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文档简介

1、第一章1. 微生物:一般是指绝大多数凭肉眼看不见或看不清,必须借助显微镜才能看见或看清,以及少数肉眼能直接看到的单细胞、多细胞和无细胞结构的微小生物的总称。2. 微生物包括:病毒、亚病毒、类病毒、原核微生物、真核微生物等。3. 微生物中能引起人们食物中毒或造成传染病的类群被称为病原微生物。4. 微生物是揭示自然生命过程的最简单研究材料原因是微生物具有生物有机体共同的生化特性。5. 列文虎克:微生物学的先驱者。自造显微镜第一个看到微生物准确形态。巴斯德:微生物学奠基人。巴氏消毒法、首制狂犬疫苗、否定微生物自然发生学说、微生物活动。科赫:细菌学奠基人。纯培养:采用固体平板分离单菌落获得纯种的方法。

2、在固体培养时首先用明胶作凝固剂,设计了用美蓝配合俾斯麦棕二次染色。6. 微生物的共性:1.体积小、比表面积大。2.吸收多、代谢快。3.生长旺盛、繁殖快。4.适应性强、易变异。5.分布广、种类多。第二章7. 细胞五个特征:新陈代谢、复制、分化、收发化学信号、进化。8. 细菌大小可用显微测微尺测量。单位(细菌m,亚细胞结构nm),球菌以直径表示。杆菌用长度和宽度。螺旋菌的长度是以菌体两端点间距离而定、此距离非真正长度。9. 同种细菌的不同生理状态有时大小不同:一般幼龄细菌比成熟或老龄细菌大。10. 细菌细胞的一般结构包括:细胞壁、细胞膜、细胞质和拟核。特殊结构:细菌芽孢、荚膜、鞭毛和菌毛。11.

3、细菌细胞壁特点:多孔;有一定抗原性、致病性、和对噬菌体的敏感性;是许多抗生素作用位点。细胞壁形状及强度取决于肽聚糖。12. 革兰染色过程:先用结晶紫初染再用碘液媒染然后用乙醇或丙酮脱色最后用番红复染。结果(染色):革兰氏阳性呈紫色。革兰氏阴性呈粉色或红色。13. 革兰氏阳性菌细胞壁由均一肽聚糖组成、革兰氏阴性菌由相对的肽聚糖和外膜组成。14. 古细菌细胞壁缺乏肽聚糖。15. 革兰氏阳性菌短肽尾为:L-丙氨酸-D-谷氨酸-L-赖氨酸-D-丙氨酸(L-Ala-D-Glu-L-Lys-D-Ala)革兰氏阴性菌短肽尾为:L-丙氨酸-D-谷氨酸-meso-二氨基二酸-D-丙氨酸(L-Ala-D-Glu-

4、meso-DAP-D-Ala)D型氨基酸和DAP可保护肽聚糖免受肽酶水解。16. 大部分革兰氏阴性菌种肽桥不需短肽而直接通过D-丙氨酸和碱性氨基酸氨基相连而成。17. 革兰氏阴阳不仅肽聚糖厚度不同,交联度也不同,交联度的不同是导致革兰氏阳性菌比阴性菌坚韧的因素之一。肽聚糖交联度阳性菌(G+)75%阴性菌(G-)30%。18. 磷壁酸在革兰氏阴性菌中不存在,是阳性菌特有成份。磷壁酸带有负电荷,加强细胞时二价阳离子吸附,尤其是mg2+,高浓度mg2+对保持膜强度和提高细胞壁合成酶活性非常重要。磷壁酸也可是细胞深层一种抗原物质,也可作为噬菌体吸附位点。19. 革兰氏阴性菌细胞壁比阳性菌复杂、分肽聚糖

5、层和外膜。外膜分三层:内层为脂蛋白。中层是磷脂层。外层是脂多糖。脂多糖是阴性菌细胞外膜主要成份也是阴性菌细胞壁特有成份。脂多糖由类脂A、核心多糖、O-侧链三部分组成。20. LPS(脂多糖)是革兰氏阴性菌内毒素的主要成份,对宿主细胞有毒性。主要毒性成分为类脂A。21. 革兰氏染色原理:革兰氏染色的机理主要是利用两类细菌的细胞壁成分和结构不同。革兰氏阴性菌的细胞壁中含有较多的类脂质,而肽聚糖含量较小。当用乙醇或丙酮酸脱色时,类脂质被溶解,增加了细胞壁的通透性,便初染后的结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果被脱色,经复染后,又染上复染剂的颜色。而革兰氏阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大,类脂质含量少

