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文档简介
1、 根据目的菌株及其产物特点分 选择性分别方法 随机分别方法 (定向挑选选择压力) (用挑选方案- 检测系统进展间接分别 富集液体培育 固体培育基条件培育 (初筛) 菌种纯化 复筛 菌种纯化 初步工艺条件探求 再复筛 消费性能测试 较优菌株1-3株保藏及进一步做消费实验 某些必要实验和 或作为育种的出发菌株 毒性实验等 n菌种的纯种分别菌种的纯种分别n1划线法:简单、快捷。划线法:简单、快捷。 n2稀释法:菌落单一均匀。稀释法:菌落单一均匀。消费性能的测定消费性能的测定n普通采用两步法:普通采用两步法:n 初筛:以量为主初筛:以量为主n 复筛:以质为主复筛:以质为主诱变剂物理:紫外线,快中子化学
2、:氮芥,亚硝基胍原生质体交融原生质体交融n 1.标志菌株的挑选n 2.原生质体的制备n 3.原生质体的交融与再生n 聚乙二醇PEG脱水剂n 助融剂n Ca2+提高交融频率n 4.交融子的选择DNA重组技术重组技术n1. 目的目的DNA片段的获得片段的获得n2. 与载体与载体DNA分子的衔接分子的衔接n3. 重组重组DNA分子引入宿主细胞分子引入宿主细胞n4. 从中选出所需重组从中选出所需重组DNA分子的宿主细分子的宿主细胞胞n菌种的衰退菌种的衰退n 衰退的缘由:衰退的缘由:n1. 菌种保藏不当菌种保藏不当n2. 菌种生长条件没有得到满足菌种生长条件没有得到满足n3. 菌种天生具有的变异性菌种天生具有的变异性n菌种的复壮:菌种的复壮:n 1. 纯种分别纯种分别n 2. 经过寄主体进展复壮经过寄主体进展复壮n 3. 淘汰已衰退的个体淘汰已衰退的个体n菌种保藏菌种保藏n 1.原理原理 n 保证微生物的存活,生理活性降至最低。保证微生物的存活,生理活性降至最低。低温、枯燥、缺氧、缺营养物质低温、枯燥、缺氧、缺营养物质n 2. 方法方法n 1斜面保藏法斜面保藏法n 2沙土管保藏法沙土管保藏法n 3菌丝速冻保藏法菌丝速冻保藏法n 4石
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