消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案

1、l制药有限公司 GMP 文件文件编码： ZL YF 005 05Cleaning and Sanitizing Compounds the Effect of the Programme Validation Protocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案起草： 日期： 审核： 批准： 日 期 ： 实施日期： 颁发部门：质量部分发部门：质量部、工程部验证小组名单组长姓名职务职称部门成员姓名职务职称部门文件编码： RVP-CV-006a-00立项申请审批表立项题目消毒剂消毒效果及有效期确认I立项编号VP- CV- 006-a- OO立项部门生产部申请日期年月日确认对象1消毒剂l、先决条件确认

2、2、人员资质确认3、文件确认4、检测仪器仪表确认5、菌种确认6、培养基和稀释液的配制确认7、中和剂鉴定试验确认内容9、75乙醇 溶 液 、 0. 2新洁 尔灭 溶 液 消 毒 效 力的确认10、消毒效力现场考察试验l l、消毒剂储存有效期确认120.2新洁尔灭溶液和 75乙醇溶液消毒效力周期的确认审核意见方案编制要求：签名：年月日方案编制及实施要求， 消 毒 剂 消 毒 效 果 及 有 效 期 确 认 方 案由生产部起草。1实施要求：消 毒剂消毒效果及有效期确认方案实施的时间为 2012 年月确认总负责人批准签名：年月日方案审核和批准文件名称： 消 毒 剂 消 毒 效 果 及有效期确认文件编码

3、： VP- CV- 006 a - 00编 写 人日期 ：年月日审核人姓名职 务签名日期批准人：日期：年月日执行日期：年月日年月日验证小组人员名单：小组职务姓名所在部门职务组长生产部成员生产部成员生产部成员生产部成员生产部成员生产部成员生产部成员质量部成员质量部成员质量部成员质蜇部成员质噩部成员质噩部成员质量部成员质噩部成员工程部Tablet of Content目录1. 目的和范围.错误！ 未定义书签。2. .错.误！ 未定义书签。3. . . . . . .错误！ 未定义书签。4. 定义与缩写 错误！ 未定义书签。5. 参考文件.错.误！.未.定.义.书.签。.6. 概述 .错.误！ 未定

4、义书签。7. 确认前准备.8.8.消毒剂消毒效力试验."错误！ 未定义书签。9. 消毒剂有效期确认试验. 1.3.10.验证偏差和变更.··错误！ 未定义书签。11. 附录列表.·.错误！ 未定义书签。l目的通过消霉剂消毒效果及有效期的确认， 科学制订消霉程序， 以保证各洁净级别的操作间及设备外表面按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒防止污染的效果，2 适用范围本方案适用千洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推 车、记录台、凳子等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。3 职责3. 1消毒剂消毒效果及有效期确认小组组长职责3. 1. 1

5、负责组织编写消毒剂消毒效果及有效期确认方案， 组织消毒剂消毒效果及有效期确认方案的培训和实施。3. 1. 2负责消毒剂消毒效果及有效期确认方案实施过程的监控。3. 1. 3负责组织收集各项确认数据， 并对实验结果进行分析， 制 订消毒操作程序。3. 2生产部3. 2. 1负责消毒剂的配制， 及消毒剂消毒效果及有效期确认各项试验的实施。3. 2. 2负责消毒剂配制相关记录的填写， 及消毒剂消毒效果及有效期确认各项试验实施过程关键项目参数的记录。3. 2. 3负责配合质量部进行消毒剂消毒效果及有效期确认各项试验的实施。3. 3质量部3. 3. 1负责消毒剂消毒效果及有效期确认方案的审核、实施、实施

