单因素对甘露醇的提取检测分析(共8页)

1、武汉长江(chn jin)工商学院生物制药工程技术论文(lnwn)院： 工学院 专业(zhuny)：生物工程 年级：2010级 题目: 单因素对甘露醇的提取检测分析 学生： 罗忠 学号：1004011106 指导教师：胡佳 职称: 讲师 2013年 4 月 19 日目录(ml) TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc353801735 摘 要1 HYPERLINK l _Toc353801736 关键词1 HYPERLINK l _Toc353801737 Abstract1 HYPERLINK l _Toc353801738 Key words1 HYPERLINK

2、 l _Toc353801739 前言(qin yn)2 HYPERLINK l _Toc353801740 1 材料(cilio)与仪器2 HYPERLINK l _Toc353801741 1.1 实验主要材料和试剂2 HYPERLINK l _Toc353801742 1.2 主要仪器2 HYPERLINK l _Toc353801743 2 实验方法3 HYPERLINK l _Toc353801744 2.1 主要试剂的配制3 HYPERLINK l _Toc353801745 2.2 海带提取物中甘露醇含量测定3 HYPERLINK l _Toc353801746 2.2.1 甘露

3、醇标准溶液的制备3 HYPERLINK l _Toc353801747 2.2.2 甘露醇标准曲线的制备3 HYPERLINK l _Toc353801748 3 结果与分析3 HYPERLINK l _Toc353801749 3.1 甘露醇标准曲线3 HYPERLINK l _Toc353801750 3.2单因素实验4 HYPERLINK l _Toc353801751 3.2.1 提取温度对甘露醇的影响4 HYPERLINK l _Toc353801752 3.2.2 提取时间对甘露醇的影响4 HYPERLINK l _Toc353801753 3.2.3 液固比对甘露醇的影响4 HY

4、PERLINK l _Toc353801754 4 小结与讨论4 HYPERLINK l _Toc353801755 参考文献5 PAGE 7单因素对甘露醇的提取检测(jin c)分析摘 要：研究(ynji)采用(ciyng)水浴提取法从海带中提取甘露醇的工艺。研究了提取时间、提取温度和固液比对甘露醇提取量的影响规律。通过实验得出了海带甘露醇提取工艺的最佳参数为: 提取温度80 ，提取时间3 h，固液比为130。关键词：海带；甘露醇；提取。 The Testing Analysis on the Extraction of Mannitol from Kelp on Singly Elemen

5、t Abstract：In this paper, it reports the studies of extracting mannitol from the common kelp by water. The influences of different extracting temperature, extracting time and solid- liquid ratio were studied. The optimum parameters of extracting mannitol were obtained by or the test, extracting temp

6、erature 80 , time 3 h, solid- liquid ratio 130. Key words：kelp; mannitol; extracting前言(qin yn)海带(hidi)学名Laminaria japonica Aresch。别名(bimng)昆布、江白菜。 褐藻的一种，生长在海底的岩石上，形状像带子，含有大量的碘质，可用来提制碘、钾等。我国北部和东南沿海有大量养殖，海藻有“长寿菜”、“海上之蔬”、“含碘冠军”的美誉【1】。海带性味咸寒，具有软坚、散结、平喘、消炎等功效。海带胶质能促使体内的放射性物质随同大便排出体外，从而减少放射性物质在人体内的积聚，也减少了

7、放射性疾病的发生几率【2】。海带营养丰富，含有较多的碘质、钙质，有治疗甲状腺肿大之功效。海带具有复杂的、多方面的生物活性【3】, 特别是海带富含甘露醇。甘露醇具有利尿消肿的作用，可防治肾功能衰竭、老年性水肿、药物中毒等【4】。甘露醇与碘、钾、烟酸等协同作用，对防治动脉硬化、高血压、慢性气管炎、慢性肝炎、贫血、水肿等疾病，都有较好的效果。甘露醇在医疗上主要作为脱水药和利尿药，来治疗脑积水，降低颅内压; 用于肾功能衰竭的输液和针剂的配料，可作为防止早期肾功能不全的药物中间体和脑血管舒张剂；还可用于治疗高胆固醇血症、动脉硬化、脑膜炎、急性休克等顽固疾病和糖尿病的代用糖【5】。在食品方面，该品在糖及糖

