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文档简介
1、复原糖的测复原糖的测定定3,5-二硝基水二硝基水杨酸比色法杨酸比色法班级 : 生科2班姓名 : 胡雨雨同组人 :张贤明实验目的实验原理 复原糖是具有复原性的糖类的统称。分子中含有游离醛基或者酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有复原性。如葡糖糖、果糖、半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、麦芽糖等。 在碱性条件下,复原糖与 3 , 5 一二硝基水杨酸共热, 3 , 5 一二硝基水杨酸被复原为 3-氨基 -5- 硝基水杨酸棕红色物质,复原糖那么被氧化成糖酸及其他产物。一定范围内,复原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度成一定的比例关系, 540nm 波长下测定棕红色物质的消光值,查对规范曲线并计算,便可分别求出样品
2、中复原糖和总糖的含量。仪器、试剂、资料仪器 : 1 试管X 11 2 玻璃漏斗 X2 3 烧杯: 1OOml X 1 4 三角瓶: 100m1 X 1 5 容量瓶: 100ml X 3 6恒温水浴 7沸水浴 8电子天平 9分光光度计试剂 : 1 1 mg/ ml 葡萄糖规范液:准确称取 10mg 分析纯葡萄糖预先在 8 0 烘至恒重,置于小烧杯中,用少量蒸馏水溶解后,定量转移到 10ml 的容量瓶中,以蒸馏水定容至刻度,摇匀,冰箱中保管备用。 2 3 , 5- 二硝基水杨酸试剂:将 0.315g 3, 5- 硝基水杨酸和 13.1ml 2mol/NaOH溶液,加到 25ml 含有 9.25g
3、酒石酸钾钠的热水溶液中,再加 0.25g 结晶酚和 0.25g 亚硫酸钠,搅拌溶解。冷却后加蒸馏水定容至 50ml ,贮于棕色瓶中备用。 资料 :食用面粉。本卷须知 1. 沸水浴时应将试管口用保鲜膜封住,以防止水分蒸发引起体积误差。 2. 应该待反响体系稳定后进展比色约10min。 3. 比色时,比色皿中盛放的溶液体积不应过多,普通在2/33/4。4. 比色时不能将溶液溅在仪器面板和仪器内。 5. 规范曲线制造与样品含糖量测定应同时进展,一同显色和比色。6.实验完成后洗净仪器,放回原位。实验步骤1.规范曲线的绘制实验步骤 按照上表取7支试管配好试剂,将各管摇匀,在沸水浴中加热 5min ,取出
4、后立刻冷却至室温,再以蒸馏水定容至 25ml ,混匀。在 540nm 波长下,用 0 号管调零,分别读取 1-6 号管的吸光度。以吸光度为纵坐标,葡萄糖毫克数为横坐标,绘制规范曲线。实验步骤得出吸光值实验步骤 以吸光度为纵坐标,葡萄糖毫克数为横坐标,绘制规范曲线实验步骤2. 样品中复原糖和总糖含量的测定 样品中复原糖的提取:准确称取 3.0g 食用面粉,放在 50ml 三角瓶中,先以少量蒸馏水调成糊状,然后加 25ml 蒸馏水,搅匀,置于 5 0 恒温水浴中保温 20min ,使复原糖浸出。离心,用 2Oml 蒸馏水洗残渣,再过滤,将两次的滤液全部搜集在 50ml 的容量瓶中,用蒸馏水定容至刻
5、度,混匀,作为复原糖待测液。实验步骤 3 显色和比色,取 2 支 25 ml 刻度试管,编号,按下表所示的量操作。根据函数 y=0.595x-0.046 可得葡萄糖含量样品光密度平均值=(0.112+0.121)/2=0.1165实验结果及数据处置 知提取液总体积为100ml、测定时取用体积为0.5ml、样品毫克数为3000mg、根据以下公式进展计算。样品平均葡萄糖=0.27+0.28=0.275mg复原糖%=0.275*100*100%/0.5*3000=18.3%其他方法糖含量定量测定的方法除此之外还有高效液相色谱法HPLC苯酚-硫酸法 蒽酮法 双折射景象心得从结果中所得到的的心得 并不是
6、一切的糖有甜的味道,只需少数构造简单的糖是有甜味的,如葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖、乳糖等,充斥于各种甜食之中的就是它们。自然界存在的多数糖多糖,吃起来并不甜,各种粮食都是含糖大户,主要是淀粉和糊精。粮食不仅可以提供能量,而且还是B族维生素、膳食纤维、矿物质的重要来源,因此人们的生活中确实不能没有它。当我们食用面食时,虽然食用的是主食,但现实上其中的一半都是糖分所以对于不同身体素质的人要留意合理食用面食。众所周知,糖分摄入过多会导致不同的疾病,摄入过多的糖分,多余不能消化的糖分,会被身体储存起来,青少年在饮食中摄入过多糖分,他们成年后患心血管疾病的风险会明显升高。但其实正常食用面食并不会导致严重的疾病,重要是合理安排膳食,合理搭配就好了。实验误差分析1.在称取面粉时候,滤纸上有少许淀粉未倒干净,或者电子天平不太准确呵
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