6、过程的监控、归档； 确 认报告的发放、文件资料的保存。3. 3. 2负责消毒剂消毒效果及有效期确认各项试验实施过程中的取样送检， 检验结果的跟踪。3. 3. 3负责消毒剂消毒效果及有效期确认各项试验实施过程中样品的检验，并 出检验报告。3. 3. 4负责组织对确认过程中的偏差进行调查、处理、评估。3. 4工程部3.4. 1负责保证提供消毒剂消毒效果及有效期确认各项试验的条件。4 描述4. 1本公司的洁净区分为十万级、万级和百级， 拟 定 用 千洁净区表面消毒的有 2 种消毒剂： 7 5乙 醇、0. 2新洁尔灭溶液。本次验证方案将选用以上 2 种消毒剂分别进行验证试验。实验分为两部分： 一是实验

7、室考察部分； 二是现场考察部分。4. 2 消毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期如下表：消 毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期序亏仁刁名称消毒对象消毒方法有效期175%乙醇用于地面、墙面、器具、工作服、清洁布、拖布、洁净鞋水池、地漏和手的消毒。采用擦拭、喷洒、浸泡和液封方式密闭保存试验 6 天20.2%新洁尔灭溶液用于地面、墙面、器具、工作服、清洁布、拖布、洁净鞋水池、地漏和手的消毒。采用擦拭、喷洒、浸泡和液封方式密闭保存试验 6 天4. 3 作用对象一样的消毒剂每月轮换使用， 避免表面微生物产生耐药菌株。在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于 10 分钟， 利用消毒

8、剂进行浸泡消毒的不少千 10 分钟。4.4 实验室考察部分， 定 量 悬 浮 试 验法适用于浸泡或液封方式的消毒方法；表 面实验法适用于擦拭或喷洒方式的消毒方法。洁净区设施表面材质有不锈钢、锻锌板及玻璃三 种， 故 表 面 试 验法 选用 不锈钢载片、锁锌板及玻璃裁片模拟洁净区设施表面进行验证试验。两种试验方法作用的消毒剂序号试验方法消毒剂1表面实验法定量悬浮试验法75乙 醇0. 1新洁尔灭溶液75乙 醇0. 1新洁尔灭溶液2344. 5现场考察试验部分选择 10 万级洁净区、万级的微生物限度室、超净工作台设备表面消毒前和消毒后分别进行取样， 测 定 其 微 生 物 数 量 。5 确认程序5.

9、 1 菌种序号名称序列号1金黄色葡萄球菌CMCC(B)260032大肠埃希菌CMCC(B)441023I白色念珠菌CMCC(F) 98001 5 .2培养基备注（ 编 号： BZW15129 )玫瑰红钠琼脂培养接触碟号： BZW12085 )6规格：的5 mm,取样面积为 25m2大豆酪蛋白琼脂培养基接触碟（编5改良马丁液体培养基4改良马丁琼脂培养基3营养肉汤培养基2培养基经 121·c,20min 灭菌备用营养琼脂培养基I名称序号5.3 消毒液拟定选用的中和剂序号消毒剂名称中和剂备注175乙醇l卵磷脂 0 .1聚 山梨酷 80中和剂经 121·c,20min 灭菌备用。2

10、0.1新洁尔灭溶液5.4 器具及设备序号名称l无菌移液管2锥形瓶3无菌试管4璇涡混合器5恒溫水浴锅6恒温恒湿培养箱7恒溫恒湿培养箱5. 5稀释液0. 9无菌 氯 化 钠 溶 液 、 PH7. 0 氯化钠蛋白脉缓冲液6 中和剂鉴定试验6.1 试验目的通过该试验， 确 认所 用 的 中 和 剂 对 对 应 的 消 毒剂有良好的中和作用， 对 试 验 用 菌 剂及其恢复期培养示范有害或不良影响。6.2 菌液的制备及计数6.2.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌工作菌液的制备接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中， 30 35 °C 培养 l 8 2 4 小 时 。 取上述

11、培养物用 0.9 无菌氯化钠溶液做 10 倍系列稀释成l x l08 5x l08 C FU / ml 的工作菌液（如肉汤培养物的浓度已为 l x108 5x l08 C FU / ml, 可不再用 0.9无菌氯化钠溶液稀释）。计数时， 将 l x l08 5x108 C FU /ml 的 工作菌液 10 倍系列稀释成含 so 1OOC FU /m l 菌 液 ，并同时采用营养琼脂培养基 30 35°C 培养 2 天计数。计算该稀释级的平均菌落数， 将计数结果换算成每毫升浓菌液的菌落数。6.2.2 白色念珠菌工作菌液的制备接种白色念珠菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，23 ,._,2