8、醇中的吸水性最小，并具有爽口的甜味，用语麦芽糖、口香糖、年糕等食品的防粘，一般用作糕点的防粘粉。在工业上，甘露醇可用语塑料行业，制松香酸酯及人造甘油树脂、炸药、雷管等。在化学分析中用于硼的测定，生物检验上用作细菌培养剂等【6】。在医药、化工和食品行业中，海带都有广阔的应用前景。目前，世界上工业生产甘露醇主要有两种工艺【7】，一种以海带为原料，在生产海藻酸盐的同时，将提碘后的海带浸泡液，经过多次提浓、除杂、离交、蒸发浓缩、冷却结晶而得：一种以蔗糖和葡萄糖为原料，通过水解、差向异构与酶异构，然后加氢而得。利用海带提取甘露醇的工艺简单易行，在我国已有几十年历史，但由于受到原料资源、提取收率、气候条件

9、、能源消耗等限制，长期以来，其发展受到制约【8】。本试验采用水浴提取法，以海带为原料，提取分离甘露醇，研究了海带甘露醇的提取工艺【9】，旨在为海带的开发利用提供依据。1 材料与仪器1.1 实验主要材料和试剂 市售海带； 浓硫酸，分析纯，平煤开封东大化工有限公司试剂厂集团； 无水乙醇，分析纯，天津市凯通化学试剂有限公司； 高碘酸钠，分析纯，上海山浦化工有限公司； 乙醇胺，分析纯，上海山浦化工有限公司； 冰醋酸，分析纯，天津市凯通化学试剂有限公司； 甘露醇，分析纯，国药集团化学试剂有限公司； 乙酰丙酮，分析纯，天津市红岩化学试剂厂； 甲醇，分析纯，天津市凯通化学试剂有限公司。1.2 主要仪器 恒温

10、水浴锅，江苏金坛中大仪器厂； 721分光光度计，上海光谱仪器有限公司； 电子天平，上海精密(jngm)科学仪器有限公司； 电冰箱，美的集团电冰箱制造(zhzo)有限公司。2 实验(shyn)方法2.1 主要试剂的配制 配制0.015 mol/L NaIO4【9】溶液的方法：精密称取NaIO4 0.323 g 溶于250 mL浓度为0.12mol/L 的盐酸溶液中，定容。 配制Nash【10】试剂的方法：称取75.054 g 的NH4Ac固体并加蒸馏水溶解，再加1 mL冰乙酸和1 mL 乙酰丙酮，混合加水定容至500 mL。 用无水乙醇配制95% 的乙醇溶液。2.2 海带提取物中甘露醇含量测定2

11、.2.1 甘露醇标准溶液的制备精密称取甘露醇50 mg 溶于蒸馏水中，定容至500 mL，得到浓度为0.1 mg/mL 的甘露醇溶液。分别移取5 mL、10 mL、15 mL、20 mL、25 mL上述甘露醇溶液于5个50 mL 的容量瓶中，并依次编为1、2、3、4、5定容至刻度。即可得到浓度分别为0.01 mg/mL、0.02 mg/mL、0.03 mg/mL、0.04 mg/mL、0.05 mg/mL的不同浓度甘露醇溶液。2.2.2 甘露醇标准曲线的制备分别移取1 mL 不同浓度的甘露醇对照品溶液加入试管中，空白对照管中加入蒸馏水1 mL，加入0.015 mol/L NaIO4 溶液1 m

