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文档简介
1、1.干细胞在生物学中的作用(1)应用:器官移植、皮肤再生、生物修复(子宫内膜)、抗衰老、疾病进行干预(2)干细胞的名词解释:功能未特化、具有自我复制、自我更新,且在一定条件下分化成各种细胞类型的多能性细胞(3)按照发育阶段分类全能干细胞的名词解释:是最原始的干细胞,具有自我更新、高度增殖和多向分化发育成各种组织细胞甚至完整个体的潜能成体干细胞的名词解释:存在于已分化组织中的未分化细胞,可来源于胚胎、胎儿或成人的组织中,如造血干细胞、成肌干细胞造血干细胞的名词解释:存在于造血器官组织中的原始造血细胞,是各种血细胞的共同祖先,能够增殖分化为各种不同功能的血细胞。胚胎干细胞的名词解释:从受精卵开始分
2、裂到四个细胞阶段的全功能未分化生殖细胞。同源重组、影响子代、定向整合、基因敲除、靶细胞(4)按照分化潜能分类多能干细胞:具有分化成其他组织细胞的潜能,但不具有发育成完整个体的能力专能干细胞:仅能向一种类型或密切联系的两种类型的细胞分化(5)干细胞的生物学特点:分化-终身未分化或低分化特征,具有多向分化潜能,能分化出不同类型的组织细胞能无限制的分裂增殖通过两种方式分裂,对称分裂和不对称分裂,对称分裂产生两个相同的干细胞,不对称分裂产生一个干细胞和一个单能干细胞具有自我更新能力在机体中的位置和数量相对恒定分裂的慢周期性,绝大多数干细胞处于G0期(分化、分裂、自我更新)(6)在动物生产中的作用:生产
3、克隆动物;生产转基因动物;研究细胞分化;研究发育的基因调控(7)干细胞的优点:来源广泛,易于分离、培养和扩增,具有多向分化和低免疫原性,并且易于接受外源基因的引入2、 PCR(1)概念:利用天然DNA的复制机制,在体外通过酶促反应有选择性地大量扩增一段目的基因的技术(2)原理:在模板DNA、引物、四种脱氧核糖核苷酸的存在下,依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸与单链模板DNA(3)应用:科学研究(基因克隆、DNA测序)临床诊断(遗传疾患的诊断、监测临床标本中病原体的核酸序列)(4)PCR的基本流程:引物
4、设计(兼顾扩增的效率和特异性,引物长度15-30bp、碱基随机分布)、配置PCR、PCR扩增、检测扩增产物、扩增产物的回收、检测回收产物(5)胶回收的目的:去除非特异扩增的产物;去除多余的底物/Taq酶;得到目的片段(6)胶回收过程:切胶(紫外、称重、捣碎)溶胶(膜结合液、水浴加热)将溶胶转移至纯化柱种,离心,收集管漂洗(离心、开盖离心)洗脱DNA保存-20(7)回收产物的检测:紫外分光光度计法检测、琼脂糖凝胶电泳法检测(8)无PCR产物:无模板、无DNA聚合酶、Mg2+、无引物(9)拖尾:提高温度、减少循环次数/延长时间、降低DNA聚合酶的用量(10)二聚体:提高温度、减少循环次数、引物3不
5、互补(11)阴性对照出现扩增带:说明试剂污染,戴手套、重复、dUTP(12)PCR失败的原因:模板:污染变性不彻底引物的质量浓度等(13)影响PCR结果的因素:引物、dNTP的浓度酶与模板的比例3、本科对哪个试验印象深刻答:动物生理学试验中的反射时的测定和反射弧的分析,剪去上方头颅、分离出左后肢的坐骨神经干、捣毁脑脊髓,视觉和感觉都很强烈,所以记忆比较深刻。生命(感受器、传入神经、中间神经元、效应器)4、毕业设计的相关问题、写毕业论文的原因5、你大学最成功的事情是什么?What the best sucessfui thing in your college?what did you lear
6、n from it? Why?答:交换生(交换生的条件、开拓眼界)/考研成功6、用英语说说细胞生物学、微生物学中的实验技术?答:微生物学中的实验技术:显微技术(Microscopy)-利用光学系统或者电子光学系统设备,观察肉眼不能分辨的微小生物的形态结构及其特性的技术普通的光学显微镜、扫描电子显微镜、荧光显微镜、无菌技术(aseptic technique)、染色技术(staining technique)、保藏技术(preservation technology)细胞生物学中的实验技术:Microscopy、细胞组分分析技术(cell component analysis technique
7、s)、细胞工程(cell engineering)7、本科期间跟着老师做过什么?8、酶切位点:DNA上的一段碱基的特定序列,限制性内切酶能够识别出这个位点,并在此处将DNA切成两段9、会不会查论文?有什么方式?答:最常用的中文数据库,知网、维普、万方;Sci-Hub、谷歌学术、web of science检索方法-一筐式检索、出版物检索、高级检索、专业检索(专业的检索表达式)、作者发文检索、句子检索(检索项、逻辑关系)、知识元检索(完整表达知识信息的最小单位-概念、图)、引文检索(对一篇文章的参考文献进行检索)、知识元下的指数(关注度和传播度、研究进展、关注文献、全方位深度的认知,发现并追踪当