12、 8 °C 培 养 2 4 48 小 时。取上述培养物用 0.9无菌氯化钠溶液做 10 倍系列稀释成 lx l08 5x l08 C FU /ml 的 工作菌液（如肉汤培养物的浓度已为 1x 1085x10 8 C FU/ml ，可 不 再用 0.9无菌氯化钠溶液稀释）。计数时， 将 l x l085x108 C F U/ml 的工作菌液 10 倍系列稀释成含 SO1OOCF U/ml 菌液， 并同时采用改良马丁琼脂培养基 23 28°C 培养 3 天计数。计算该稀释级的平均菌落数， 将计数结果换算成每毫升浓菌液的菌落数。6.3 鉴定试验操作6.3.1 配制 75乙醇、0.

13、2新洁尔灭溶液，具 体 操作 执 行 清 洁 剂和消毒剂管理。将配置好的消毒剂置 20 °C 士l °C恒 温 水 浴 锅 中 备 用 。6 .3 .2分 组操作试验分组及稀释操作方法简表组号 I 混合液A混匀作用 I 混合液B混匀作用 1 取混合液B 或混合液取 0.5ml工作菌液加入下列溶液中lOmin取混合液 A 0.5ml加入下列溶液IOminB的稀释级溶液0.5ml平板计数 ( 2 皿组）1消毒剂4.5ml稀释液4.5ml混合液B、10-l2消哥剂4.5ml中和剂4.5ml混合液B、10-l3中和剂4.5ml稀释液4.5mll. O 2、10-34中和产物4.5m

14、l（消毒液与中和剂比例为 1:1 )稀释液4.5ml10·2、o·35稀释液4.5ml稀释液4.5ml10-2、 10-36稀释液和中和剂各1.0ml 注入无菌平皿中，各 制备2 皿。具体操作· 第 1 组目的： 观察消毒液对试验菌有无杀灭或抑制能力。操作：取消毒剂 4.5ml工作菌液 0.5ml,混匀作用 l Omin 后， 取混合液 0.5ml稀释 液 4.5ml, 混匀作用 lOmin,取 0.5ml 注皿， 平行制备 2 皿。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽玸菌用营养琼脂培养基，倒 置 30 35°C培养 3 天计数； 白 色念珠菌用玫瑰红

15、钠琼脂培养基， 倒置 23 28°C培养5 天计数计数。· 第 2 组目的： 观察残留消毒剂被中和后受到消毒剂作用后的试验菌是否恢复生长。操作：取消毒剂 4.5ml工作菌液 0.5ml,混匀作用 lOmi n 后， 取混合液0.5ml 中和剂 4.5ml,混匀作用 lOmin, 用稀释液稀释成 10-L 分别取未稀释溶液（混合液 0.5mll中和剂4.5ml 的混合液）及10-1 0.5ml 注皿， 各平行制备2 皿。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽玸菌用营养琼脂培养基，倒 置千 30 35°C培养 3 天计数；白色 念珠菌用玫瑰红钠琼脂培养基， 倒 置千

16、23 28°C培养5 天计数。· 第 3 组目的： 观察中和剂是否有抑菌性操作：取中和剂4.5ml工作菌液 0.5ml,混匀作用 lOmin,取混合液0.5ml 1稀释 液 4.5ml,混匀作用 lOmin 后，用 稀释液进行 10 倍系列稀释成 102- 、 103- 。 取相应稀释级 0.5ml 注皿，各 稀释 级 平 行 制 备 2 皿 。金 黄 色 葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽袍菌用营养琼脂培养基，倒 置 30 35 °C 培养 3 天计数；白色 念 珠 菌 用 玫 瑰 红 钠 琼脂 培 养 基 ，倒置 30 35°C 培养 3 天计数计数。