12、L。混合均匀后在室温下放置10 min，然后在每支试管中加入Nash试剂4 mL，之后在53 水浴保温15 min 使其显色，加入冰箱后即刻冷却，然后取出，至室温后用分光光度计在413 nm 处测出吸光度，以浓度（g/mL）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标绘制标准曲线，得出回归方程和R2值。 3 结果与分析3.1 甘露醇标准曲线按照甘露醇标准溶液的制备方法，进行甘露醇标准曲线的制备。以浓度（g/mL）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标绘制标准曲线如下图所示，并得出回归方程和R2值。 Y=0.009x+0.0068 R2=0.9983表1 甘露醇标准曲线的实验数据及标准曲线浓度(ug/mL)01020

13、304050吸光度A00.1000.1860.2820.3720.4453.2单因素(yn s)实验3.2.1 提取(tq)温度对甘露醇的影响将粉碎(fn su)的海带在液固比为20时回流2 h，考察50 ，60 ，70 ，80 ，90 五个回流温度下对甘露醇的影响见表2。表2 提取温度对甘露醇的影响温度（）5060708090A4130.5070.5320.5560.6310.573甘露醇得率(%)0.1390.1460.1530.1730.157 由表1可知，当温度小于80 时，提取量由温度上升而增加，当温度达到80 时出现最大值，当温度大于80 时，提取量随温度上升而下降，为了提高效率，

14、提取温度应控制为80 。3.2.2 提取时间对甘露醇的影响 将粉碎的海带在沸点下按照液固比为20进行回流，选取0.5 h，1 h，2 h，3 h，4 h，5个回流时间，考察不同提取时间对甘露醇的影响见表3。表3 提取时间对甘露醇的影响时间（h）0.51234A4130.2350.3690.5330.7350.740甘露醇浓度（g/mL）0.06340.1010.1460.2020.204 由表2可知，随着提取时间的延长，提取量也在增加，当提取时间大于3 h时提取量趋于稳定，这是因为在3 h 的时间中, 原料海带中的甘露醇几乎全部溶出, 再延长提取时间, 甘露醇的提取量已没有多大变化, 为了提高

15、效率, 提取时间应控制为3 h左右。3.2.3 液固比对甘露醇的影响将粉碎的海带在沸点下回流2 h，选择的液固比分别为10，20，30，40，50，考察不同液固比对甘露醇的影响见表4。表4 固液比对甘露醇的影响固液比1020304050A413提取物过于固化，不测吸光度 0.533 0.6020.5120.452甘露醇浓度（g/mL） 0.1460.1650.1400.124由表4可知，固液比为10时，有一定的提取物，但离心液较少，不利于提取工艺的效率，未测定(cdng)结果。随着水量的增大，提取量不断上升，这是因为加水量越大，提取出的甘露醇越易溶解。当固液比为30 的时候。达到最大值。过多的

16、加水量稀释甘露醇浓度。所以(suy)固液比控制在30为宜。4 小结(xioji)与讨论 本试验采用水浴提取法，以海带为原料，提取分离甘露醇，研究了海带甘露醇的提取工艺。提取温度、提取时间和固液比是影响海带甘露醇提取的主要因素提取温度为80 ,提取时间为3 h，固液比为1:30时使甘露醇的得率较高。本实验旨在进行单因素对甘露醇提取的影响，如果条件允许，建议通过正交设计实验进行多因素综合考察，以得到其最佳的提取工艺，为生产研究提供必要的实验数据。 参考文献1 夏仙兵，蔡邦肖.海洋技术.化工学报J，2010,61（11）：7-102 武文洁.从海带乙醇预处理液中提取纯化甘露醇的研究J.食品研究与开发，2006,（4）:16-183 黄宗国. 中国海洋生物种类与分布M. 北京: 海洋出版社, 1994: 201.4 董公芝，王鹏.甘露醇治疗脑血管病并发急性肾衰竭临床分析J.实用医技杂志，2008，15（33）：4776-4777.5 吴国荃, 聂美丽, 罗书凯. 我国甘露醇的生产状况与发展趋势J. 化工技术经济, 20