8、前的学术热点)、二次检索(检索结果中的检索)l在知网上查找英文文献:DOIl在知网上投稿:出版平台-选刊投稿-影响因子、投稿邮箱、网址等l你了解过SCI吗?答:听到或看到SCI是指科学引文索引,它不仅是一部重要的检索工具书,还是科学研究成果评价的一项重要依据。学术水平、评价体系自己发表10、微生物学实验分数是最高的,你是怎么学的?答:实验课,仪器不知道怎么使用的,先预习,在预习过程中勾画出不懂的地方,并进行查阅,如果看完之后,整个实验过程依旧不清晰,我会找相关的实验视频进行观看删选,做的实验就是基础一点,简单一点的内容,主要是在让我们熟悉比如培养基的配制、高压蒸汽灭菌,划平板、每个小组5个人l
9、你印象最深刻的一门课?(impressed)答:生物化学-火锅、啤酒-嘌呤-尿酸-痛风l碱基的分解代谢-脱氨反应、尿酸、尿囊素、尿囊酸、尿素、氨和二氧化碳;别嘌呤醇11、多糖有什么应用?答:黄芪(qi)多糖应用于养猪生产中,可以提高猪群健康度和抗病力;银耳多糖应用于食品生产中,这类多糖能够增加溶液黏度以及乳化稳定作用,赋予食品良好的加工特性,提高食品的营养价值。应用于化妆品生产中,保湿效果与透明质酸相当,可以作为天然的保湿剂。应用于保健医药,具有医疗保健的功能,免疫调节、抗肿瘤作用、降血糖、促进创伤愈合等。13、新冠移苗有哪些类型?原理是什么答:灭活疫苗-使用非洲绿猴肾(Vero)细胞进行病毒
10、培养扩增,经丙内酯灭活病毒,保留抗原成分以诱导机体产生免疫应答,并加用氢氧化铝佐剂以提高免疫原性。腺病毒载体移苗-将病毒的刺突糖蛋白(S蛋白)基因重组到复制缺陷型人体5型腺病毒基因内,基因重组的腺病毒在体内表达S蛋白的抗原,诱导机体产生免疫应答重组亚单位疫苗-将S蛋白受体结合区基因重组到中国仓鼠卵巢细胞基因内,在体外表达形成RBD二聚体,并加用氢氧化铝佐剂以提高免疫原性。l新冠病毒的检测方法?答:核酸检测:荧光PCR法保存不当或不能及时送检,导致结果不准确、联合探针锚定聚合测序法(专门的仪器检测测序DNA纳米球上携带的基因序列)l灵敏度高、不容易漏检、结果受多种因素的影响而不准、恒温扩增芯片法
11、(基于核酸之间的互补结合特性开发)准确率高,时间更短,价格更高,检测通量相对更低抗体检测(lgM、lgG):胶体金法方便、出结果快,检测通量底、有一定的误判率、磁微粒化学发光法(在化学发光检测基础上,加用磁性纳米粒子)选择性不好、环境影响比较大;抗原检测试剂进行自测,抗体与抗原特异性结合的原理抗原:引起抗体产生的物质,可以是病毒、细菌等异物,也可以是人自身死亡的细胞抗体:机体由于抗原的刺激产生的具有保护作用的蛋白质抗原检测、核酸检测、抗体检测(免疫球蛋白M)12、如何用纤维素制备乙醇?答:纤维素酶降解+菌株发酵产生乙醇l纤维素、半纤维素、木质素:纸、木屑、废麦渣等l燃料乙醇:价格低廉、原料来源
12、广泛、低污染等优点;生物法-预处理和酶解工艺将甘蔗、玉米等粮食变成可发酵的糖类,再经过菌株发酵化学法-纤维素化学氢解制乙醇(经济、能源)l纤维素酶的应用乙醇:纤维素(纤维素酶)纤维二糖(-葡萄糖苷酶)葡萄糖酵母发酵酱油:纤维素酶制剂应用于固体无盐酱油中,可以进一步破坏原料的组织结构,使蛋白充分暴露,提高酱油的收得率和加快发酵的速度。13、化疗为什么会脱发、呕吐答:首先是化学药物治疗没有具体靶向性,其次化学药物具有毒性脱发:毛囊细胞;呕吐:胃肠道粘膜造成一定的刺激,细胞被破坏,引起恶心呕吐l肿瘤的疗法:手术、传统放疗、化疗、免疫疗法、中子治疗硼中子俘获治疗-最新、利用中子与肿瘤细胞中富集的硼元素
13、发生特异性俘获反应,会在细胞内产生短射程的次级粒子(-粒子和锂离子),而这些次级粒子的射程仅有微米量级,正好与肿瘤细胞的直径一致,能够在肿瘤细胞内定向爆破,而周边正常细胞则几乎不受损伤。14、肠道微生物和哪些生理生化问题有关答:粘膜免疫调控-国外有研究者发现脆弱拟杆菌的细菌多糖PSA能够指导免疫系统的发育和成熟。这些发现揭示了免疫系统是如何感知菌群,以及正常条件下细菌是如何调控免疫系统发育的,为理解微生物与免疫应答之间的关系提供了新视角-菌群不仅是作为宿主防御,而且是一种共生的生理过程与神经、免疫、情绪有关-通过代谢产物或改变神经递质、激活免疫信号通路;缺乏菌群会影响小鼠的行为、脑基因的表达及
14、神经系统的发育;喝了菌液的志愿者的抑郁、愤怒和敌意降低。对癌症治疗的应答-肠道微生物组成影响黑色素瘤患者、晚期肺癌、肾癌患者对免疫检查点抑制剂治疗的应答和肿瘤控制。15、肿瘤是如何产生的?答:肿瘤在本质上是基因病,各种环境和遗传的因素以协同或序贯的方式引起DNA损伤,从而激活原癌基因或灭活抑癌基因,加上凋亡调控基因或DNA修复基因的改变,继而引起表达水平的异常,使靶细胞发生转化。被转化的细胞先呈多克隆性增生,经过一个漫长的多阶段的演进过程,其中一个克隆相对无限的扩增,通过附加突变,选择性形成具有不同特点的亚克隆,从而获得浸润和转移的能力。l因素:内因:精神因素、内分泌失调(乳腺癌、前列腺癌)、