17、· 第 4 组目的： 观 察 中 和 产 物 ， 或未被完全中和残留消毒剂对试验菌的生长繁殖是否有影响。操作：取 消 毒 剂 和 中 和 剂 1:1 的 混 合 液 4 .5ml 工作菌液 0.5ml，混 匀 作 用 l Omi n，取 混合液 0.5ml l稀 释 液 4 .5 ml , 混匀作用 l Omi n 后， 用 稀 释 液 进行 10 倍系列稀释成 l-O2 、 10· 3 。 取相应稀释级 0.5ml 注皿， 各 稀 释 级 平行 制 备 2 J。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽袍菌用营养琼脂培养基，倒置 30 35°C培养 3 天计数；白

18、色 念 珠 菌 用 玫 瑰 红钠琼脂培养基， 倒置 30 35 °C 培养 3 天计。· 第 5 组目的： 作 菌 落 数 对 照 用操 作 ：取稀释液 4.5ml工作菌液 0.5ml, 混匀作用 IOrnin, 取混合液 0.5ml 1稀 释 液 4 .5 ml, 混匀作用 IOmin 后，用稀释 液进行 10 倍系列稀释成 1·02、 10主 取相应稀释级 0.5ml 注皿， 各 稀 释 级平行制备 2 皿。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽玸菌用营养琼脂培 养基，倒置 30 35 °C培养 3 天计数； 白 色 念 珠 菌 用 玫 瑰 红 钠

19、琼脂培 养 基 ，倒 置 30 35°C 培养 3 天计数。· 第 6 组目的： 作 为阴性对照用操作： 分 别 取稀释液和中和剂各 1.0ml 注入无菌平皿中， 各制备 2 皿。结果判断试验结果应符合下列全部条件， 判断所选中和剂合格。 第 1 组无菌生长， 或仅有少数试验菌菌落生长。 第 2 组菌落数比第 l 组菌落数多， 但比第 3、4、5 组菌落数少， 且符合下表要求第 1 组平板平均菌落数。第 2 组平板平均菌落数 5X(x+5)y(y+0.5y) 第 3、4、5 组有相似菌落数生长， 其每组间菌落数误差率不超过 15%。计算公式如下：( 3组间菌落平均数-各 组

20、菌落平均数）的绝对值之和误差率x100 %3x3 组间菌落平均数第 6 组无菌生长。否则， 说明试剂有污染， 应 重 新 进行试验。7 定量悬浮试验0.2新洁尔灭溶液、75乙醇溶液消毒效力的确认（定量悬浮试验法）目的： 由 千 0.2新洁尔灭溶液、75乙醇溶液要通过浸泡或液封消毒，采用将消毒剂置千无菌具塞试管中通过定量悬浮试验法， 确 定 其 消 毒效力是否符合要求。程序：（ 1)菌 种 的 选 择由 千 0.2新洁尔灭溶液、75乙醇溶液中低效消毒剂， 且 不 能杀 灭 芽 玸， 故定量悬浮试验用菌为金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌；( 2 ) 菌 液 制备： 取 金 黄色葡萄球菌、大肠

21、埃希菌接种于营养肉汤培养基中，于 30 35 °C 培养 l 8 24h 即得，培养后微生物浓度应不少千 106 c fu/rnl。取白色念珠菌接种千改良马丁液体培养基中，于 2328 °C 培养 24 48h 即得，培养后微生物浓度应不少于 106 c fu/ml。 (3 )消毒剂的配制： 按 照 清 洁 剂、消毒剂配制使用程序进行配制 0.2新洁尔灭溶液、75乙醇溶液，现配现用。( 4 )试验方法：（ a )在 室 温 条 件 下 将 配 制 好 的0 .2 新洁 尔 灭 溶 液 （ 或 7 5 乙 醇 溶液）按 9ml/支分注千 27 支无菌具塞试管中，按 照 “5分

