微生物学实验ppt课件

1、微生物学实验指点教师：袁洪生 李兰芬 臧淑萍实验一实验一 细菌的形状察看细菌的形状察看 目的要求：见实验教程 P.16实验二-1 根本原理：见实验教程P.16 实验二-1 实验内容 1.实验室环境及体表微生物检查(检查手指、头发、钱币等携带微生物的情况4人一个培育皿) 2.记录三种细菌的菌落特征 3.绘制三种细菌个体形状图，并对革蓝氏染色结果小结 4思索题：实验2-(一)、二题 三种细菌的菌落特征 微生物名称 大小 形状 含水程度 颜色 与培养基结合程度 嗅味 枯草芽孢杆菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 绘制三种细菌个体形状图，并对革蓝氏染色结果小结 微生物名称 革蓝氏染色 总结枯草芽孢杆菌 金黄

2、色葡萄球菌 大肠杆菌 实验二实验二 放线菌的形状察看放线菌的形状察看 目的要求：见实验教程P.24 实验二-3 根本原理：见实验教程P.24 实验二-3 实验内容 1.记录三种放线菌的菌落特征 2.记录并绘制三种放线菌的个体形状及生殖方式图 3.思索题：在平板上如何识别细菌和放线菌的菌落？ 三种放线菌的菌落特征 微生物名称 大小 含水程度 菌落颜色 与培养基结合程度 嗅味 灰色链霉菌 正面背面 淡紫灰链霉菌 正面背面地中海诺卡氏菌 正面背面绘制三种放线菌的个体形状及生殖方式图 微生物名称 制片法 生殖方式观察 灰色链霉菌 印片法或直接观察法 示气生菌丝、孢子丝(直)及孢子(球形) 淡紫灰链霉菌

3、 印片法或直接观察法 示气生菌丝、孢子丝(螺旋状)及孢子(椭圆形) 地中海诺卡氏菌 印片法或直接观察法 示菌丝断裂、柱形或球形孢子 实验三实验三 酵母菌形状察看及细胞酵母菌形状察看及细胞计数计数 目的要求： 察看并掌握酵母菌的菌落特征、个体形状及生殖方式。 根本原理： 见实验教程 P.26实验3-1, P.97 实验8-1 实验内容 1.记录两种酵母菌的菌落特征 2.记录并绘制二种酵母菌的个体形状及生殖方式图 3. (1)用血球计数板计算酵母菌悬液的细胞数 (2)用显微镜测微尺丈量酵母菌细胞的大小 4. 思索题：在同一平板上如何识别细菌和酵母菌的菌落？ 两种酵母菌的菌落特征 微生物名称 大小

4、含水程度菌落颜色与培养基结合程度 嗅味酿酒酵母 红酵母 二种酵母菌的个体形状及生殖方式图 微生物名称 制片法 生殖方式观察 酿酒酵母水浸法制片示芽殖热带假丝酵母压片法制片示假菌丝实验四实验四 霉菌的形状察看霉菌的形状察看 目的要求： 1.察看霉菌的菌落特征。 2.掌握霉菌制片方法，察看霉菌个体形 态及各种无性和有性孢子。根本原理：见实验教程P.29, 实验三-2 实验内容 1. 记录三种霉菌的菌落特征 2. 对三种霉菌制片、察看、记录并绘制 三张霉菌个体形状及生殖方式图3.四大类微生物形状特征总结三种霉菌的菌落特征 微生物名称 大小 表面形状 颜色 与培养基结合程度 嗅味 黑根霉(产糖化酶,酿

5、酒) 上部(孢子)下部(菌丝) 产黄青霉(产青霉素) 中心(孢子头) 边缘(菌丝) 黄曲霉(产蛋白酶,制酱油)中心(孢子头) 边缘(菌丝) 三种霉菌个体形状及生殖方式 微生物名称菌丝结构(分化结构) 孢子 黑根霉示无隔菌丝、假根、匍匐枝、孢子囊梗产黄青霉示有隔菌丝、分生孢子梗、小梗黄曲霉示有隔菌丝、足细胞、顶囊、小梗实验调查 (1)如何从菌落特征上识别四类菌? (2)四类菌在制片上有何特点? 实验五实验五 培育基的配制与灭培育基的配制与灭菌菌 目的要求：1. 学习和掌握分别四类菌常用的培育基配制方法。2. 学会四类菌稀释分别和计数时所用物品灭菌前后的预备任务。3. 了解实验室常用的消毒灭菌方法

6、，掌握高压蒸汽灭菌技术。 根本原理：见实验5-1、5-2、5-3、5-5及附录三 实验内容 配制四类菌分别用培育基(留意调pH)、分装。 (按卡片每三人一组配制其中一种培育基，但要求四种都会配) 2. 预备大小枪头、小离心管、玻璃刮刀、无菌水等，培育基的配制量及分装方法见实验台上卡片。3. 高压蒸汽灭菌，灭菌后摆放斜面。 先检查高压锅内水量，封锁高压锅盖时用力要均匀， 放气2-3分钟后封锁放气阀，待压力接近0.1Mpa时调理 成小火并计时,坚持20分钟后关火,自然冷却待压力降为0时翻开放气阀后再翻开高压锅。 4. 实验室常用消毒灭菌方法(示范) 干热灭菌、紫外灭菌、过滤除菌、化学消毒法等。 实