15、免疫缺陷和遗传因素(遗传性皮肤病);外因:化学、物理、生物、营养-吸烟(肺癌、咽癌)、职业因素(煤焦油、亚硝胺类化合物-皮肤、呼吸道癌)16、你对生物材料有何理解(Biomaterials)答:生物材料是应用于与生命系统接触和发生相互作用的,并能对其细胞、组织和器官进行诊断治疗、替换修复或诱导再生的一类天然或人工合成的特殊功能材料l四个特性:生物功能性、生物相容性(血液、组织-无毒性、无致癌性、无热原反应、无免疫排斥反应)、化学稳定性(耐生物老化性、可生物降解性)可加工性(成型、消毒)l应用:广泛用于人体假肢、移植药物传递疫苗和免疫治疗(HIV疫苗,最近研究发现,在感染HIV的模型小鼠和恒河猴
16、中,生物材料能够显著提高HIV备选疗法的疗效。脂质体递送HIV病毒包膜蛋白,能够促进淋巴细胞对抗原的摄取和延长抗原的滞留时间等;过敏的免疫疗法,目前仍处于研究阶段的微粒装载技术,可以控制免疫组分的释放,减少集中过敏原引发的不良反应,还能同时装载其他免疫组分,从而调控免疫应答避免超敏反应)组织工程修复肿瘤治疗17、你对基因编辑有什么理解?现在比较常见的基因编辑技术有哪些?答:首先基因编辑是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术。在基因功能研究、药物开发、疾病治疗等;18年基因编辑婴儿-艾滋病;锌指核酸酶ZFN、转录激活子样效应因子核酸酶TALEN、规律性间隔的
17、短回文序列重复簇CRISPR/CAS(3、9、12、13、X),各种各样的单碱基编辑技术等挑战-分子机器在试图修改一个位点的基因突变时,可能会意外地在另一位点的产生危险的新突变18、生命科学主要包含哪些领域?你对本专业有哪些理解?答:神经科学、心理学、生物学、生物化学、生物工程、生物制药、基因工程、生理学和整合生物学等领域研究对象:动植物、细菌、真菌、人类学科:生物与生化、微生物学、环境/生态学、分子生物与遗传学l生物学是研究生物的结构、功能、发生和发展规律的科学。19、构象:分子的三维结构,即分子中所有原子在空间中的位置总和构型:分子中原子在空间位置中的相对取向20、蛋白质的一级结构多肽链中
18、氨基酸的排列顺序,也包括多肽链中连接氨基酸残基的共价键,主要是肽键和二硫键蛋白质的种类及其繁多,其一级结构也各不相同;一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础;但蛋白质一级结构不是决定蛋白质空间构象的唯一因素肽键和二硫键二级结构多肽链借助氢键形成的有规则的局部结构,如-螺旋、-折叠等。它是多肽链中主链原子的局部空间排布,不涉及侧链部分的构象是一种局部构象;仅仅是肽单元之间相互作用形成的空间结构,并不涉及氨基酸侧链及-H原子所形成的构象;二级结构有较多的类型;超二级结构,如氢键三级结构多肽链借助非共价力折叠成特定走向的球状实体一条多肽链的三维空间构象;球状结构给出最低的表面积/体积,使蛋白
19、质与环境中的作用降至最低氢键、盐键、疏水键、范德华力四级结构具有三级结构的亚基借助非共价力彼此缔合成寡聚或多聚蛋白质(亚基:构成寡聚蛋白的多肽链,亚基之间通过非共价力缔合)两条或两条以上多肽链的三维空间构象氢键、盐键、疏水键、范德华力超二级结构多肽链顺序上的相邻的二级结构,常常在空间中靠近,彼此相互作用,形成有规则的二级结构聚集体它们可以直接作为三级结构的建筑块或结构域的组成单位氢键、盐键、疏水键、范德华力结构域多肽链局部折叠成的稳定的、相对独立的球状实体,简称域。常见的结构域为序列上连续的100200个残基。结构域又称为功能域。结构域的类型有全平行螺旋、平行或混合型折叠式反平行折叠式、富含金
20、属或二硫键式等氢键、盐键、疏水键、范德华力-螺旋-折叠-转角无规卷曲重复、每圈螺旋3.6,0.54、100、0.15、0.5、每个肽基的CO与其前面第三个肽基的NH重复、多肽链主链处于最伸展的状态,肽键的平面非重复、第一个残基的CO与第四个残基的NH之间氢键键合、形成一个紧密的环泛指那些不能被归入明确二级结构元件的多肽区段三股螺旋胶原蛋白,右手超螺旋览、螺距8.6nm,每圈每股包含30残基,0.95nm,3.3个21、相互作用力共价键两个或者多个原子共同使用外层电子,在理想情况下,电子达到饱和状态,由此形成比较稳定和坚固的化学结构范德华力一种比离子键和氢键都弱的分子间非专一性相互作用力,由极性