6、,经乙醇或丙酮洗脱后,肽聚糖孔径变小,通透性降低,用此细胞仍保留初染时的颜色。22. 细胞壁缺陷细菌:细菌用溶菌酶或青霉素的培养基培养时,便细胞壁被水解或不能形成,细菌丧失了细胞壁中的肽聚糖,成为细胞壁缺陷细菌。溶菌(酶)破坏肽聚糖-1,4糖苷键。青霉素抑制肽聚糖短肽形成。23. 原生质体:革兰氏阳性菌经过溶酶菌或青霉素处理后,细胞壁完全缺失后剩下的以细胞膜包裹着的部分称为原生质体。球形体:革兰氏阴性菌在经青霉素处理后依然保存它的外膜。被称为球形体(原生质球)它保留部分细胞壁。L型细菌:细菌在某些环境条件下由于自发突变而形成的细胞壁缺损型称为L型细菌。区别:原生质体和球形体是人工处理得到的。而

7、L型细菌是自发突变得到的。24. 磷脂中的脂肪酸可以是饱和脂肪酸也可以是不饱和脂肪酸。由于不饱和脂肪酸凝固点较低,保持了细胞膜在较低温度流动性。25. 原核生物细胞膜通常与真核生物膜不同,缺少甾醇。支原体例外。支原体细胞无细胞壁,细胞膜中有甾醇,能增加细胞膜的坚韧性。26. 多肽或蛋白质折叠时,需要一种叫分子伴侣的特殊蛋白帮助。27. PHB具有无毒、可塑和易降解的特点。28. 质粒:一般指存在于细菌、真菌等微生物中,独立于染色体外,能进行自我复制的遗传因子。29. 糖被:一些细菌在一定条件下,可向细胞壁表面分泌一层厚度不定的透明胶质状物质,其组成成分一般为多糖,因此被称为糖被。30. S-菌

8、落:具有糖被的细菌形成的菌落往往湿润、光滑即为光滑型菌落。R-菌落:无糖被的细菌形成的菌落干燥、粗糙被称为粗糙型菌落。31. 鞭毛的着生方式:1.一端单毛菌2.两端丛毛菌3侧生鞭毛菌32. 鞭毛的运动机制是通过“栓菌”实验验证的。33. 细菌也可以不通过鞭毛旋转来运动。34. 许多革兰氏阴性菌的体表存在短而细的附属物,比鞭毛短,不参与游动,这种附属物称为菌毛。35. 芽孢:某些细菌在生长发育后期于细胞内形成的圆形、椭圆形或圆柱形的抗逆休眠体,称为芽孢,食品和医疗材料的灭菌、处理温度是以芽孢是否被杀灭为指标。36. 芽孢通过光学和电子显微镜观察到。用结晶紫染色或其他简单染色法染色时,表现为不着色

9、,用特殊的芽孢染色法,芽孢呈绿色。37. 芽孢杆菌属中的某些种如苏云金芽胞杆菌及一些变种,芽孢形成的同时,在细胞内产生一种菱形、方形、或不规则形的碱溶性蛋白质晶体,称为伴孢晶体即-内毒素,一个细菌一般只产生一个伴孢晶体。38. 细菌繁殖的方式包括:裂殖和芽殖。39. 菌落:由单个或少数同种细胞在固体培养基表面或内部繁殖出来的,肉眼可见的子细胞群体称为菌落。40. 放线菌大部分为腐生菌,少数为寄生菌,土壤是放线菌的主要习居场所。41. 放线菌形态特征:无完整细胞核、核膜、核仁。线粒体是革兰氏阳性菌。42. 链霉菌菌体由菌丝、气生菌丝和孢子丝构成。链霉菌是一个非常大的属,这个属均为绝对好氧型。43

10、. 诺卡式菌具有发达的基内菌丝。44. 多数放线菌属的放线菌为致病菌。45. 小单孢菌可消化几丁质和纤维素,并能产庆大霉素、利福霉素等抗生素。46. 弗兰克氏菌能固氮。47. 放线菌的无性孢子有分生孢子和孢囊孢子两种,以分生孢子为主。放线菌的孢子耐干旱但不耐高温。48. 蓝细菌类似革兰氏阴性细菌,大多数蓝细菌中藻蓝素占优势,它和其他色素混合,使细胞呈特殊蓝色故称蓝细菌。49. 蓝细菌的细胞链丝状体中间或末端还存在富含贮藏物的厚壁孢子,颜色较深,具有抵御不良环境的作用,这类孢子称为静息孢子。50. 蓝细菌为光能自养微生物,能进行光合作用和固氮作用。51. 支原体是介于独立营养和细胞内寄生生活之间