7、验记录 1. 记录他所配的培育基称号、成分、pH及配制分装方法。 2.留意高压蒸汽灭菌操作过程及关键 实验六实验六 土壤中微生物的分别土壤中微生物的分别与培育与培育 目的要求：见P.66实验6-1 根本原理：见P.66实验6-1 实验内容 1.先按卡片配制生理生化、噬菌体效价测定用培育基，灭菌2稀释分别： 3. 划线分别：取10-2菌悬液做划线分别每人做四块平皿: 三种稀释度各一块、划线分别一块4菌落计数：下周做只数可认定的菌落，三人结果取平均。 5. 斜面接种及培育：下周做每人自不同平板上分别各接一支四类菌斜面，培育后检查接种结果。 6. 菌种保藏(示范)：斜面转接法、低温保藏法 、沙土管保

8、藏法、冷冻枯燥保藏法。 稀释分别 分离对象 取样稀释度 分离方法 细菌 1克土10-4 、10-5、 10-6 02ml菌悬液，倾注法分离 放线菌 1克土10-2 、10-3、 10-4 02ml菌悬液，倾注法分离 酵母菌 1克酵母粉 10-5 、10-6、 10-7 0.1ml菌悬液，涂布法分离 霉菌 5克土 10-2、 10-3、 10-4 02ml菌悬液，倾注法分离 本卷须知 分别放线菌在99ml无菌水中加10滴10%苯酚 (抑制细菌生长) 分别霉菌在马丁培育基熔化冷却后参与2ml去氧胆酸钠(2%)和0.4ml链霉素(1万单位/ml) 实验记录 P.73实验6-1表(二)、 (三) 、(

9、五) .思索题： P.74实验6-1二、四、 (五) 实验七几种细菌的生理生化反实验七几种细菌的生理生化反响实验响实验 目的要求：见实验教程 P85 ,P88根本原理：见实验教程 P85 ,P88 实验 实验菌种 实验菌种实验菌种接种方式 分工 淀粉水解 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌 产气杆菌 平板划点 每人一皿接两种菌 油脂水解 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 产气杆菌 平板划线 每人一皿接两种菌 EMB 大肠杆菌 产气杆菌 平板划线 每人一皿接两种菌 葡萄糖发酵 大肠杆菌 产气杆菌 液体一环 两人1组每人1支试管各接一种菌 甘露醇发酵 金黄色葡萄球菌 产气杆菌 半固体穿刺 两人1组每人1支试管各接一种

10、菌 H2S 大肠杆菌 变形杆菌 半固体穿刺 两人1组每人1支试管各接一种菌 柠檬酸盐 大肠杆菌 产气杆菌 斜面划线 两人1组每人1支试管各接一种菌 M.R 大肠杆菌 产气杆菌 液体一环 两人1组每人1支试管各接一种菌 V.P 大肠杆菌 产气杆菌 液体一环 两人1组每人1支试管各接一种菌 吲哚 大肠杆菌 产气杆菌 液体一环 两人1组每人1支试管各接一种菌 生理生化实验结果察看生理生化实验结果察看 实验名称 反应物 代谢产物 枯草金黄大肠产气变形淀粉水解 油脂水解EMB葡萄糖发酵甘露醇发酵H2S柠檬酸盐M.RV.P吲哚 实验八实验八 噬菌体效价测定噬菌体效价测定 目的要求：见实验教程 P36 根本

11、原理：见实验教程 P36 实验内容 培育敏感细菌T6-13至对数生长期 熔化下层培育基每人倒三块平版约 10ml/块 用蛋白胨水稀释噬菌体原液10 6 pfa/ml至 10 710 810-9三个稀释度备用 取0.2ml噬菌体稀释液于小离心管中参与0.2ml T6-13菌悬液混均，室温放置2-3分钟后将混合液加至倒好下层培育基的培育皿中心迅速倒入熔化好已冷却至55的上层培育基，快速混合均匀。待培育基彻底凝固后30倒置培育，16-24小时内察看结果。 实验九实验九 紫外线对淀粉酶产生紫外线对淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌的诱变效应菌枯草芽孢杆菌的诱变效应 目的要求：见p.117 根本原理：见p.118

12、 实验内容 枯草芽孢杆菌BF7658 接种到新颖牛肉膏培育基中活化(37，20hr) 取1ml菌液参与装有玻璃珠的99ml无菌水的锥形瓶中，用手(或摇床)猛烈振荡，打散菌体，制成菌悬液。 取样时一定要摇均匀 翻开红光灯，避光操作 取大约10ml菌悬液至无菌平皿中(内装有磁力搅拌) 紫外线照射处置 功率20w 间隔30cm 0min 1min 2min 3min 稀释度 10-510-610-7 10-410-510-6 10-310-410-5 10-210-310-4 各取0.1ml涂平板，37，培育 48hr 初筛(加碘液，丈量HC值，计算存活率及致死率) 两人做一个照射时间，六人共用对照

13、，平均每人四块平板 Xo#r%v(y0B3E6I9LcOgRjVmYp!t&w)z1C4G7JaMePhSkWnZq$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0C3F6IaLdOgSjVmYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr$u(x+B2E5H9KcNfRiUmXp#s&v)y0C3F7IaLdPgSjVnYq$t*w-A1D4G8JbNeQhTlWoZr%u(x+B2E6H9KcOfRiUmXp!s&v

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