21、分子的永久偶极和非极性分子中原子运动的电子不对称性而产生的瞬时偶极,以及两种偶极诱导出的诱导偶极之间的相互作用力。氢键发生在一个共价键连接的氢原子(氢键供体)和具有部分负电荷的基团(氢键受体)之间的相互作用力。羟基和氨基中的氢原子、羰基中的氧原子和氨基中的氮原子。离子键/盐键/静电相互作用带有相同或相反电荷的基团间的相互作用。作用力可以用库伦定律进行计算。疏水键非极性基团在极性溶液中相互靠近的相互作用力。二硫键蛋白质分子中两个半胱氨酸的巯基氧化形成的共价键肽键由一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的氨基脱去一分子水缩合而成的共价键22、抑制剂-ES/酶竞争性抑制剂(只能同自由的酶结合)竞争性抑制剂的
22、化学结构与底物相似,因此能竞争与酶的活性部位结合,抑制剂与酶活性部位结合后,底物被排斥在酶活性部位之外,导致酶促反应被抑制Vm-,Km增大(EI的形成可随着S的浓度增高而发生逆转)丙二酸是琥珀酸脱氢酶非竞争性抑制剂(既能同E结合,又能同ES结合)酶可同时与底物和这类抑制剂结合,且酶与结合能力互不影响,但形成的三元复合物不能进一步分解为产物纯粹:Vm降低,Km-混合:Vm降低,KiKi,Km增大;反竞争性抑制剂(只能同ES结合)酶只有与底物结合后才能与这类抑制剂结合Vm与Km按比列下降可逆抑制剂与酶蛋白以非共价键结合,酶活性暂时性丧失,抑制作用可以通过超滤或透析等方法除去不可逆抑制剂23、MWC
23、模型:齐变/协调/对称模型,是解释别构蛋白S形v-S曲线的动力学模型之一。其核心观点是寡聚蛋白的亚基是对称排列的,对于某一配体,每个亚基都有处于平衡的两种状态,R态和T态,所有亚基的状态的改变是同步的。不存在两种状态的杂合态KNF模型:渐变/序变模型,每个亚基只采取两种状态中的一种,亚基的状态改变是逐个和有序的,多种杂合态24、糖代谢糖酵解(EMP):在细胞质中,葡萄糖或糖原分子经一系列酶促反应生成丙酮酸的过程。是细胞在无氧条件下产能的一种方式,是细胞有氧氧化和发酵的必经途径葡萄糖+ATP(己糖激酶)葡萄糖-6-磷酸(己糖磷酸异构酶)果糖-6-磷酸+ATP(果糖磷酸激酶)果糖-1,6-二磷酸(
24、醛缩酶)磷酸二羟丙酮(丙糖磷酸异构酶)+3-磷酸甘油醛+无机磷酸(3-磷酸甘油醛脱氢酶)+NAD+【氧化脱氢反应】1,3-二磷酸甘油酸+ADP(磷酸甘油酸激酶)3-磷酸甘油酸(磷酸甘油酸变位酶)2-磷酸甘油酸(烯醇化酶)磷酸烯醇式丙酮酸25、你了解过生科院吗?答:四个主要的学科方向,微生物学(农业害虫生物防治和药物创新研究、蝗虫、绿僵菌的功能基因鉴定);植物学(植物激素信号传导、果实成熟衰老机理、植物基因工程);遗传学(家蚕驯化基因组学和功能基因组学);生理学(衰老、癌症发生机理、药物靶向传输)26、你看过哪些期刊答:在本科期间,去查阅论文主要是在写课程论文和做毕设的时候,看过的期刊有分子植物
25、育种、应用生态学报、西南民族大学学报、中南林业科技大学学报、中国科学生命科学除此之外,我在微信还关注了很多学术类公众号,它们每天会推送不同期刊的最新论文或者是知名课题组的研究进展等,公众号比如国际科学、生物世界、中国生物技术网、JIPB、Nature Portfolio、科研圈、BioArt等JAMA27、那你觉得自己有哪些优点和不足?(defeat/shortcoming)答:我个人觉得我的优势/优点在于自己感兴趣的或者脑袋里有一点想法的事情,我一定会,遇到问题解决问题、不怕苦、发现研究方向不足在于:我本科期间的主要研究方向是植物方面,对其他方向的研究可能了解得不深,其他试验方法和技术的掌握
26、不到位,但是从现在到开学,有这么多时间去学习,去充实。28、你是否联系过导师?l如果被录取,你有想跟的导师吗?答:我有提前了解过各位导师的研究方向,并且也拜读了几位老师的文章,读完之后,我觉得我自己受益匪浅,而且思路也更加开阔了,虽然大家都说选择大于努力,要提前联系和选择导师,但是我自己这边还是想先专心通过复试,再考虑这件事情,我相信在选择导师这件事上,学校会有一套完善的机制,我也相信在这套机制下,我能够找到自己感兴趣的研究方向并且争取让适合我的导师选到我,谢谢老师。29、你是否了解过生命科学学院?研究方向?你对生物学专业有什么自己的理解?答:了解过;30、如何评价大学生活?答:分年份;既简单
27、又充实31、专业问题我不会就是不会,我不会为自己找过多的借口和理由,而是想着下一步该怎么去努力改进,对此我很抱歉,同时,非常感谢老师能够直言不讳的指出我的问题所在,谢谢老师的指导32、说说你为什么要考研?答:研究类+感兴趣的方向33、你在本科有什么值得骄傲的事情?答:交换生条件+内心34、请问同学在研究生期间是有什么打算呢?答:我非常期待自己的研究生生活,甚至已经提前做好了规划,如果有幸被录取的话,第一年,我将会全力以赴学习本专业的各种知识,掌握本专业的各类研究方法,其次呢,我会阅读导师推荐的各种书籍,尽可能的多读书,读各种类型的书,丰富自己的知识积累,第二年,我将确定自己的研究方向,并且积极