11、最小原核生物,属原核生物,革兰氏阴性。52. 立克次氏体是一种专性寄生于真核细胞和革兰氏阴性原核生物。53. 衣原体:是介于立克次氏体与病毒之间,属革兰氏阴性。第三章54. 真菌分类:酵母、霉菌、蕈菌。55. 真核微生物进行繁殖时,其遗传物质必须进行复制并平均分配,以保证每个新细胞都有一套完整的染色体。真核细胞内这一细胞核分裂和染色体分配过程称为有丝分裂。56. 细胞周期是指细胞在生长分裂循环中,由第一次分裂结束至下一次分裂结束期间所经历的过程。细胞周期包括细胞分裂间期和有丝分裂期。G1SG2M。G1期:RNA、核糖体、细胞质组分活跃合成的时期。S期:DNA进行复制并数量加倍。G2期:合成特定

12、蛋白质。M期:有丝分裂期。57. 单倍体:指一个细胞核中同一性状的染色体数目只有一套。二倍体:指一个细胞核中同一性状的染色体数目有两套。58. 真核生物细胞壁主要成分是纤维素。低等真菌以纤维素为主。酵母菌以萄聚糖为主。高等真菌以几丁质为主。真核生物与原核生物的区别:根本区别是原核生物无核膜核仁,真核细胞有核膜核仁。原核细胞一般1-10m,真核细胞直径10-200m。原核细胞没有复杂的细胞器,真核细胞有。原核细胞壁为肽聚糖而真核是纤维素。原核细胞的遗传物质是裸露的DNA环。真核是棒状DNA。原核细胞中转录与翻译同时进行。真核先转录后翻译。59. 酵母菌:一般泛指能发酵糖类以芽殖或裂殖方式进行无性

13、繁殖的单细胞真菌。酵母菌主要分布在含糖质较高的偏酸性环境中。酵母菌是结构最简单的真核细胞。酵母菌一般为无鞭毛不运动的单细胞真菌。酵母菌细胞壁最外层是甘露聚糖,内层为多聚葡萄糖。中间为蛋白质。酵母菌细胞壁可以蜗牛酶水解而成为没有细胞壁的原生质体。60. 酵母菌繁殖方式:1.无性繁殖,包括:芽殖、裂殖、芽裂和产生无性孢子2.有性繁殖(产子囊和囊孢子)酵母菌形成子囊的条件:首先必须是二倍体细胞,其次1.营养充足的强壮幼龄细胞2.适当温度和湿度3.空气要流通4.选择适当的生孢子培养基。61. 酿酒酵母生活史(属于单、双倍体型)1.单倍体营养细胞借芽殖方式进行无性繁殖2.两个单倍体营养细胞接合,质配后发

14、生核配,形成二倍体细胞3.二倍体细胞通过芽殖形成二倍体的营养细胞即二倍体细胞能独立存在4.二倍体细胞在合适的生孢子条件下,经减数分裂产生四个自囊孢子5.单倍体的子囊孢子萌发后形成单倍体营养细胞。又可借芽殖进行无性繁殖。62. 酿酒酵母菌落一般较细菌菌落大而且厚。菌落表面湿润、不透明、黏稠、易被挑起。酿酒酵母菌落颜色多以乳白色或蜡烛色为主,少数呈红色,个别为黑色。细菌菌落形态:一般呈现湿润、光滑、透明、粘稠、易挑取、质地均匀。菌落正反面或边缘与中央部位颜色相等。放线菌菌落形态:菌落干燥、不透明、表面呈有致密的丝绒状、难以挑取、菌落正反颜色不一致。霉菌:菌落形态较大、质地疏松、外观干燥、不透明、呈

15、现绒毛状、不易挑取(连接紧密)、菌落正反面边缘与中央部位颜色不同。酵母菌线粒体丢失或功能丧失,在固体培养基上由于能量代谢受阻而生长缓慢、形成菌落较小,这种呼吸缺陷型菌株形成的菌落称为小菌落。(这种菌株只能通过发酵过程获得少量能量)。63. 菌丝:霉菌的营养体由单个丝状体构成,单个丝状体称为菌丝。菌丝按有无隔膜分为无隔菌丝和有隔菌丝。无隔菌丝:毛霉、根霉、犁头霉。有隔菌丝:曲霉、青霉、木霉。64. 厚垣孢子:一些霉菌在不良环境条件下,菌丝中经常出现不规则的肥大菌丝细胞。菌丝中的原生质收缩、变圆、外面形成一层厚垣以抵抗不良环境。表面一般具有刺或瘤状突起。这种结构称为厚垣孢子。(厚垣孢子经常在老化菌