22、钟组”、" 10分 钟 组” 和 “ 15分钟组“共 3组每组 9 支， 进行分组编号。( b )取供试菌液 ( 106 c fu /ml 的金黄色葡萄球菌菌液， 106 c fu /ml 的大肠埃希菌菌液，10 6c fu/ml 的白色念珠菌菌液）1ml 按照下表， 分 别 接 入 到 盛 有 9ml0.2 新 洁尔 灭 溶液5 分钟组10 分钟组15 分钟组金黄色葡萄球菌m1l支， 共 3 支1ml支， 共 3 支m1l支 ， 共 3 支（ 或 7 5 乙 醇溶液）的试管中（已进行 10 倍稀释），轻轻摇动， 混 合 均匀，并立即开始计时。大肠埃希菌1ml支， 共3支1ml 支

23、， 共3 支1ml支， 共3 支白色念珠菌1ml支， 共3支1ml支 ， 共3 支1ml支， 共3 支（c ) 消毒剂的稀释分别在 5 分钟、10 分钟和 15 分钟时迅速吸取 1ml 菌药混合液，加入到 9ml ( l卵磷脂 0 .1聚 山梨 酷 80) 中和剂中，迅速混匀中和 10 分钟， 分 别 取 上 述经中和的 '5 分钟组”、' 10 分钟组”和 ' 15 分 钟 组 ”的 接 种 细菌的消毒液，倾入过滤杯滤过，然后各用 0.9% 无菌生理盐水 50ml 清洗滤膜，滤过，重复用 50ml0.9无 菌生理盐水 的洗涤共 3 次。取下滤膜， 含 细菌的膜放入营养

24、琼脂平板内，含真菌的膜放入玫瑰红钠琼脂平板内，含 菌膜 面 向上。细菌千 30-35°C的生化培养箱内培养 3d,真菌千 23-2·s c 的霉菌培养箱内培养 5d。培养后在明亮处， 对 平 板 上 的 菌 落 数 进 行 计 数 ， 记 录 计 数 结果 。d阳性对照分别将 106 c fu/ml 金黄色葡萄球菌菌液、106 c fu/ml 大肠埃希菌菌液、106 c fu/ml 的白色念珠菌菌液用无菌注射用水进行梯度稀释至浓度为 1o l OOc fu/ml, 取稀释液体 lml 千平皿中，倾注冷却至 45°C营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基混匀，待 凝 固

25、 后 于 细菌千 30-35°C的生化培养箱内培养 3d,真菌于 23-2·s束后对平板上的菌落数进行计数，记录计数结果。c 的霉菌培养箱内培养 5d。培养结0.2新洁尔灭溶液消毒效力的确认与消毒剂作用时间菌种名称试验组菌落数 ( cfu/ml)l 04平均菌落数( cfu/ml)杀菌率l235 分钟金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌10 分钟金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌15 分钟金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌阳性对照菌种三名称10-310 -4l O-5平 均 菌 落数 ( cfu/ml)金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌确认结果评价：操作人：日 期 ：年月日复

26、核人：日 期：年月日75乙醇溶液消毒效力的确认与消毒剂作 用 时 间菌种名称试验组菌落数 ( cf um/l )l O4平 均 菌 落数 ( cfu/ml)杀 菌 率l235 分钟金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌10 分钟金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌15 分钟金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌阳性对照菌种名称l O-310-4l O-5平 均 菌 落数 ( cfu/ml )金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌确认结果评价：操 作 人 ：日 期：年月日复核人：日 期 ：年月日8 表面试验75乙醇溶液、0.2新洁尔灭溶液消毒效力的确认（表面试验法）目的 由千 75乙醇溶液、0.2新洁尔灭溶液

