(朱至清等,1975,1987)和Nitsch H (Nitsch,1969)禾本科植物花粉培养WS (Wolter & Skoog，1966)& LS(Lingmal & Skoog，1962)木本植物改良培养基图3.2 培养基的发展过程图3.2 培养基的发展过程图3.2 培养基的发展过程图图3.2 培养基的发展过程培养基的发展过程一、培养基的种类一、培养基的种类不同的植物不同的植物不同培养部位不同培养部位 不同的培养目的不同的培养目的需选用不同需选用不同的培养基的培养基一、培养基的种类一、培养基的种类 培养基成分培养基成分二、培养基的成分二、培养基的成分水水无机营养成分无机营养成分有

3、机营养成分有机营养成分植物激素植物激素培养体的支持材料培养体的支持材料其它辅助性物质其它辅助性物质水是植物原生质体的组成成分，也是一切水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。代谢过程的介质和溶媒。 配制培养基母液时要用配制培养基母液时要用蒸馏水或者去离子蒸馏水或者去离子水水，以保持母液及培养基成分的精确性，防止储，以保持母液及培养基成分的精确性，防止储藏过程发霉变质。藏过程发霉变质。大规模生产时可用自来水。大规模生产时可用自来水。但但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。起不良效果。表表11 11 植物所需大量元素占植

4、物体干重的植物所需大量元素占植物体干重的 百分数百分数(%) (%) 也是也是染色体的组成成分，在细胞分裂过程中起作用；染色体的组成成分，在细胞分裂过程中起作用； 。缺钙时细胞分裂受到影响，细胞壁形缺钙时细胞分裂受到影响，细胞壁形成受阻，严重时幼芽、幼根会溃烂坏死。成受阻，严重时幼芽、幼根会溃烂坏死。v现代生物学研究还证明钙是植物体内的信号分子（信使）现代生物学研究还证明钙是植物体内的信号分子（信使）之一，在植物信号转导中发挥重要作用，钙离子与钙调之一，在植物信号转导中发挥重要作用，钙离子与钙调蛋白结合形成的蛋白结合形成的Ca2+CaM复合体，能活化各种酶，调复合体，能活化各种酶，调节植物对外

5、界环境的反应与应答过程。节植物对外界环境的反应与应答过程。碳水化合物碳水化合物维生素维生素氨基酸氨基酸肌醇肌醇天然复合物天然复合物椰乳椰乳 、水解酪蛋白、水、水解酪蛋白、水解乳蛋白、酵母提取物、解乳蛋白、酵母提取物、胰蛋白胨、西红柿汁、胰蛋白胨、西红柿汁、香蕉粉、橘子汁、可可香蕉粉、橘子汁、可可汁汁（三）有机营养成分（三）有机营养成分1. 碳水化合物碳水化合物种类：种类： VB1 (盐酸硫胺素盐酸硫胺素) 、 VB6 (盐酸吡哆醇盐酸吡哆醇) 、Vpp( (烟酸烟酸) ) 、 Vc (抗坏血酸抗坏血酸)，有时还使用生物素、叶酸、核黄素等。，有时还使用生物素、叶酸、核黄素等。浓度：浓度： 0.1

6、1.0mg/L作用：作用： VB1促愈伤组织产生，提高活力促愈伤组织产生，提高活力 VB6 促根生长促根生长 Vpp与代谢和胚发育有关与代谢和胚发育有关 Vc防组织褐变防组织褐变2.维生素维生素(vitamin)促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长以及以及胚状体和芽的形成胚状体和芽的形成对组织细胞繁殖、分化的促进作用对组织细胞繁殖、分化的促进作用浓度浓度100 mg/L5. 天然复合物天然复合物6、植物激素、植物激素(hormone)植物激素是植物激素是指自然状态下植物体内合成，指自然状态下植物体内合成，并从产生处运送到别处，对生长发育产并从产生处运送到别处，对生长发育产生显著作用的微量（生显著作

7、用的微量（1微摩尔微摩尔/升以下）有升以下）有机物；机物；植物生长调节剂植物生长调节剂是指一些具有植物激素是指一些具有植物激素活性的人工合成的物质。活性的人工合成的物质。植物生长植物生长调节物质调节物质植物激素植物激素植物生长调节剂植物生长调节剂在植物组织培养中使用的生长调节物质主要在植物组织培养中使用的生长调节物质主要有有生长素类和细胞分裂素类生长素类和细胞分裂素类两大类，少数培两大类，少数培养基中还添加赤霉素养基中还添加赤霉素GA3等等 （1）种类）种类IAA IBANAA 2,4D（2）作用诱导愈伤组织形成和根分化，促进细）作用诱导愈伤组织形成和根分化，促进细胞分裂和伸长生长。胞分裂和伸长生长。根对生长素最敏感，在极低浓根对生长素最敏感，在极低浓度下就可促进生长，其次是茎和芽。度下就可促进生长，其次是茎和芽。 （3）浓度）浓度0.055mg/L，（4）天然的生长素热稳定性差，高温高压或受光天然的生长素热稳定性差，高温高压或受光条件易被破坏。在植物体内也易受到体内酶的分解。条件易被破坏。在植物体内也易受到体内酶的