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文档简介

1、-植物细胞融合技术植物细胞融合技术什么是植物细胞融合技术v植物细胞融合是指用酶脱除细胞壁的方法将不同植物的细胞融合,并培养出了再生植株的生物技术。植物细胞融合技术的理论基础1,细胞全能性 2,细胞膜的流动性 一、仙台病毒法一、仙台病毒法仙台病毒诱导细胞融合经四个阶段:仙台病毒诱导细胞融合经四个阶段:两种细胞在一起培养,加入病毒,在4条件下病毒附着在细胞 膜上。并使两细胞相互凝聚;在37中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需 要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0一8.2;细胞膜连接部穿通,周边连接部修复,此时需Ca2+和ATP;融合成巨大细胞,仍需ATP 。植物原生质体融合技术植物原

2、生质体融合技术病毒促使细胞融合的主要步骤如下:病毒促使细胞融合的主要步骤如下:两个原生质体或细胞在病毒黏结作用下彼此靠近;通过病毒与原生质体或细胞膜的作用使两个细胞膜间互相渗透,胞质互相渗透;两个原生质体的细胞核互相融合,两个细胞融为一体;进入正常的细胞分裂途径,分裂成含有两种染色体的杂种细胞。用灭活的病毒诱导的动物细胞融合过程示意图用灭活的病毒诱导的动物细胞融合过程示意图 vPEG原理v减少细胞间的游离水,促使v细胞靠近并破坏细胞磷脂双分子层,改变膜结构,细胞相互接触并容易结合在一起v电融合原理v高压电导致细胞产生可融合的穿孔二.其实,植物细胞融合采用PEG法和电融合法比较适用聚乙二醇(聚乙二醇(PEG)法细胞融合过程)法细胞融合过程电融合诱导法原理示意图电融合诱导法原理示意图融合的方式v三 植物融合子的鉴定v融合的原生质群体中异核体一般只占0.5%-10%并且随培养时间延长会进一步减少。v最简单的是根基双亲细胞的形态差异识别杂种细胞v比较常用的还有适用某些可见的生化标志,如亲本对外源激素的要求不同v还可以利用营养缺陷型突变细胞系互补进行选择分离杂种原生质体,对融合产物进行鉴别v若融合子不存在可

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