27、要通过擦拭消毒， 故选用不锈钢载片、锁锌片及玻璃裁片进行表面试验法， 确 定 其 消 毒 效 力 是 否 符 合 要 求 。程 序 ：（ l)菌 种 选 择 ： 由 于 75 乙醇、0.2新洁尔灭溶液中低效消毒剂， 且不 能 杀灭 芽袍 ， 故 表 面 试 验 用 菌 为金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌。( 2 ) 工作菌液制备 取金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌分别接种千营养肉汤培养基中， 千 30 35°C培 养 l 8 24 h 即得， 培养后微生物浓度应不少千 l 06 c fu/ml。取白色念珠菌接种千改良马丁液体培养基中，于 23 28 °C培养 24 48h

28、即得，培 养 后 微 生 物 浓度 应 不少 千 106 c fu / ml。(3 )染菌不锈钢载片制备： 将 经 灭 菌 的 不 锈 钢 载 片 平铺于 无 菌 平 皿 内 ， 滴加金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌含菌量为 l x l085x108 C FU/ml的 菌 液0 .1ml,并均匀涂布千整个载体表面。滴染菌液后， 载 片 置超净工作台晚干后备用。每种菌平行制备两个染菌不锈钢载片； 染 菌 锁 锌 载 片 制 备： 将 经 灭菌的锁锌载片平铺千无菌平皿内， 滴 加金 黄 色 葡萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌含菌量为 l x l085x108 C FU/ml 的菌液 0.1ml

29、,并均匀涂布千整个载体表面。滴染菌液后，载片置超净工作台晚干后备用。每种菌平行 制备两个染菌锁锌载片；染菌 玻 璃 载 片 制 备 ： 因 培养皿 的材质 为玻璃，故用培养皿代替玻璃载片进行染菌试验。进行菌液滴染前，用记号笔在培养皿菌液滴染面的背面画出染菌面积 ( 50mmx50mm)，标注清晰。菌液滴染操作同染菌不锈钢载片制备。(4) )取样试验组：将 消 毒 剂 擦 拭 在 制 备 好 的 染 菌 载 片 上 ，消 毒 剂 作 用 时 间 分 别 为 5min、 l Omin、15min,不锈钢载片、锁锌载片及玻璃载片每个作用时间分别制备 2 个。作用结束后， 用 接 触 碟 取 样 （接

30、 触 碟 规 格 ： 小55 mm,取样面积为 25m2)。取金黄色葡萄球菌用大豆酪蛋白琼脂培养基接触碟（编号： BZW12085)；取大 肠 埃希菌用大豆酪蛋白琼脂培养基接触碟（编号： BZW12085 )；取样白色念珠菌用玫瑰红钠琼脂培养基接触碟（编号： BZW15129)。接触碟取样方法： 打 开 接 触 碟 盖 ， 使 无 菌 培 养 基 表 面 与 取 样 面 直 接 接触 ， 均 匀 按 压 接 触 碟 底 板 ， 确 保 全 部 琼 脂 表 面 与 取 样 面 表 面 均 匀 接 触 1 0 秒 左 右 ， 盖上碟盖。对照组： 对 照 组 的 活 菌 浓 度 同 工 作 菌 液

31、的 制 备 。阴性 对 照 ： 用 接 触 碟 在 已 灭 菌 的 载 片 上 （ 未 染 菌 片 的 载 片 ）按压 取 样 ，操作同上。每种载片及每种接触碟平行制备两份。(5) )培养： 将 取 样 金 黄 色 葡 萄 球 菌 和 大 肠 埃 希 菌 的 接 触 碟 倒 置千 30, ,3 5 °C 培养 3 天计数； 取 样 白 色 念 珠 菌 的 接 触 碟 倒 置于 23,-.,28°C培养 5 天计数计数。( 6 )结果计算： 计 算 试 验 组和对照组的活菌浓度( CFU/ml )， 并换算为对数值 ( N) ,并按下式计算杀灭对数值杀灭对数值 (KL)对照组