28、参与到导师的各种实验和科研工作中,做好辅助,第三年呢,我将尽可能的写出高质量的论文,如果有可能的话,我还会申请博士学位,总而言之,我 HYPERLINK /search.html?type=3 t /content/22/0712/10/_blank 希望在这个优秀的大学里面能够为我以后的职业和生活打下坚实的基础。认真度过35、你本科期间为什么没参与过课题研究?答:本科期间我确实没有接触到课题研究,才导致在这一块都是空白的,没有接触课题研究的过程以及它能带给我的思想、认知方面的升级和迭代,确实是我的遗憾。但也正是因为如此,我才想继续读研深造,弥补我在这方面能力的缺失,另外,有些能力是可以迁移的
29、36、受体配体结合的例子?答:受体是指位于细胞膜上或细胞内能与某些化学物质发生特异性结合并诱发生物效应的特殊生物分子;配体能与受体发生特异性结合的活性物质;神经递质与促离子型受体、G蛋白偶联受体37、淀粉制备乳酸的原理答:淀粉在葡萄糖淀粉酶的作用下,降解为葡萄糖,葡萄糖再进一步经菌株(乳酸菌)发酵,生产乳酸。(葡萄糖经糖酵解生成丙酮酸,其在缺氧条件下由乳酸脱氢酶催化,利用甘油醛-3-磷酸脱氢酶催化生成的NADH使丙酮酸还原成L-乳酸)淀粉酶-内切酶、随机-1,4糖苷键和-1,6糖苷键糊糖淀粉酶-麦芽糖l应用:食品工业上,作为酸味剂和反腐剂,软饮料和啤酒;医疗工业上,药品或乳酸盐类、难溶性药物混
30、合l合成法:乳腈法、丙烯腈法;乳腈法-乙醛和冷的氢氰酸连续送入反应器生成乳腈,用泵将乳腈打入水解釜,注入硫酸和水,水解得到粗乳酸,酯化釜,乙醇酯化,精馏、浓缩、分解l酶化法:丙酮酸酶法转化,D-乳酸38、课程实验39、SDS答:SDS-十二烷基硫酸钠,是一种带负电荷的阴离子去污剂,在电泳前,将蛋白质样品用SDS处理,SDS将打开蛋白质的折叠,并沿伸展的多肽链表面吸附,净负电荷,SDS量与多肽链的大小、较小的多肽l双向电泳答:结合等电聚焦(第一向)和SDS(第二向),其原理、浓缩胶、蛋白质的分子大小、等电点、二维图谱等电聚焦-等电点、两性电解质、PH梯度,移向并聚集lNative答:非变性、蛋白
31、质样品、凝胶、电泳缓冲液、净电荷的差别;有活性同工酶-催化相同的化学反应,但其蛋白质分子结构、理化性质和免疫性都存在明显差异的一组酶脂质体-极性脂(甘油磷脂)分子在水中聚合,形成内含水的脂双层微囊,对水溶性分子不通透的载脂蛋白-脱去脂的脂蛋白,主要作用是增溶疏水脂质和作为脂蛋白受体的识别部位。l毛细血管电泳-分析、散热好、较高的电场、自动化、分辨率高l蛋白质检测的原理-根据蛋白质的物理性质和生物化学性质、实验目的l考马斯亮蓝染色-与蛋白质多肽链定量结合;l活性染色-有活性的目标蛋白质特有的生物化学反应产生的有色物质,或者加入某种能与产物生产颜色的物质进行检测的l免疫印迹或蛋白质印迹:抗体与抗原
32、专一性结合40、影响DNA、RNA的纯度有哪些?答:离心不充分或者在吸取上清液时,吸入了沉淀,会带来蛋白质污染;酶的失活;蛋白质或酚污染;裂解液和中和液比例不适当、裂解不充分(裂解、离心)41、和甘蓝一个品种的蔬菜有哪些?答:十字花科,花菜、西兰花、卷心菜、芥兰42、ATP为什么可以储存能量?答:高能磷酸键,化学能43、你最感兴趣的生物学现象?答:44、学习方法答:预习思考真学习状态关键词应用(嘌呤代谢-尿酸)45、数学、物理内容与读研的专业有什么联系?答:数学-工具,比如处理生物样品间差异需要做统计分析,计算生物学、生物信息学中需要构建数学模型物理-生物物理学(应用物理学的概念和方法研究生物
33、各层次结构与功能的关系、生命活动的物理等)l生物力学概念:利用力学的原理和方法对生物体的力学问题定量研究的生物物理学分支研究对象不同:生物流体力学、生物固体力学、运动生物力学基础:质量守恒、动量守恒、能量守恒、描写物性的本构方程重点研究:生理学、医学上的力学问题应用:在眼科中的应用,角膜屈光手术上。角膜生物力学,角膜作为软组织,粘弹性、非线性弹性和各向异性等生物力学属性;在人工器官制作方面的应用,研究各种生物材料的力学特性,主要测定在生理状态或模拟生理状态下,应力应变,弹性模量等力学参数,原始资料和科学数据;医学诊断46、你认为哲学和科学有什么联系?答:哲学从总体上揭示人与世界的关系,研究世界
34、的本质和规律,而各门具体科学从某一方面、某一领域来研究世界,把握某一特殊规律;一般与具体的关系,哲学为科学提供世界观和方法论的指导,科学的进步推动着哲学的发展,没有科学的哲学是幻想,没有哲学的科学是习惯性联想。47、如果以后遇到科研上的问题,你会如何处理?答:首先我会弄清楚这个问题,如果是属于自己的知识存在盲点或者是功夫没下到位呈现出来的,那么我就会通过学习、专研;拆解-方案-导师;科研思路不清晰;学术研究案例精析大课30讲;科研软件、写作能力等。48、新陈代谢是什么?同化和异化作用的区别?答:生物体内进行的一切化学变化的总称l中心代谢-主要代谢途径:生物体内普遍存在的代谢途径l代谢中间物:指
