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文档简介

1、分解尿素地细菌地别离与计数课题2 土壤中分解尿素地细菌地别离与计数 一,基础知识1 .尿素是一种重要地氮肥,农作物丕能(能,不能)直接吸收 利用,而是首先通过土壤中地细菌将尿素分解为氨与CO2,这是 因为细菌能合成胭酶。2 .科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为热泉地高温 条件淘汰了绝大多数微生物,这样也适用于实验室中微生物地筛选, 原理是人为提供有利于目地菌株生长地条件(包含营养,温 度,PH 等),同时抑制或阻止其它微生物生长。3 .在统计菌落数目时,常用来统计样品中活菌数目地方法是 稀释涂布平板法。除此之外,显微镜直接计数也是测定微生物数量 地常用方法。4 .采用稀释涂布平板法统计菌

2、落数目时,培养基外表生长地一个菌落,来源于1一个菌落,来源于1个活菌。通过统计菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在过二 300地平板进行计数。5 .统计地菌落数比活菌地实际数目低。这是因为当两个或多个细胞在一起时,平板上观察到地只是二±菌落。因此,统计结果 一般用菌落数来表示。6 .设置对照地主要目地是排除实验组中非测试因素对实验结 果地影响,提高实验结果地可信度。7 .对照实验是指除了被测试条件外,其它条件都相同地实 验。满足该条件地称为对照组,未满足该条件地称为实验组。二,实验设计1 .实验设计地内容包含实验方案,材料用具,实施步骤与时间

3、安排等。2 .根据图示2 7填写以下实验流程:配制土壤溶液>系列稀释一涂布平板与培养一菌落计数. 土壤微生物主要分布在距地表38地近中性地潮湿土壤中,约70%90%为细菌。3 .别离不同地微生物采用不同地稀释度,其原因是丕同微生 物在土壤中含量不同。4 .培养不同微生物往往需求不同培养温度与时间。细菌一般在3037培养12d,放线菌一般在2528培养57d,霉菌一般在2528地温度下培养34d。5 .菌落地特征包含形状,大小,隆起程度,颜色等方面。6 .实验过程1)1)取土样用地小铁铲与盛土样地地信封在使用前都要灭菌。2)应在火焰旁称取土壤10g。将称好地土样倒入盛有90mL无菌水地锥形

4、瓶中,塞好棉塞。3)在稀释土壤溶液地过程中,每一步都要在火焰旁进行。4)实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型,培养时间,稀释度等。5)为了提高效率,在操作时更加有条不紊,应当事先制宜过 划。三,结果分析与评价1 .对别离地菌种作进一步地鉴定,还需求借助生物化学地方 法。2 .在细菌分解尿素地化学反响中,细菌合成地胭酸将尿素分 解成了氨。氨会使培养基地碱性加强,PH升高。因此,我们可以通 过检测培养基pH变化来判断该化学反响是否发生。3 .在以尿素为唯一氮源地培养基中加入酚红指示剂。培养某 种细菌后,如果PH升高,指示剂将变红,说明该细菌可以分解尿 素。加强练习1 .从土壤中别离能分解尿素地

5、细菌,可以利用选择培养基,其 成分中一定有(A)尿素有机氮化合物无机盐有机碳化合物水无机碳化合 物A (1) (3) (4) (5) B (2) (3) (4) (5) C (1)(3) (5) (6) D (2) (3) (5) (6).可用于菌落数目统计地培养基是(A )A固体培养基B液体培养基C半固体培养基 D天然培养基2 .产生标准菌落地细菌地最初数目与培养基分别是(C )A一个细菌液体培养基B许多细菌液体培养基C一个细菌固体培养基D许多细菌固体培养基.要从多种细菌中别离某种细菌,培养基要用(B )A加入青霉素地培养基B固体培养基C液体培养基D加入高浓度食盐地培养基培养基生长状态SS

6、+ V +ZS+U+Y+S+Z+XS+v+Y+S+U+XS+Y+Z+5.右表资料说明在各种培养基中细菌地生长,S为简单培养,UVXYZ代表加入培养基地不同物质,问哪一种物质细菌不能合成 (C)A. UB. VC. YD. Z6培养基中浓度过高抑制微生物生长地原因是(B)A含热量太多 B会使微生物失水C导致微生物休眠D培养基中地碳源与氮源比例失衡7 .不同种类地细菌菌落表现为不同地特征,以下属于菌落特 征地是。菌落大小菌落形状菌落地隆起程度菌落地颜色菌落地 透明度(D )A (1) (2) (3) B (2) (3) (4) C (1) (3)(4) D (1) (2) (3) (4) (5).

7、某同学在1 0 , 100, 1000倍稀释液地平均菌落数为2760,295,46,那么菌落总数为(C )A 27600B 29500C 46000D 37750.以下氮肥能被植物直接吸收地是(1)硝酸盐尿素磷酸二氢氨(4)氨(B )AC (2) (3) (4)(1) (2) (3) (4) B(l) (3) (4)D (1) (3)8 .将某种细菌接种到彻底灭菌地固体培养基上,通过一段时 间后能得到(D)A无一定形态地群体B菌丝C单个细菌11.实验测定链霉素对3种细菌地抗生素效应,用3种细菌在事先准备好地琼脂平板上画3条等长地平行线(3条线均与图中地链霉 素带接触),将平板置于37 条件下恒

8、温培养3天,结果如图所 示。从实验结果分析,以下表达不正确地是(D )A.链霉素能阻止结核菌地生长B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D.链霉素可以用于治疗伤寒病人12 .测定土壤中细菌数量一般选用10, IO,与IO,倍地稀释液 进行平板培养,而测定真菌地数量一般选用10; io?与io,倍稀释, 其原因是(C )A.细菌个体小,真菌个体大B.细菌易稀释,真菌不易稀释C.细菌在土壤中数量比真菌多D.随机地,没有原因13 .用来判断选择培养基是否起到了选择作用需求设置地对 照是(C )A.未接种地选择培养基B.未接种地牛肉膏蛋白陈培养基C.接种了地牛肉膏蛋白月东

9、培养基D.接种了地选择培养基.以下能选择出分解尿素地细菌地培养基是(A )A. KH2P04, Na2HP04, MgS04 - 7H20,葡萄糖,尿素,琼脂,水KH2P04, Na2HP04, MgS04 7H2O,葡萄糖,琼脂,水B. KH2P04, Na2HP04, MgS04 - 7H20,尿素,琼月旨,水KH2Po幻Na2HP04, MgS04 - 7H20,牛肉膏,蛋白胀琼脂,水15 .在涂布平板操作时错误地是(A )A.将涂布器在酒精灯火焰上灼烧,直到烧红B.取少量菌液滴加在培养基外表C.将沾有少量酒精地涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后,冷 却8二s10s再用D.涂布时可转动培养皿,使涂布均匀16 .在寻找目地菌株时,要根据它对生存环境地要求,到相应 地环境中去寻找,以下不属于厌氧细菌生存环境地是(C )A. 土壤深层生C.真空A. 土壤深层生C.真空B.人或动物体内寄D.池塘淤泥17 .以下是关于检测土壤中细菌总数实验操作地表达,其中错 误地是(D )A.用蒸镭水配制牛肉膏蛋白豚培养基,经高温,高压灭菌后倒 平板B.取104, 105, 106倍地土壤稀释液与无菌水各0.1 mL,分别涂 布于各组平板上C.将实验组与对照组平板倒置,37 恒温培养2448小时D.确

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