32、平均活菌浓度的对数值 ( NO) 试验组活菌浓度对数值 ( NX )可接受标准： 杀 灭 对 数 值(KL) 应 不 低 于3 个对数单位。75乙醇溶液、0.2新洁尔灭溶液消毒效力的确认序号消毒剂名称工作菌液杀灭对数平均值( K L )不锈钢载片 ( min )玻璃载片 ( min )锁锌 载 片( min )510155101551015175乙醇金萄黄球色菌节大肠菌埃希念l=珠I菌巴20.2新洁尔灭溶液金萄黄球色菌葡大肠菌埃念l 习珠匕菌立可标准接受 阴性对照无菌生长；杀灭对数们(KL)应不低千 3 个对数单位确认结果评价：操 作 人 ：日 期 ：年月日9 消 毒 效 力 现 场 考 察

33、试 验复核人：日 期 ：年月日目 的 ： 确 认 消 毒剂对相应设施的实际消毒效力。操 作 ：（ l ）生 产 车 间 岗 位 操作人 员 按 照 洁 净 区 卫 生 清 洁 程 序 、地漏的 清 洁 消 毒程序、10 万级洁净区洁具清洁消毒程序、万级洁净区洁具清洁消毒程序、地漏清洁程序进行清洁。( 2 )生产车间岗位操作人员， 使用放冷的注射用水， 按照清洁剂、消霉剂配制使用程序进行 75乙醇溶液、0.2的新洁尔灭溶液配制， 现 配 现 用 。 按照洁净区卫生清洁程序进行清洁消毒， 分 别 清 洁 消 毒 10 万级洁净区各房间的顶棚、墙面、工作台面和墙面、地漏、水池下水； 10万 级 洁

34、净 区 的 工作鞋、清洁布、拖布；万级 区微生物限度室等房间顶棚、墙面、工作台面和墙面、地漏、水池下水，万 级 洁净 区 的 工 作 鞋 、清洁 布 、 拖 布 等 区 域 。(3 ) 消 毒 15 分钟后， 由 Q A 人员到车间按照接触碟法取样程序进行洁净区表面微生物的采样； 用 浸 泡 或液 封 方 式 的 采 用无 菌 吸 管 取 浸 泡液 或液 封 液 1 ml，连续逐日测定， 共 测 定 3 次。记录测定结果。可接受标准： 所 监 测 的 洁 净 区 的 微 生 物 均 在 公 司 环 境质 量 控 制 范 围 内 ，各洁净区符合各自的洁净级别要求。75乙醇溶液消毒后环境监测表面微

35、生物测定结果单位： c fu皿监测区域洁净级别平均菌落数可接受标准是否合格第一次第二次第三次裁剪间10 万级<50CFU/25cm2口是口否包装间口是口否洁具间口是口否无菌检查室万级<25CFU/25cni2口是口否微生物限度室操作台百级<l CFU/25c m2口是口否确认结果评价：操 作 人 ：日 期 ：年月日复 核 人 ：日 期 ：年月日0.2新洁 尔 面 溶 液 消 毒 后 环 境 监 测 表 面微生 物 测 定 结果单 位 ： c fu/ 皿监测区域洁净级别平均菌落数可接受标准是否合格第一次第二次第三次裁剪间10 万级<50CFU/25cm2口是口否包装间口是

36、口否洁具间口是口否无菌检查室万级<25CFU/25cm2口 是 口 否微生物限度室操作台百级<l CFU/25cm2口 是 口 否确 认 结 果 评 价 ：操 作 人 ：日 期 ：年月日复 核 人 ：日 期 ：年月日0.2新洁 尔 灭 溶 液 消 毒 后 微 生 物 监 测 测 定 结 果单 位 ： c fu/ 皿监测区域洁净级别平均菌落数可接受标准是否合格第一次第二次第三次裁剪间地漏lO 万级<50CFU/25cm2口是口否包装间地漏口是口否洁具间水池下水口是口否微生物限度室地漏万级<25CFU/25cm2口是口否微生物限度室水池下水口是口否确认结果评价：操 作 人