16、丝中产生)芽孢是细菌产生、是原核细胞,而厚垣孢子是霉菌产生属真核。两者功能相同,都能抵抗不良环境。65. 霉菌细胞壁主要成分:几丁质。酵母菌:萄聚糖。细菌:肽聚糖。霉菌繁殖方式:无性孢子和有性孢子。发酵工业中常利用无性孢子进行接种和扩大培养。66. 常见霉菌及作用:根霉:用途很广,淀粉活力很强,多用来酿酒。毛霉:我国多用来做豆腐乳、豆豉。犁头霉:常做酒曲。青霉属:产青霉素。木霉菌:纤维素酶生产菌。第四章67. 病毒的分类:真病毒和亚病毒。病毒通常以感染态和非感染态两种形式存在。具有活细胞内专性寄生的特点。68. 裂解性生活周期:DNA噬菌体在宿主细胞内复制后,宿主细胞裂解并释放新噬菌体。这种以

17、宿主细胞裂解和释放新病毒为终点的生活周期称为裂解性生活周期。69. 一步生长曲线:以感染时间为横坐标,病毒滴度为纵坐标,绘制定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线称为一步生长曲线。病毒的滴度(又称效价):每毫升样品中含有的侵染性病毒粒子的数量。通常采用双层平板法测定病毒的滴度。70. 获得病毒繁殖的两个重要参数:裂解量和潜伏期。裂解量:是每个受侵染的细胞所产生的子代噬菌体的数目。潜伏期:是从噬菌体吸附于宿主细胞表面到子代噬菌体释放所需的最短时间。71. 溶源性:噬菌体吸附和侵入宿主后,并不接管和杀死宿主,存在宿主细胞内,整合于宿主核基因组,同宿主基因组一起复制,产生一群携带噬菌体基因的细胞,宿主

18、细胞依然正常,可长期生长和繁殖。这些细胞会在适宜环境条件下产生并释放噬菌体。这种噬菌体与宿主细胞的关系称为溶源性。72. 前噬菌体通常以整合态存在。73. 无论生活周期是否完成,温和噬菌体侵染宿主细胞后都将导致宿主表型的变化,这些变化称为溶源转变。溶源转变包括细菌表面特征和病原性。第五章74. 微生物营养要素:1.水2.碳源3.氮源4.无机盐5.生长因子。75. 无机盐的功能:1.构成细胞的组成成分2.作为酶的活性中心3.维持酶的活性4.调节细胞渗透压、氢离子和氧化还原电位5.作为某些自养菌的能源。76. 微生物分析法:当微生物丧失合成某种生长因子的能力时,必须从培养基中获取该生长因子才能生长

19、,利用微生物的这种特性可以用于分析食物、药品等物质中的维生素、氨基酸及其他生长因子的含量。这种方法称为微生物分析法。77. 营养类型。光能自养型碳源:二氧化碳或可溶性碳酸盐 能源:光能 氢供体:无机物 化能自养型碳源:二氧化碳或可溶性碳酸盐 能源:无机物的氧化 氢供体:无机物 光能异养型碳源:小分子有机物能源:光能 氢供体:小分子有机物 化能异养型碳源:有机物能源:有机物的氧化降解 氢供体:有机物78. 通过细胞膜方式:单纯扩散:无需载体无需能量 促进扩散:需载体无需能量 主动运输:需载体需能量79. 培养基:人工配制的供于微生物生长繁殖和积累代谢产物的营养基质。常用凝固剂:琼脂明胶 培养基分

20、类:按材料来源分1.天然培养基2.合成培养基3.半合成培养基 按物理状态分1.固体培养基2.半固体培养基3.液体培养基 按功能分1.鉴别培养基2.选择培养基80. 鉴别培养基:一类含有某种代谢产物指示剂的培养基,微生物在其上生长后,分泌的代谢产物能与指示剂起反应产生某种明显的特征性变化,根据这些变化将该种微生物与其它区别开。81. 鉴别培养基通常用来鉴别肠道微生物 EMB染色原理:肠道微生物中大肠杆菌能强烈分解乳糖而产生大量混合酸,使菌体表面带有H+,染上酸性染料伊红,伊红与美蓝结合,使菌落被染上深色。反射光下呈绿色金属光泽。82. 选择培养基:根据某些微生物的特殊营养要求或对某些物理化学因子