35、代谢过程中被连续转变的反应物,它既是前一种酶作用的产物,又是后一种酶作用的反应物l中间代谢-新陈代谢途径中的各个环节l合成代谢-生物体利用小分子合成大分子,构造自身结构的过程l分解代谢-生物体将复杂的有机物分解为较小的、较简单的物质的过程l怎么理解新陈代谢?答:综合概念,在生物体内,为了维持生命所需要的全部化学反应,根据物质和能量在反应中的变化趋势,可以分为合成代谢和分解代谢;代表了生命的一个基本特征,生物体从外界环境获取营养物质,转变成自身的组成成分,储存能量;将自身的组成分解,释放能量,并将分解的终产物排出体外。49、如何理解基因克隆?答:将DNA的限制酶切插入可自主复制的载体中,获得重组
36、DNA,导入宿主细胞,经过无性繁殖,获得大量增殖的过程。l应用:改变农作物的基因型,产生大量抗病、抗虫、抗盐碱等的新品种,产量培育品种优良的家畜,肉质好的、产奶量高医疗保健,分子克隆技术,致病基因,弄清疾病发生的分子机制,器官移植保护濒危动植物,再现物种l一般步骤:目的基因和载体的选择限制性内切酶处理后获得的DNA片段和载体目基因与载体连接重组体导入受体细胞筛选转化的细胞50、RNA有几种?结构和功能?14.2答:主要分为5类51、试分析构成RNA三级结构的作用力答:氢键、疏水作用、范德华力、电荷作用52、分子生物学中常用的技术答:原位杂交技术-利用标记的核酸探针,经放射自显影或非放射检测体系
37、,从组织、细胞及染色体水平上对核酸进行定位和相对定量研究的方法,RNA和染色体53、诺贝尔医学奖/生理学奖答:2018年肿瘤免疫学-艾利森在免疫细胞表面发现,一种名为CTLA-4的蛋白(只有当特定的T细胞识别出作用目标,同时接受到其他分子的启动信号),分子刹车,T细胞大量增殖,攻击肿瘤细胞、伊匹单抗本庶佑发现T细胞抑制受体PD-1、自我毁灭程序l2019年理解细胞感知和适应氧气变化机制-他们发现了缺氧诱导因子HIF-1、促红细胞生成素,证实HIF-1是通过红细胞和血管的新生介导了机体在低氧条件下的适应性反应;发现,除了促红细胞生成素,HIF-1在哺乳动物细胞内还可以结合并激活涉及代谢调节、血管
38、新生、胚胎发育、免疫和肿瘤等过程众多的其他基因;高氧下,VHL蛋白可以通过氧依赖的蛋白水解作用负性调HIF-1,指导HIF-1泛素化降解(双加氧酶)希佩尔-林道综合征-多发性肿瘤54、双螺旋结构及其生物学意义答:两条多核苷酸链以相同旋转绕2.0nm;反向平行、走向、两条链之间通过A-T、C-G、两、三;外侧、内、大小沟;相邻碱基0.34,每个螺旋3.4,10,36;大多数天然DNA是双链、M13;双链DNA主链上的化学键、刚硬、柔性;分子生物学、分子遗传学的发展划时代的意义,对于DNA本身的复制机制、遗传信息的储存方式和表达,生物遗传稳定性和变异性55、生物膜的结构,各组成成分以及功能答:生物
39、膜的结构流动镶嵌模型,即中间磷脂双分子层构成基本骨架,蛋白质分子以不同的深度镶嵌、贯穿、覆盖在脂双层中和表面;主要是由蛋白质和脂质(主要是磷脂)两大类物质组成,此外还含有少量糖(糖蛋白和糖脂)以及水合金属离子等;主要功能有物质传递作用、保护作用、信息传递作用、细胞的识别等。56、中心法则和反中心法则的概念和应用答:中心法则-遗传信息的传递法则,包括DNA的复制,遗传信息从亲代传到子代;转录,DNARNA;翻译,蛋白质;DNA的自我复制可用于表观遗传的研究,甲基化、乙酰化;基因工程-转基因抗虫棉(从苏云金芽孢杆菌中获得抗虫基因的目的是为了获得杀虫蛋白)反中心法则-在少数RNA病毒中,其遗传信息储
40、存在RNA中,因此,遗传信息的流向RNA的复制;反转录子在基因编辑应用中,产生单链多拷贝卫星DNA,有研究表明,msDNA可以充当重组供体,在基因组中进行基因编辑。57、群体免疫是什么?答:人群或牲畜群体对传染的抵抗力。群体免疫水平高,表示群体中对传染具有抵抗力的动物百分比高。因为,疾病发生流行的可能性不仅取决于动物群体中有抵抗力的个体数,而且与动物群体中个体间接触的频率有关。58、前导肽和核定位序列的区别?答:前导肽是信号肽的一种,它位于成熟蛋白的N端,引导蛋白穿膜并且后面会被剪掉,其特点是,在第10位和第11位上有相邻的两个色氨酸密码子,这些密码子参与了Trp及其他操纵子的转录弱化机制;核
41、定位序列是另一种形式的信号肽,可位于多肽序列的任何部分,一般含有4-8个氨基酸,且没有专一性,作用是帮助亲核蛋白进行细胞核,在引导入核过程中,并不被切除。59、细胞自噬是什么?凋亡和自噬的区别?答:真核生物中、进化保守的、对细胞内物质进行周转的重要过程,细胞凋亡指由内外因素触发的细胞程序性死亡区别:形态上:染色体、膜;生理意义:正常、必死;高胁迫分子机制:caspase通路;mTOR60、细胞周期的特点、各周期的特点和变化、动植物细胞周期的区别答:细胞微环境影响;细胞周期检查点前期纺锤体的形成不同-中心体有关、细胞两级的原生质末期细胞质的分裂不同-细胞板l动物染色体的变化答:细胞周期-前期(染