37、：日 期 ：年月日复 核 人 ：日 期 ：年月日7 5 溶液 消 毒 后 微 生 物 监 测 测 定 结果单 位 ： c fu 皿监测区域洁净级别平均菌落数可接受标准是否合格第一次第二次第三次裁剪间地漏lO 万级<50CFU/25cm2口是口否包装间地漏口是口否洁具间水池下水口是口否微生物限度室地漏万级<25CFU/25cm2口是口否微生物限度室水池下水口 是 口 否确 认 结果评 价 ：操 作 人 ：日 期 ：年月日复 核人：日 期 ：年月日7 5 乙醇 溶 液 消 毒 后 微 生 物 监 测 测 定 结果单 位 ： cfu皿监测区域洁净级别平均菌落数第一次第二次第三次可接受标准

38、是否合格工作鞋10 万级<50CFU/25cm2口 是 口 否口是口否清洁布拖布口是口否工作鞋万级<25CFU/25cm2口是口否清洁布口 是 口 否拖布口是口否确认结果评价：操 作 人：日 期 ：年月日复核人：日 期 ：年月0.2新洁尔灭溶液消毒后微生物监测测定结果单位： cfu皿监测区域洁净级别平均菌落数第一次第二次第三次可接受标准是否合格工作鞋10 万级<50CFU/25cm2口是口否清洁布口是口否拖布口是口否工作鞋万级<25CFU/25cm2口是口否清洁布口 是 口 否拖布口是口否确认结果评价：操作人：日 期 ：年月日复核人：日 期 ：年月1 0消 毒 剂储存

39、有 效 期 确 认 试 验目 的 ： 通过该试验， 确 定消毒剂在有效期内是稳定的， 并 且消毒效力不会发生变化， 符合要求。程序：（ 1 )在进行消霉剂有效期确认时，每天开启装消毒剂的容器不少千 5 次，其每次开启时间在1 2 分钟， 以模拟实际操作的最差条件。( 2)按照清洁剂、消毒剂管理规程和清洁剂、消毒剂配制使用程序配制 75%乙 醇、0. 2新洁尔灭溶液。( 3)分别在消毒剂储存的第 3 天、第 4 天、第 5 天、第 6 天进行取样做消毒剂消毒效力的确认。分别按照上述 7 或 8 做 0. 2新洁尔灭溶液、75乙 醇溶液消毒效力的确认。( 4 )结果计算： 计算 试 验组和对照组的

40、活菌浓度( CFU/ m ），并换算为对数伯 ( N) , 并按下式计算杀灭对数值： 杀灭对数值 (KL) 对 照组平均活菌浓度的对数值 ( NO) 试 验组活菌浓度对数值 ( NX)可接受标准： 在消毒液有效期末， 杀灭对数值 (KL) 应不低千 3 个对数单位。消毒剂储存有效期确认序I，了方法消毒剂名称工作菌液杀灭对数平均值K（L 天）可接受标准34561定量，仓、浮试验75乙醇金黄色葡萄球菌阴性对照无菌生长； 杀灭对数值(KL ) 应不低千3 个对数单位大肠埃希菌白色念珠菌20.2新洁尔灭浴液金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌3表面试验75乙醇金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌40.2新

41、洁尔灭溶液金黄色葡萄球菌大肠埃希菌白色念珠菌确认结果评价：操作人：日期：年月日 复核人：日期：年月日11 0.2新洁尔灭溶液和75乙醇溶液消毒效力周期的确认11.1 0.2新洁尔灭溶液和75乙醇溶液消毒效力周期的确认 目的： 确认消毒剂在实际应用中， 其消毒效力能够保待的期限。程序：（ l ) 在 万 级 实 验室的墙面和百级级层流下设备表面作为验证对象。实验室墙面编号为 1 号、百级层流下设备表面 2 号， 分 别使用 0.2新洁尔灭溶液、75乙醇溶液进行擦拭消毒 ( l 号为 0.2新洁尔灭溶液消毒剂、2 号为 75乙醇溶液）。( 2 )采用接触碟法在消毒过的实验室墙面和百级层流下设备表面取样。(3 )取样完毕完毕后第24、48、72 小时取样