21、的抗性而设立的培养基。83. 投其所好指的是在普通培养基中加入某些特殊的营养物质,使某些微生物快速生长而不适宜其它微生物生长从而达到从混杂的微生物群体中分离某些微生物的菌株。84. 取其所抗是指根据被分离微生物对某些药物具有抗性,而在培养基中加入药物而达到抑制其它敏感型微生物的目的。85. C/N比指的是培养基中元素C和N的物质的量之比。N源过多 微生物生长旺盛。N源不足 菌体生长缓慢。C源不足 引起菌体衰老和自溶。第六章86. 葡萄糖是细胞最常用的碳源和能量来源。葡萄糖分解的四种主要途径:EMP途径、ED途径、TCA循环、HMP途径。EMP途径又叫糖酵解,葡萄糖经该途径分解为丙酮酸。ED途径

22、在细菌中广泛存在,是少数缺乏完整EMP途径微生物的一种替代途径。细菌酒精发酵是通过ED途径实现的。HMP途径(磷酸戊糖途径)通过HMP途径葡萄糖可以不经EMP和TCA得到彻底氧化,并能产生大量NADPH和H+。87. 根据递氢特别是受氢过程中氢受体性质的不同,可以把生物氧化分为有氧呼吸、无氧呼吸、发酵三种类型。88. 有氧呼吸是指底物分解产生的氢经完整呼吸链传递最终由氧接受并产生水和释放能量的过程。89. 无氧呼吸:是一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物的生物氧化底物按常规途径脱氢后,经部分呼吸链递氢,最终由氧化态的无机物或有机物受氢,并完成氧化磷酸化产能反应的过程称为无氧呼吸。90. 硝酸

23、盐呼吸是指微生物利用硝酸盐作为氮源或呼吸链最终氢受体,在硝酸盐还原酶的作用下还原为亚硝酸的无氧呼吸过程。硝酸盐呼吸两种功能:1.在有氧或无氧条件下微生物利用硝酸盐作为氮源营养物,称为同化性硝酸盐作用。2.在无氧条件下,微生物利用硝酸盐作为呼吸链最终受体这是异化性硝酸盐作用。能进行硝酸盐呼吸的都是兼性厌氧微生物即反硝化细菌,而专性厌氧微生物无法进行硝酸盐呼吸。91. 酶调节 粗调:调节酶分子的合成或降解以改变酶分子的含量。细调:激活或抑制以改变细胞内已有酶分子的催化活性。92. 代谢控制发酵:利用微生物代谢调控能力的自然缺损或通过人为方法获得突破代谢调控的变异菌株,从而使有用目的产物大量生成,积

24、累的发酵称为代谢控制发酵。93. 反馈抑制机理。同工酶:是指催化相同的生化反应,但酶分子结构不同的一类酶。94. 反馈阻遏:由代谢终产物抑制酶合成的负反馈作用称为反馈阻遏。95. 操纵子:指的是一组功能上彼此有关的基因,由启动子、操纵基因和结构基因三部分组成。操纵子分为诱导型操纵子和阻遏型操纵子。96. 效应物:是一类低分子量的信号物质。97. 酶诱导合成分为两种,一是同时诱导,二是顺序诱导。 阻遏类型主要有末端代谢产物阻遏和分解代谢产物阻遏。 末端产物阻遏:指由某代谢途径末端产物的过量累积而引起的阻遏。 分解代谢物阻遏:指细胞内同时有两种同类分解底物存在时,利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的

25、底物的有关酶的合成的现象。 葡萄糖效应指优先利用葡萄糖。98. 代谢控制发酵的基本思想:打破微生物原有的代谢平痕,通过对细胞的代谢途径进行修饰,使微生物大量积累某种代谢产物。 代谢控制具体措施:1.选育代谢拮抗物抗性突变株2.选育营养缺陷型突变株3.选育营养缺陷型回复突变株4.选育渗漏缺陷型突变株99. 如何进行代谢控制发酵选育营养型缺陷型突变株:赖氨酸代谢过程中,一方面由于赖氨酸与苏氨酸共同对天冬氨酸激酶有反馈抑制作用,另一方面天冬氨酸除用于合成赖氨酸外,还要作为合成甲硫氨酸和苏氨酸的原料因此正常细胞内难以积累高浓度的赖氨酸。因此工业上选育了谷氨酸棒杆菌的高丝氨酸缺陷型菌株作为赖氨酸的发酵菌