42、色质高度螺旋形成染色体)、中期(染色体整齐地排列在赤道板上)、后期(着丝点断裂,姐妹染色单体向两级移动,分开成两条子染色体)、末期(染色体变回染色质)染色体突变-染色体结构的变异(缺失、增添、倒位、易位);数量的变异(染色体数目的增加或缺失)l细胞周期分为哪些阶段?答:细胞间期(G1、S、G2)、细胞分裂期(前、中、后、末)61、你怎么理解脂肪酸的氧化?答:氧化+氧化脂肪是非极性化合物氧化62、怎么能分离你想要的细菌?答:通过选择分离培养,首先根据待分离细菌的特殊营养要求和其对某些理化因素的抗性原理设计选择培养基,在选择培养基培养一段时间后,优势菌,再通过平板稀释法等对它进行纯培养分离。l涂布
43、法和划线法的区别和选择?涂布法多用于筛选菌株,操作相对麻烦、可以计数;划线法简单快速、不可以计数,纯化63、革兰氏阴阳细菌区别以及相关试验?答:区别:阳性菌的细胞壁含有大量肽聚糖,独含磷壁酸,不含脂多糖。少量;阴性的肽聚糖缺乏特殊肽 HYPERLINK /search.html?type=3 t /content/22/0712/10/_blank 桥相关实验:革兰氏染色l原理、注意事项、步骤64、生活中常见的细菌?举例说明答:手机上的细菌-金黄色葡萄球菌(化脓感染、肺炎、心包炎、脓毒症)、大肠杆菌(肠道外感染、急性腹泻、胃痛、呕吐、发热);马桶-尿道/妇科病病菌;电脑键盘及办公桌-链球菌(化
44、脓性炎症、猩红热)绿脓杆菌(感染)、沙眼衣原体等65、质粒提取的原理步骤?答:碱裂解法66、为什么DNA是遗传物质?答:电子书13章9题67、比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点答:分子生物学真题68、胶体金检测盐酸克伦特罗原理答:抑制、层析、硝酸纤维素膜、检测线、对照线、Clen-BSA、羊抗鼠lgG69、质谱仪、HPLC的问答答:质谱仪:分离和检测不同同位素的仪器。根据带电粒子在电磁场下能够发生偏转的原理,按物质原子、分子或分子碎片的质量差异进行分离和检测物质组成的一类仪器质谱仪能够用高能电子流轰击样品分子,使该分子失去电子成为带正电荷的分子离子、碎片离子。这些不同的离子具有不同的质
45、量,不同的质量在电磁场作用下,达到检测器的时间不同,其结果为质谱图l质谱技术:高灵敏度、准确度、精度、高通量;食品安全检测l质谱仪的结构:离子源、质量分析器、离子检测器为核心l质谱分析:将物质离子化,按离子的质荷比分离,然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法l原理:分子在真空中被电子轰击,形成离子,通过电磁场按质荷比分离l高效液相层析:利用高压、机械性能强、化学性能稳定、颗粒度小且均匀的载体等新技术的液相层析技术,高效、分辨、过柱速率l高效液相色谱:利用高压输液泵将规定的流动相泵入色谱柱,对样品进行分离测定的色谱方法。l高的主要组成部分:输液系统(储液瓶、输液泵、脱气机)、进样
46、系统(进样器)、分离系统(色谱柱、柱温箱)、检测系统(荧光、紫外)、数据处理系统(色谱分析Empower)l高的原理:溶于流动相、固定相、吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和、滞留时间不同l高的应用:食品检测中(糖-乙腈+水、等度、氨基柱、示差检测器、黄曲霉素、泛酸)l高的建立步骤:了解样品信息、确定分离目标;确定特定HPLC过程、了解样品预处理的需求-溶解、杂质;选择检测器及其方法;选择HPCL方法、初步分离,建立最佳的分离条件;分离条件优化;定量校正70、流式细胞仪答:组成-液流系统、光学系统、电子系统、数据处理系统和细胞分选系统5个部分组成。l原理-激光器照射到鞘液液流上,鞘液中所携带的细胞
47、或微球会将激光散射,同时颗粒上的荧光染料被激发l应用-生物医学研究领域:血样分析、细胞凋亡分析、细胞周期分析等71、表观遗传学的理解答:个体在遗传物质DNA序列不改变的情况下,基因的表达调控和性状发生可遗传的变化。表观遗传学的调控机制:DNA甲基化、组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化,RNA干扰,染色质重塑lDNA甲基化-通过DNA转移酶DNMT1向特定DNA序列读写框CpG岛上加甲基,下游基因沉默l染色质重塑-基因复制或转录化DNA上核小体的结构和位置的变化过程l应用-疾病治疗-比如DNA甲基化抑制剂可以阻止肿瘤的发生;去甲基化药物可以使抑癌基因和DNA修复基因的功能得以修复lCpG岛-哺
