液质联用实用学习教案

1、会计学1液质联用实用液质联用实用(shyng)第一页，共76页。第1页/共76页第二页，共76页。自动进样器 色谱(s p)柱 PDA（阵列(zhn li)二极管检测器） 离子化室 质量(zhling)分析器检测器液相色谱 质谱计算机第2页/共76页第三页，共76页。质谱质谱离子化室离子化室第3页/共76页第四页，共76页。四元四元(s yun)泵泵(包括包括真空脱气机真空脱气机)柱温箱柱温箱PDA检测器检测器溶剂溶剂(rngj)瓶箱瓶箱自动自动进样器进样器第4页/共76页第五页，共76页。液相色谱流程图液相色谱流程图PUMPDetectorWData station (Recorder) o

2、r Collection第5页/共76页第六页，共76页。第6页/共76页第七页，共76页。第7页/共76页第八页，共76页。第8页/共76页第九页，共76页。第9页/共76页第十页，共76页。第10页/共76页第十一页，共76页。混合器混合器B泵泵A泵泵梯度梯度(t d)程序控制程序控制第11页/共76页第十二页，共76页。混合器混合器高压高压(goy)输液输液四通四通(s tn)第12页/共76页第十三页，共76页。第13页/共76页第十四页，共76页。第14页/共76页第十五页，共76页。第15页/共76页第十六页，共76页。第16页/共76页第十七页，共76页。第17页/共76页第十八

3、页，共76页。第18页/共76页第十九页，共76页。第19页/共76页第二十页，共76页。在强电场下溶液带电在强电场下溶液带电 形成带电液滴形成带电液滴带电液滴体积不断缩小带电液滴体积不断缩小（溶剂蒸发，不断发生库仑爆炸）（溶剂蒸发，不断发生库仑爆炸） 离子逸出表面，蒸发进入离子逸出表面，蒸发进入(jnr)(jnr)空间空间电喷雾电离的实质：电荷电喷雾电离的实质：电荷(dinh)(dinh)浓缩效应浓缩效应电喷雾电离的实质电喷雾电离的实质(shzh)(shzh)：电荷：电荷浓缩效应浓缩效应第20页/共76页第二十一页，共76页。+_+_+蒸发蒸发(zhngf)(zhngf) 带电带电(di (

4、di din)din)液液滴滴小液滴小液滴 ESIESI离子蒸发机理离子蒸发机理第21页/共76页第二十二页，共76页。第22页/共76页第二十三页，共76页。第23页/共76页第二十四页，共76页。第24页/共76页第二十五页，共76页。第25页/共76页第二十六页，共76页。分子。分子。第26页/共76页第二十七页，共76页。第27页/共76页第二十八页，共76页。第28页/共76页第二十九页，共76页。M+Na+M+K+M+H+MW=582第29页/共76页第三十页，共76页。第30页/共76页第三十一页，共76页。第31页/共76页第三十二页，共76页。QOOQOQ1Hyperquad

5、Q3HyperquadQ2Collision CellDetectionSystemIon SourceInterfaceHeatedCapillaryMass Analyzer第32页/共76页第三十三页，共76页。Q1Q3Q2Q0DynodeTurbo第33页/共76页第三十四页，共76页。第34页/共76页第三十五页，共76页。 为了(wi le)区分这四个离子，测量的质量的准确度需达到130 ppm。即小数点后第四位是准确的。 元素组成信息随着质量的增加而呈指数地上升，对质谱质量的测定准确度要求更高。 12C = 12.00000000 ， 1H = 1.007782506， 14N

6、= 14.00307407， 16O = 15.99491475 m=43.0184Da的离子的离子必定是必定是C2H3O+，不可能是不可能是C3H7+(m=43.0058)或或 C2H5N+(m=42.9984)，或或CH3N2+(m=43.0296)。第35页/共76页第三十六页，共76页。第36页/共76页第三十七页，共76页。第37页/共76页第三十八页，共76页。第38页/共76页第三十九页，共76页。第39页/共76页第四十页，共76页。Flow Rate Column I.D.1.0 mL/min 4.6 mm 0.5 mL/min 3.0 mm 0.2 mL/min 2.1 m

7、m 50 mL/min 1.0 mm 10 mL/min CapillaryLC流速一般根据流速一般根据(gnj)色谱柱规格色谱柱规格和电离方式来确定和电离方式来确定APCI 0.2-2 ml/minESI 5-300 l/min routinely (1 ml/min possible)第40页/共76页第四十一页，共76页。第41页/共76页第四十二页，共76页。第42页/共76页第四十三页，共76页。第43页/共76页第四十四页，共76页。Full-Scan Mass SpectrometrylAdvantagelProvides MW InformationlDisadvantagel

