胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定与药物敏感性的检测

1、胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定与药物敏感性检测与药物敏感性检测报告人：邵健QQ：6446368622012.10.19报告内容报告内容 胸膜肺炎放线杆菌简介 分离细菌的猪场背景 分离APP的鉴定 药物敏感性的检测 防治方案的确定 猪 胸 膜 肺 炎 放 线 杆 菌 ( A c t i n o b a c i l l u s p l e u r o -pneumoniae,APP)为革兰氏阴性球杆菌，有荚膜，大多溶血，APP有两个生物型，生物型是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)依赖性细菌，有13个血清型，是主要的致病血清型(Barbara，2008)。 该病主要以急性出血和慢

2、性的纤维素性坏死性胸膜炎病变为主要特征，主要侵害25月龄、体重3060 kg的猪,且具高度传染性，常呈急性或最急性经过，发病率、死亡率均在50%以上（冯学平，1987；任光澄，1981）一一 胸膜胸膜肺炎放线杆菌简介肺炎放线杆菌简介分离细菌的猪场背景 湖南XX猪场3月龄左右的猪发病并出现大量死亡。临床主要表现为体温升高,呼吸困难，迅速死亡，死亡时口鼻流出少量的泡沫状血性液体。剖检可见病猪肺呈紫红色肝变，肺炎区表面有纤维素性附着物，胸膜增厚，表现为明显的胸膜炎病理变化。 今年三月份该猪场也发生过猪胸膜肺炎，采用疫苗控制收效甚微，后采用抗生素预防加治疗才有所改善，在10月份保育猪再次大量发病胸膜肺

3、炎。二二 分离分离细菌的猪场背景细菌的猪场背景发病猪肺充血、出血呈紫红色发病稍慢的表现为严重的纤维素性胸膜炎，在肺脏表面有黄白色的纤维素性渗出物发病猪肺脏的病理变化发病猪肺脏的病理变化（刁有祥，猪胸膜肺炎放线杆菌分子流行病学研究，2005）组织 细菌胸膜肺炎放线杆菌链球菌肺1- -+ +肺2+ +- -肺3+ +- -肺4+ +- -心血1- -+ +心血2- - -送检病原菌分离情况送检病原菌分离情况表一 送检病原菌分离统计表菌落形态的观察三三 胸膜肺炎放线杆菌的鉴定胸膜肺炎放线杆菌的鉴定分离菌在TSA.V.S培养基上均为边缘整齐、圆形、表面稍隆起、半透明湿润、针尖至中等大小的菌落 细菌培养

4、基CS1016F2-APPCS1016F3-APPCS1016F4-APPCS1016F1-SSTSA.V.S+血琼脂+SS琼脂APPAPP在不同培养基上的生长情况在不同培养基上的生长情况表二 分离得到细菌在不同培养基上的生长情况 分离培养物经涂片、染色、镜检，均能见革兰氏阴性，单在、成双或链状的球菌或球杆菌革兰氏染色镜检革兰氏染色镜检糖 菌株CS1016F2-APPCS1016F3-APPCS1016F4-APP棉子糖木糖+ + + +甘露醇+ + + +鼠李糖麦芽糖+ + +阿拉伯糖乳糖山梨醇-半乳糖苷+ + + +蔗糖+ + + +生化生化鉴定鉴定结果结果注：代表阴性；+代表阳性；代表反

5、映不明显表三 生化鉴定结果统计表PCR鉴定鉴定 M 1 2 3 4 5M为Trans DNA Marker 1为链球菌；2、3、4 150bp条带为胸膜肺炎放线杆菌；5为H2O对照200100图一 PCR特异性检测细菌名称： APP 菌株编号：CS1016F2-APP药敏试纸抑菌圈（mm）敏感性药敏试纸抑菌圈（mm） 敏感性头孢噻肟26S先锋霉素V24S阿莫西林26S青霉素20R复方新诺明18S氨苄西林24S阿奇霉素26S链霉素10R阿米卡星24S庆大霉素14I多粘菌素B10I氟苯尼考10R四环素14R强力霉素14I卡那霉素14I痢特灵16I萘啶酸24S壮观霉素14R新霉素12R四四 药物敏感

6、性的检测药物敏感性的检测表四 CS1016F2-APP药物敏感性统计表细菌名称：APP 菌株编号：CS1016F3-APP药敏试纸抑菌圈（mm）敏感性药敏试纸抑菌圈（mm）敏感性头孢噻肟28S先锋霉素V26S阿莫西林28S青霉素34S复方新诺明18S氨苄西林30S阿奇霉素20S链霉素12I阿米卡星26S庆大霉素13I多粘菌素B10I氟苯尼考12R四环素14R强力霉素14I卡那霉素14I痢特灵16I萘啶酸26S壮观霉素16I新霉素12R表五 CS1016F3-APP药物敏感性统计表细菌名称：APP 菌株编号：CS1016F4-APP药敏试纸抑菌圈（mm）敏感性药敏试纸抑菌圈（mm） 敏感性头孢噻

7、肟28S先锋霉素V28S阿莫西林28S青霉素22R复方新诺明20S氨苄西林28S阿奇霉素20S链霉素14I阿米卡星28S庆大霉素15S多粘菌素B12S氟苯尼考11R四环素12R强力霉素14I卡那霉素16I痢特灵16I萘啶酸22S壮观霉素17I新霉素12R表六 CS1016F4-APP药物敏感性统计表 药敏试验结果表明，头孢类药物、氨基糖甙类药物可作为治疗本场猪传染性胸膜肺炎的首选药物。若猪采食和饮水正常,可采取注射与口服同时给药。应注意交替用药，按疗程投药，这样才能收到较好的治疗效果。同时注意猪场内的消毒与卫生。 考虑到本场之前大规模发病时采取各种预防措施收效甚微，后来通过抗生素才得以控制，而且分离株对比较多的药物敏感，本次发病依然可以采用抗生素解决，选择药敏试验敏感菌株。 五五 防治方案的确定防治方案的确定 各年龄猪均可感染猪胸膜肺炎放线杆菌，3月龄猪最易感。本病多发于每年的4-5月或9-11月，具有明显