26、种,这个菌种不能合成高丝氨酸脱氢酶(HBDH)而不能合成高丝氨酸,也不能产生苏氨酸和甲硫氨酸,在补给亚适当高丝氨酸的条件下,提供较高糖分的铵盐能产生大量赖氨酸。第七章100. 典型生长曲线:将少量纯种非丝状单细胞微生物接种到恒容积的新鲜液体培养基中,在适宜的温度通气等条件下培养,定时取样测定单位体积里的细胞数,以单位体积里细胞数的对数作纵坐标,以培养基时间为横坐标,画出的曲线即非丝状的单细胞微生物的典型生长曲线。典型生长曲线四个时期:延迟期、指数期、稳定期和衰亡期。 延迟期出现原因:接种到新鲜培养液中的种子细胞内,一时还缺乏分解和催化有关底物的酶或辅酶或是缺乏充足的中间代谢物,需要有一段用于调

27、整适应的时间,以产生诱导酶合成有关中间代谢物。 延迟期缩短措施:1.用遗传学方法改变菌种遗传特性使延迟期缩短 2.利用处于对数生长期的细胞作为接种的种子 3.使发酵培养基的成分与种子培养基的成分尽量接近且应适当营养丰富些 4.适当扩大接种量,通常采用的接种量是种子与发酵培养基的体积比为1:10 处于延迟期的细胞也是在生长的 指数期特点:1.生长速率常数R最大且为常数,细胞每分裂一次所需时间(称为代时)最短且稳定 2.细胞进行平衡生长,菌体各部分的成分十分均匀 3.酶系活跃,代谢旺盛 若t1时菌数为x1,经n此裂殖后到t2时菌数为x2 代时(G) G=(t2-t1)/n=(t2-t1)/3.32

28、2(lgx2-lgx1)生长速率常数(R) R=1/G=3.322(lgx2-lgx1)/(t2-t1)101. 处于指数期微生物,其个体形态、化学组成和生理特性等均较一致,细胞各成分平衡增长,代谢旺盛,代时稳定,生长速率恒定,因此是用作代谢、生理等研究的良好材料,是增殖噬菌体的最适宿主,也是发酵工业中作种子的最佳材料。102. 稳定期的细胞生长速率常数降低直至0,开始积累代谢产物。稳定期表现方面:1.稳定期的长短与菌种和培养条件有关,生产上如果及时采取措施,补充营养物质取走代谢产物或改善培养条件可以获得更多的菌体物质或代谢产物 2.对以生产菌体或与菌体生长相平行的代谢产物为目的发酵生产来说,

29、稳定期是最佳收获期 3.通过稳定期到来原因的研究,促使了连续培养原理的提出和相关工艺创建。103. 衰亡期:细胞死亡速率超过新生速率,整个群体呈现负生长状态。104. 同步生长:通过同步培养方法的处理,非同步群体细胞处于同一生长阶段,并能同时进行分裂的生长状态称为同步生长。 获得微生物同步生长的方法:1.机械筛选法 2.环境条件控制法105. 连续培养:是指采用有效的措施让微生物在某特定环境中保持旺盛生长状态的培养方法。连续培养类型:1.恒浊连续培养 2.恒化连续培养 恒浊培养:一种根据培养室内微生物的生长密度,并借光电控制系统来控制培养基的流速,以取得菌体密度高、生长速率恒定的微生物细胞的连

30、续培养方法。 恒化培养:一种控制恒定流速,使由于微生物生长而耗去的营养物质及时得到补充,培养室中营养物浓度基本恒定,从而保持微生物恒定生长速率的连续培养方法。106. 直接计数法:利用特殊的细菌计数板或血细胞计数板,在光学显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量,测量的是样品中的总菌数。 间接计数法:又称活菌计数法,记录的是活菌数量。107. 影响微生物生长的环境因素:温度、PH、渗透压、氧、表面张力、辐射、液体静压力、声能等108. 最适生长温度:某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度。 最适温度不等于生长速率最高时的培养温度,也不等于发酵速率或累积代谢产物最高时的培养温度。109. 调

31、整PH采用两种措施:治标和治本。 “治标”是根据表面现象而进行直接、快速但不能持久的调节,当过酸时加NaOH、Na2CO3等中和,过碱时加HCl、H2SO4等中和。 “治本”是根据机制采取间接、缓效但能持久发挥作用的调节,过酸时可采取加适当尿素、NaNO3、NH3H2O或蛋白质等氮源及提高通气量等措施,过碱时加糖、乳糖、醋酸、柠檬酸等碳源及降低通气量。110. 保存食品、衣物防止其腐败霉烂的原理:利用干燥的环境。111. 在低渗溶液中,细胞膨胀、甚至破裂,在高渗溶液中,细胞会质壁分离甚至死亡,这是用糖溃、盐腌保存食品的依据。112. 好氧菌的分类:1.专性好氧菌:有起氧化物歧化酶(SOD和过氧

