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文档简介
1、土壤活性有机质测定方法土壤活性有机质分类:由于研究角度和方法有所不同,活性 有机质产生了许多的称谓,如易氧化有机质(LOM);生物量有机 质(MBOM);溶解有机质(DOM);轻组有机质(LFOM);颗粒有机 质(POM)等。每种指标的测定方法如下:一易氧化有机质(LOM):土壤与氧化剂作用后,易被氧化、不稳定的有机质称作LOM。 目前常用的氧化剂有两种:K2CrO7与KMnO4。KMnO4氧化法:(此方法较为常用)称取过100目筛,约含15mg碳的土壤样品(如:有机碳含 量为15g/kg,则称取1g 土壤样品)于50 mL塑料旋盖的离心管 中;加入25mL, 333mmol/L高锰酸钾溶液,
2、振荡1h,然后在时 速2000 rpm下离心5 min,将上清液用去离子水以1 : 250稀释, 在分光光度计565 nm下测定稀释样品的吸光率,由不加土壤的 空白与土壤样品的吸光率之差,计算出高锰酸钾浓度的变化,并 进而计算出氧化的碳量(氧化过程中1 mmolKMnO4-消耗0.75 mmol 或9 mg碳)。KMnO氧化法:(此法是在测定全量有机质基础上降低某些反 4应条件,衍生出的测定方法)1、水合热法:称取磨细(过0.25 mm筛)风干土 1.50 g,放 入500 mL三角瓶中,准确加入0.5 mol/L KfrO水溶液10.0mL, 轻轻转动,使土粒分散。用量筒将20 mL浓HSO
3、迅速直接注入土24壤悬浊液,立即小心地转动三角瓶,使土壤与试剂充分混匀1 min。把三角瓶放在石棉网上30 min,然后注入水约200 mL,加 34滴邻菲锣啉指示剂,用0.25 mol/L FeSO4标准溶液滴定过量 的 KfrO7。2、0.1 mol/L K2CrO71 : 3H2SO4130C氧化法:在油浴温度 为 130140C时将 0.5 g 风干土与 0.1 mol/L KfrOj1: 3H2SO410.0 mL 共煮 5 min,冷却后加入30 mL 水,用 0.1 mol/L FeSO4 标准溶液滴定过量的K2CrO7二生物量有机质(MBOM):生物量有机质是指能被土壤微生物分
4、解利用的部分有机质。 即微生物量碳、微生物量氮。氯仿熏蒸法测定:(此法较为简单,但氯仿为有毒物质,操 作复杂)前处理步骤:将新鲜的土样品含水量调节至田间含水量 的30%50%, 25C下密封预培养710d,以保持土壤均匀和 所得结果的可比性。然后迅速测定土壤微生物量碳、氮,或在低 温4C下保存。采用氯仿熏蒸浸提方法测定土壤微生物量碳、氮, 即称取预处理的湿润土壤每份25.0g(烘干基重)放入50mL烧杯 中,将其置于底部有少量NaOH、少量水(约200mL)和去乙醇氯仿 的真空干燥器中,抽真空后保持氯仿沸腾35 min,然后,将 干燥器移置在黑暗条件下25C熏蒸土壤24 h,出氯仿(倒回瓶中
5、重复使用),除尽干燥器底部的碱,再用真空泵反复抽气,直到 闻不到土壤有氯仿味为止。将全部土壤转入250 ml三角瓶中, 加入约100mL0. 5mol/LK2SO4提取液(土水比为1: 4),震荡半小 时(200转/分)后,迅速用中速滤纸过滤,滤液立即测定或放入 -15C的冰柜中保存。在熏蒸开始的同时,另取等量的土样,直 接用0.5mo1/LK2SO4用液浸提,同时做空白,每份土壤重复三次。微生物量碳测定:吸取上述提取液10 ml于150 ml消煮管(内 径24mm)中,加入01 mol/LK2S04-H2SO4溶液(史S04浓度为12 mol/L)10 ml,放入少量抗爆沸物质,摇匀后置于1
6、70-180C的 磷酸浴中煮沸10 min,冷却后将溶液转移到150ml三角瓶中, 加入2滴邻菲罗啉指示剂,用0.05mol/LFeSO4滴定至终点(橙- 灰绿-浅绿-砖红)。土壤微生物量氮测定:取15.0 ml滤液于250 ml消化管中, 加入0.19 mol/L CuSO4溶液0.3 ml、分析纯浓硫酸5 ml、及少 量防瀑沸的颗粒物,混合液消化变清后再回流35 h,用凯氏定 氮仪蒸馏,0.02 mol/L HCl标准溶液滴定。计算公式为:SMBC二EC/kEC,SMBN二EN/kEN,式中 Ec=熏 蒸土壤浸提测定的全碳一不熏蒸土壤浸提测定的全碳,EN=熏蒸 土壤浸提测定的全氮一不熏蒸土
7、壤浸提测定的全氮,kEc和kEN 分别为所浸提出来的微生物量碳、氮占土壤微生物量碳、氮的 比例,即浸提效率,kEc取值0.38,kEN为0.45。基质诱导呼吸法(SIR):(此法对设备要求较高)将两份潮湿 土样(相当于30 g烘干土)称重后放入玻璃瓶中,加入适量葡 萄糖,在室温下培养30 min后将该瓶密封贮于25C下培养2 h 后用注射器抽取5ml气体,采用气象色谱仪测定CO2浓度。此法 测量的微生物量碳,由下式计算:MBC=5.11 + 16.18Y式中,Y为基质诱导呼吸消耗0勺量(UL)可溶性有机质(DOM):(可溶解在水中的有机质,也是 较为常用的方法)称土样(相当于3 g烘干土)移到
8、50 mL聚丙烯离心管中, 加30 mL蒸馏水,转速为30r/min,温度为20C下浸提30 min, 后以3500 r/min离心20min,将上清液过0.45 mm滤膜,此组 分被称为水溶性有机碳(DOC)。另取30 mL蒸馏水加到离心管中,振荡10 min,以使土壤完全分散,后放到80C的热水浴浸提16 ho浸提后,振荡10 s, 在3500 r/min离心20 min。上清液过0.45 u m滤膜,此组分 为热水浸提有机碳(HDOC)。所有浸提物用TOC仪进行分析。轻组有机质(LFOM):(此法采用的是物理方法来分析 有机质活性)称取过2 mm筛的风干土 15g加入到装有30mL浓度为1.70 g cm-3NaI溶液的离心管中,振荡30 s,然后以4500 r/min的 速度离心15 min,用虹吸法将悬浮液移出过滤,离心-虹吸过程 至少重复4次,直到没有任何悬浮物存在。滤纸上的悬浮物用蒸 馏水冲洗,60C干燥48 h,称重,并分析碳和氮含量。颗粒有机碳(PO
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