革兰氏阴性细菌抗生素耐药检测

1、会计学1革兰氏阴性细菌抗生素耐药检测革兰氏阴性细菌抗生素耐药检测第1页/共118页第2页/共118页第3页/共118页氨苄西林氨苄西林1965TEM-1大肠杆菌大肠杆菌副伤寒沙门菌副伤寒沙门菌1970sTEM-1在在28Gm(-)菌中报道菌中报道1983ESBL在欧洲出在欧洲出现现1988ESBL在美国出现在美国出现2000KPCs、其它、其它超广谱头孢菌素超广谱头孢菌素1963革兰阴性菌中第4页/共118页第5页/共118页第6页/共118页MIC (g/ml)第7页/共118页第8页/共118页第9页/共118页第10页/共118页第11页/共118页第12页/共118页-內酰胺酶诱导內酰

2、胺酶诱导阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌常规不必做此常规不必做此试验试验第13页/共118页第14页/共118页第15页/共118页治疗前菌群治疗前菌群治疗后菌群治疗后菌群 “耐药”菌株繁殖第16页/共118页第17页/共118页第18页/共118页头孢噻肟头孢噻肟第19页/共118页头孢噻肟头孢噻肟CTX 30第20页/共118页头孢噻肟头孢噻肟第21页/共118页好好差差第22页/共118页第23页/共118页MIC (g/ml)对该株阴沟肠杆菌应考虑联合治疗（如对该株阴沟肠杆菌应考虑联合治疗（如 -内酰胺类内酰胺类+氨基糖苷类或氟喹诺酮类氨基糖苷类或氟喹诺酮类）第24页/共118页MIC (g/ml

3、)第25页/共118页第26页/共118页第27页/共118页第28页/共118页第29页/共118页第30页/共118页第31页/共118页第32页/共118页MIC (g/ml)第33页/共118页第34页/共118页第35页/共118页第36页/共118页第37页/共118页MIC (g/ml)“这株肺炎克雷伯菌可疑产超广谱beta內酰胺酶；确证试验还未完成”初步报告初步报告 例例:第38页/共118页头孢他啶头孢他啶/克拉维酸克拉维酸头孢噻肟头孢噻肟/克拉维酸克拉维酸头孢他啶头孢他啶头孢噻肟头孢噻肟10 mm26 mm头孢他啶头孢他啶/克拉维酸克拉维酸头孢他啶头孢他啶头孢噻肟头孢噻肟头

4、孢他啶头孢他啶/克拉维酸克拉维酸头孢他啶头孢他啶头孢噻肟头孢噻肟/克拉维酸克拉维酸头孢噻肟头孢噻肟头孢他啶头孢他啶/克拉维酸克拉维酸头孢他啶头孢他啶第39页/共118页MIC (g/ml)“该菌株的确证试验提示为少见的耐药类型【产超广谱beta內酰胺酶（ESBL）】”第40页/共118页头孢他啶头孢他啶/克拉维酸克拉维酸头孢他啶头孢他啶确证试验也可确证试验也可以用以用Microscan，Phoenix，Sensititre, Vitek等仪器完等仪器完成成第41页/共118页第42页/共118页第43页/共118页第44页/共118页第45页/共118页第46页/共118页MIC (g/ml)

5、第47页/共118页第48页/共118页第49页/共118页MIC (g/ml)补充实验提示这株阴沟肠杆菌产超广谱beta内酰胺酶：建议咨询ID第50页/共118页第51页/共118页第52页/共118页第53页/共118页MIC (g/ml)“该肺炎克雷伯菌可疑产ESBL，确证试验还未完成”第54页/共118页头孢他啶头孢他啶/克拉维酸克拉维酸头孢噻肟头孢噻肟/克拉维酸克拉维酸头孢他啶头孢他啶头孢噻肟头孢噻肟第55页/共118页MIC (g/ml)“对大肠杆菌的确证试验提示不常见的耐药（但不是由ESBL引起）”第56页/共118页第57页/共118页第58页/共118页第59页/共118页第

6、60页/共118页第61页/共118页第62页/共118页第63页/共118页第64页/共118页附录附录G.肠杆菌科中碳青霉烯酶检测的筛选和确证试验（肠杆菌科中碳青霉烯酶检测的筛选和确证试验（2）第65页/共118页第66页/共118页第67页/共118页 和/或抑菌圈直径为19-21mm 和/或抑菌圈直径为16-21mm 和和/或或第68页/共118页 1.制备大肠杆菌制备大肠杆菌ATCC25922的的0.5麦氏浊度菌悬液，再麦氏浊度菌悬液，再10倍稀释倍稀释2.用棉签蘸取菌液涂布用棉签蘸取菌液涂布MH平皿如纸平皿如纸片扩散法试验；将厄他培南或美片扩散法试验；将厄他培南或美罗培南（最好）纸

7、片贴于平皿上罗培南（最好）纸片贴于平皿上3.将待测菌株将待测菌株(#1 - #3)从纸片边缘从纸片边缘向外划线（使用向外划线（使用1微升接种环）微升接种环）4.孵育过夜孵育过夜5.观察划线菌株周围大肠杆菌的生观察划线菌株周围大肠杆菌的生长长-提示碳青霉烯水解酶提示碳青霉烯水解酶 第69页/共118页第70页/共118页第71页/共118页第72页/共118页第73页/共118页第74页/共118页n报告碳青霉烯药物的MIC，不解释结果（CLSI推荐）或第75页/共118页第76页/共118页报告MIC，不解释结果第77页/共118页第78页/共118页“敏感敏感”但抑但抑菌圈为菌圈为20mm-

8、可疑产碳青霉可疑产碳青霉烯酶；进行改烯酶；进行改良良Hodge试验试验第79页/共118页改良改良Hodge试验阳试验阳性性敏感”但抑菌圈为20mm-可疑产碳青霉烯酶第80页/共118页第81页/共118页第82页/共118页第83页/共118页第84页/共118页第85页/共118页第86页/共118页第87页/共118页第88页/共118页The Sanford Guide to Antimicrobial Therapy. 39th ed. 2009.第89页/共118页第90页/共118页第91页/共118页第92页/共118页“严重铜绿假单胞菌感染需考虑联合治疗严重铜绿假单胞菌感染需

9、考虑联合治疗”第93页/共118页The Sanford Guide to Antimicrobial Therapy. 39th ed. 2009.第94页/共118页第95页/共118页第96页/共118页第97页/共118页第98页/共118页第99页/共118页The Sanford Guide to Antimicrobial Therapy. 39th ed. 2009.第100页/共118页第101页/共118页第102页/共118页第103页/共118页第104页/共118页第105页/共118页第106页/共118页第107页/共118页第108页/共118页第109页/共118页第110页/共118页第111页/共118页MIC (g/ml)第112页/共118页第113页/共118页MIC (g/ml)“对大肠杆菌的确证试验提示不常见的耐药（但不是由ESBL引起）”第114页/共118页第115页/共118页 1.制备大肠杆菌制备大肠杆菌ATCC25922的的0.5麦氏浊度菌悬液，再麦氏浊度菌悬液，再10倍稀释倍稀释2.用棉签蘸取菌液涂布用棉签蘸取菌液涂布MH平皿如纸平皿如纸片扩散法试验；将厄他培南或美片扩散法试验；将厄他培南或美罗培南（最好）纸片贴于平皿上罗培南（最好）纸片贴于平