48、乳动物基因启动子及其附近存在富含双核苷酸CG的区域72、细胞生物学(最前沿的热点领域有哪些?)答:染色体DNA与蛋白质的相互作用关系-主要是非组蛋白对基因组的作用细胞增殖、分化、凋亡的相互关系及其调控细胞信号转导细胞结构体系的组装l立项的基金项目(国家自然科学基金共享服务网);数据库引文报告;重要学者的研究情况73、启动子的类型和结构答:类型:型启动子,按照使用特点-组成型启动子、组织特异性启动子(特定的细胞)、诱导启动子(特定的药物、激发或抑制其活性)基本结构:原核生物主要由4个区域组成、-35区(识别)=CAAT(-70-78)、-10区(结合)TATA盒、Pribnow=Hogness(
49、-25-35)、转录起点、-10序列和-35序列之间的距离(定位)74、质粒载体的构成答:复制必需区、选择标记基因、多克隆位点l名词解释:染色体以外、自主复制、遗传单位l载体:携带、大量扩增和表达的DNA,改造l穿梭质粒载体:含有两种宿主细胞的复制起点,能够在两个宿主中复制和存在l粘粒载体:柯丝质粒,含有DNA的COS序列和复制子l克隆载体的必要条件:自主复制的能力、多克隆位点、使用安全、携带易于筛选的标志、尽可能小l质粒载体的特点:自主复制、可转移、不相容、抗性标记75、有氧呼吸无氧呼吸的过程和能量的差别有氧呼吸的过程包括糖酵解、乙酰辅酶A的生成、柠檬酸循环、氧化磷酸化(电子传递);无氧呼吸
50、的过程包括糖酵解、发酵(细胞质基质)l有氧呼吸的概念-细胞或微生物在有氧条件下,通过多种酶的催化作用,将有机化合物彻底分解成CO2和H2O,释放能量,合成大量ATP的过程l无氧呼吸的概念-厌氧菌或者兼性厌氧菌等在缺氧条件下,以外源无机氧化物和有机物作为末端氢受体时发生的一类产能效率较低的特殊呼吸l区别-场所:有氧呼吸需要线粒体,无氧呼吸不需要分解产物:有氧呼吸的分解产物是二氧化碳和水,而无氧呼吸的分解产物为不完全氧化物能量的多少:有氧呼吸释放的能量多。76、为什么有的生物选择无氧呼吸?答:有的生物是厌氧菌,有的生物,在缺氧条件下,为了暂时维持生命活动,选择无氧呼吸77、RNA干扰答:利用双链、
51、小、高效、特异性、从而阻断lRNAi的作用机制-双链RNA、核糖核酸酶、小干扰RNA、RNA解旋酶l应用:研究基因功能、基因敲除、基因治疗、转基因沉默机制78、信号传导答:是指细胞外的信号通过与受体结合,通过连接蛋白、第二受体等一系列传导过程,最终引起细胞内的一系列生化反应l受体的类型:位置,结构特点l受体的概念l受体和配体的结合:肾上腺素受体、胰高血糖素受体、促甲状腺受体、79、细胞骨架答:细胞骨架是指普遍存在于真核细胞细胞质中的蛋白质纤维网架结构。它们具有特定的组成、分布与动态。它们在细胞的形态支持、形态建成、细胞内结构的组织与定位、细胞运动、内吞与外吐、胞内运输、细胞分裂、信息传递,以及
52、细胞转化、细胞癌变和其他病理过程中起着广泛而重要的作用。细胞骨架系统的成分包括微管、微丝、中等纤维和微梁系统,它们互相联系;但除微梁系统外,前三类纤维又各自组成相对独立的网络系统80、血糖的来源与去路来源:食物中糖的消化吸收、肝糖原的分解、其他物质的转变(甘油、乳酸等)去路:氧化分解成CO2和H2O、合成糖原、转变成脂肪、氨基酸等81、你为什么选择重庆大学?答:家重庆大学是重庆最好的学校,优秀82、你喜欢的专业课程?答:微生物学;l网上学习目录-原核生物也有细胞骨架、细菌也会慢慢变老吗、双特异性抗体l我们是由微生物细胞和人体细胞组成的超级有机体。了解微生物与我们人类有着紧密的联系有趣。l应用:
53、食品、医药、环保(土壤改良菌剂、污水处理菌剂)83、你的兴趣爱好,参加了哪些社团活动?84、你认为科研中最重要的是什么?答:耐心85、研究生期间有什么打算或规划?86、专业书籍答:薛定谔生命物理学讲义当自然赋予科技灵感:仿生学-对大自然的模仿或者是生命过程的模仿,讲述是很多动植物启发;前景,环境无害型技术(无污染技术、可循环材料、可再生能源-自清洁生物塑料-莲花)-人(机器人、埃菲尔铁塔-骨架)科学家:颜宁,结构生物学家,美国普林斯顿大学教授,与疾病相关的膜转运的蛋白、电压门控离子通道的结构和工作机制、膜蛋白调控胆固醇代谢通路的分子机制,向死而生87、你认为作为一名研究生,应该具备哪些素质?答:好奇(天真)、耐心、创新能力88、你的本科院校我没听说过,你能介绍下吗?答:位置小特色课程改革创新、配备齐全located in、geographcal location、remote、entertainment falicities、scenerysamll、a few momentsinheritance of distinctivereforming、teaching、experimen
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