32、化氢酶),绝大多数真菌和多数细菌、放线菌都是专性好氧菌。 2.兼性好氧菌:包括大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形杆菌(也有SOD和过氧化氢酶)。 3.微好氧菌:只能在较低氧分下生长。 4.耐氧性厌氧菌:有SOD和过氧化物酶但无过氧化氢酶主要是乳酸。 5.专性厌氧菌:缺乏SOD和细胞色素氧化酶,大多缺乏过氧化氢酶。 专性好氧菌:必须在较高浓度分子氧的条件下才能生长,有完整呼吸链,以分子氧作为最终受体。 兼性好氧菌:以有氧条件下生长为主但在无氧条件下也可生长。 耐氧性厌氧菌:可在氧存在下进行厌氧生活的微生物 专性厌氧菌:只能在无氧处或低氧化还原电势环境下才能生长。113. 表面活性剂分为阴离子型、阳离

33、子型和非离子型三类。阴离子型对革兰氏阳性菌有抑制作用。114. 核酸(DNA和RNA)对紫外线的吸收高峰在265266nm之间。115. 微生物生长的控制几个相关术语 1.防腐:在某些理化因素作用下抑制霉腐微生物的生长繁殖,以防止食品和其他物品等发生霉腐的措施。 2.消毒:利用某些理化方法杀死物体表面或内部所有对人体或动物有害的病原菌,而对被消毒对象基本无害措施。 3.灭菌:采用强烈理化因素,使物体内外包括芽孢在内的所有微生物永远丧失生长繁殖能力的措施。 4.化疗:利用具有高度选择毒力的化学物质,抑制或杀死宿主体内病原微生物,对宿主本身没有或基本没有毒害作用的一种治疗措施。116. 1.十倍致

34、死时间(D):利用一定温度进行加热,活菌数减少一个对数周期时所需的时间。 2.Z值:以某种微生物不同温度下D值的对数,对加热温度作图,可得到一条直线,在该直线中,D值降低一个对数周期所需要升高的温度。 3.热致死时间:在一定温度下杀死所有某一浓度微生物所需要的时间。117. 干热灭菌常用灭菌温度140160灭菌13h。 湿热灭菌:多数细菌和真菌在60处理510min,酵母细胞和真菌孢子需要80以上温度,细菌芽孢在120处理15min。 湿热灭菌 高压灭菌需在121(0.1mPa)下灭菌1520min。 巴氏消毒法:用较低温度处理牛乳、啤酒等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料,以杀死其中的无芽

35、孢病原菌又不影响原有风味的消毒方法一般采用在63保持30min或在72下保持15min,此法基于结核杆菌的致死条件为62 15min而定,称为巴氏消毒法。118. 最低抑制浓度(MIC):指在一定条件下,某化学药剂能抑制特定微生物的最低浓度。119. 碳酸系数:将某一消毒剂作不同的稀释,在一定条件,一定时间致死全部供试微生物的最高稀释度与达到同样效果的酚的最高稀释度的比值即为碳酸系数。 碳酸系数越高表明其杀菌作用越强。120. 抗代谢药物:是指一类在化学结构上与微生物细胞所必需的代谢物很相似,可干扰微生物正常代谢活动的化学物质,最早发现的化学治疗剂是磺胺类药物,能抑制大多数革兰氏阳性菌。121

36、. 抗生素是一类由微生物或其他生物生命活动过程中合成的次级代谢产物或其人工衍生物,它们在很低浓度时就能抑制或干扰其它种生物的生命活动因此可作为优良化学治疗剂。 抗生素主要四种作用方式:1.抑制细菌细胞壁的合成或引起细胞壁的降解 2.破坏细胞膜 3.抑制蛋白质合成 4.抑制DNA的复制和转录122. 干扰素:是高等动物细胞在病毒或dsRNA等诱生剂的刺激下,所产生的一种具有高活性、广谱抗病毒等功能的特异性糖蛋白。 干扰素三种类型:1,.白细胞产生的TFN- 2.成纤维细胞产生的IFN- 3.免疫淋巴细胞产生的IFN-123. 肺炎双球菌转化实验 肺炎双球菌转化实验证明遗传的物质基础是DNA。12