8、Low duty cycleScanningPass AllPass All第44页/共76页第四十五页，共76页。Full-Scan MS of BuspironeBuspirone(丁螺环酮丁螺环酮 )C21H31N5O2MW = 385150200250300350400450500m/z255075100Relative Abundance386408(M+H)+(M+Na)+第45页/共76页第四十六页，共76页。Single Ion Monitoring (SIM)lAdvantageslTargeted Analyte MonitoringlHigh Duty CyclelSim

9、plelDisadvantageslCan suffer from interferenceslNot as sensitive or selective as SRM (see below)Fixed m/zPass AllPass All第46页/共76页第四十七页，共76页。Selected Reaction Monitoring(SRM)lAdvantageslTargeted Analyte MonitoringlHigh Duty Cyclel“Simultaneous” Monitoring of Multiple TransitionslDisadvantagelNo “adv

10、anced” structural informationFixed m/zPass AllFixed m/zQ1Q2Q3第47页/共76页第四十八页，共76页。清洗仪器(yq)及管路配样 （稀释(xsh)）质谱条件(tiojin)优化（保存方法）液质联用方法设置平衡色谱柱分析结果进样品结果无效第48页/共76页第四十九页，共76页。第49页/共76页第五十页，共76页。离子源主要有：离子源主要有：ESIESI，APCIAPCI等等液质联用与气质液质联用与气质(qzh)联用的区别联用的区别第50页/共76页第五十一页，共76页。第51页/共76页第五十二页，共76页。第52页/共76页第五十三

11、页，共76页。第53页/共76页第五十四页，共76页。准分子离子总离子流图液相色谱(s p)图全扫描(somio)单波长(bchng)扫描一级质谱图第54页/共76页第五十五页，共76页。总离子(lz)强度质量范围母离子(lz)质量检测(jin c)离子模式碰撞能量母离子碎片离子二级质谱第55页/共76页第五十六页，共76页。第56页/共76页第五十七页，共76页。第57页/共76页第五十八页，共76页。010203040020406080100Relative abundancem/z2022第58页/共76页第五十九页，共76页。元素AA+1A+2元素类型质量% 质量%质量%H110020

12、.015AC12100131.1A+1N14100150.37AO16100170.04180.20A+2F19100ASi28100295.10303.40A+1,A+2P31100AS32100330.80344.40A+2Cl351003732.5A+2Br791008198.0A+2I127100A第59页/共76页第六十页，共76页。32! 3)2)(1(! 2) 1(1)1 (bnnnbnnnbbnb: A+1或A+2同位素的天然丰度n: 质谱峰中A+1或A+2元素的个数A+1A+1元素峰位置元素峰位置M MM+1M+1M+2M+2M+3M+3A+2A+2元素峰位置元素峰位置M M

13、M+2M+2M+4M+4M+6M+6质谱峰强度质谱峰强度1 1nbnbn n( (n-n-1)1)b b2 2/2!/2!n n( (n n-1)(-1)(n n- -2)2)b b3 3/3!/3!第60页/共76页第六十一页，共76页。第61页/共76页第六十二页，共76页。例：例：35Cl 100%, 37Cl 32.5% M M+2 M+4 M+6 Cl, n=1: 1 0.325 Cl2, n=2: 1 0.650 0.106 Cl3, n=3: 1 0.975 0.317 0.034 第62页/共76页第六十三页，共76页。第63页/共76页第六十四页，共76页。090905-ta

14、oyang-3 #39RT: 0.55AV: 1NL: 1.44E7T: + c Q1MS 400.00-1500.004005006007008009001000110012001300m/z05101520253035404550556065707580859095100Relative Abundance605.08583.09606.08621.07662.26563.19663.26503.10767.281081.65855.001187.72896.701326.69966.00M+Na+M+K+M+H+MW=582第64页/共76页第六十五页，共76页。M+H+NNHNHNH3

15、CCH3CH3H3CCOOCH3COOCH3ClM=572第65页/共76页第六十六页，共76页。NNHNHNH3CCH3CH3H3CCOOCH3COOCH3BrBrNNHNHNH3CCH3CH3H3CCOOCH3COOCH3BrM=616M=694第66页/共76页第六十七页，共76页。-CH2COOCH3 -COOCH3 -CH2-CH2-CH2-C=ONHNHNNCH3CH3COOCH3COOCH3H3CH3C第67页/共76页第六十八页，共76页。NHNHNNCOOHCOOHHOOH-H2O -CHOHCH3 -H2O-CHOHCH3-CH3第68页/共76页第六十九页，共76页。-CH2COOH-CH3-2CH3 -CH2-CH2 NHNHNNCOOHCOOH第69页/共76页第七十页，共76页。NNNNCOOHCOOHMn-CH2COOH-CH2COOH第70页/共76页第七十一页，共