37、4. 烟草花叶病毒重建实验 噬菌体感染实验 以上三个实验证明了遗传物质基础是核酸而不是蛋白质125. 质粒:一般是指存在于细菌、真菌等微生物细胞中,独立于染色体外,能进行自我复制的遗传因子。126. F质粒:是大肠杆菌等细菌决定性别并有转移能力的质粒。F质粒整分到宿主细胞染色体上的菌株称为高频重组菌株。127. 抗性质粒指使宿主对药物或重金属离子呈现抗性。128. 突变:是指细胞内遗传物质的分子结构或数量发生可遗传的变化。 基因突变:是指一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变,涉及一对或少数几对碱基的置换,缺失或插入,因其发生的范围很小,所以又称点突变。 基因突变(点突变)包括:碱基置换,

38、移码突变。 碱基置换又分为转换和颠换。 基因突变规律:1.自发性 2.不对应性 3.稀有性 4.独立性 5.可诱变性 6.稳定性 7.可逆性129. 基因突变自发性和不对应性实验证明:1.变量实验 2.涂布实验 3.影印培养试验130. 突变类型:条件致死突变型、营养缺陷型、抗性突变型、形态突变型、抗原突变型和产量突变型131. 营养缺陷型:某一野生型菌株因发生突变而丧失合成一种或几种生长因子的能力因而无法再在基本培养基上正常繁殖的变异类型称为营养缺陷型。 hisC组氨酸营养缺陷型 trp色氨酸营养缺陷型 C和A表示同一表型中不同基因的突变,相应的表现型用HIsC和TrpA表示,用hisC-和

39、hisC+、trpA-和trpA+表示缺陷型和野生型基因。132. 利用细菌营养缺陷型的回复突变来检测环境或食品中是否存在化学致癌物质的简便有效方法称为艾姆斯试验。 艾姆斯试验原理:鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型菌株在基本培养基-的平板上不能生长,如发生回复突变变成原养型后测能生长。133. DNA修复:1.先复活作用2.切除修复3.重组修复4.SOS修复134. 工业微生物育种三个阶段:1.改变菌种基因型 2.筛选菌种,确认并分离出具有目的基因型或表型的变异株3.产量评估,全面考察此变异株在工业化生产上的可接受性。135. 诱变育种原则:1.选择简便有效的诱变剂2.挑选优良的出发菌株3.处理

40、单细胞或单孢子悬液4.选用最适的诱变剂量5.充分利用复合处理的协同效应6.利用和创造形态、生理、产量间的相关指标 7.设计高效筛选方案136. 突变株筛选方法:1.抗终代谢物结构类似物突变株筛选2.营养缺陷型突变株的筛选方法137. 转化:是指同源或异源的游离DNA分子被自然或人工感受态细胞摄取,并能够表达的水平方向的基因转移过程,通过转化方式而形成的杂种后代称转化子。138. 感受态:是指受体细胞最易接受外源DNA片段并能实现转化的一种生理状态。139. 转导:是利用完全或部分缺陷噬菌体作为媒介,把供体细胞的小片段DNA携带到受体细胞中,通过交换与整合,使后者获得前者部分遗传性状的现象。 普

41、遍性转导:通过极少数完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上任何小片段DNA进行误包,而将遗传性状传递给受体菌的现象。 接合:是指供体菌通过性菌毛与受体菌直接接触,把F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者,使后者获得若干遗传性状的现象。140. F质粒:当Hfv菌株细胞内的F质粒因不正常切离而脱离核染色体组时,可形成携带整合位点邻近一小段核染色体基因的特殊F质粒称为F质粒。141. 原生质体融合:将两个性状不同的原生质体混合在一高渗溶液中,通过物理或化学等因素的刺激,促进两原生质体细胞膜融合,导致染色体之间发生基因重组而形成新的遗传性状的过程。 原生质体融合步骤:1.亲株原生质体的制备2.融合3.细胞壁再生4.性能检测142. 准性生殖:指不同菌株的体细胞间发生融合,不经过减数分裂而导致低频率基因重组的生殖过程。143. 菌体衰退的原因:是自发突变的结果,是一个由量变到质变的过程,最后以负突变占绝对优势而告终。 菌体衰退防止:一.防止基因自发突变1.提供合适培养条件2.筛选多重突变株 二.防止退化细胞在群体中占优势1.少传代2.加压培养144. 菌体保藏 原理:根据微生物的生理、生化特点,人工创造条件,使微生物的代谢处于不活跃,生长繁殖受抑制的休眠状态,人工造成环境主要是低温、干燥、缺氧、缺乏营养条件。 方法:

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