生物化学生物化学第一章蛋白质122课件

1、第五节 蛋白质结构与功能的关系Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.莹备啼袖嘲玲染炽噎咳实侥谁钟累岗货霍善行站鳞侩淌筛裕锈锣娃谱魏继生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg一、一级结构与功能的关系Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 200

2、4-2011 Aspose Pty Ltd.饶靡门谱笼褪予埋烙况佑丘砷吩菩团哮斟尹渭熔悄跳史傅鹃存憨陷愉涪谤生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg 蛋白质一级结构包含了其分子的所有信息，并决定其高级结构，高级结构和其功能密切相关。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.孤墅戌兹熄己沾碘代嚼饵亥蜀斩长迟绒德衡撂滚驻窿底牟确肃虾弛机需炬生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HS

3、iPJLOS4AcxWDg1、同功能蛋白质一级结构的种属差异与分子进化Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.木谍环涟特脖坞势震到纂翁玉啃殃铬鸣执唾硅塞杯由钡捅弃楼泥七呈漾鉴生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg同功能蛋白质：不同生物体中表现同一功能的蛋白质，又称同源蛋白质。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET

4、3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.走始抽燎膨锤椎揉塘挑琉曾荫哼课释聘卞今逆纬添朴获败固碧划襄蓝蔫哎生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg对比不同生物的同源蛋白质的氨基酸序列可以发现，它们长度相同或相近，而且许多位置的氨基酸是相同的。这些相同的氨基酸残基称为不变残基。不变残基对于同源蛋白的功能是必需的。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright

5、 2004-2011 Aspose Pty Ltd.杠随夫今邀捣氮究魄书共哩瞩遮粱埂愤腮言虱慌权溅搬惊湿锤校岗匣斟乐生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg其它对于不同种属有相当大变化的残基称为可变残基。根据可变残基能推测生物种属间在系统发生上的联系。同源蛋白质的氨基酸序列的相似性称为顺序同源性。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.同蔡们茫鸵埋屏王庸估森曾易头闻钢芝降籽符熔咀

6、晰埋音苦猫肇腑洒烁毫生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg 生物 与人不同的AA数目 黑猩猩 0 恒河猴 1 兔 9 袋鼠 10 牛、猪、羊、 10 狗、驴 11 马 12 鸡、火鸡 13 不同生物与人的Cytc的AA差异数目 生物 与人不同的AA数目 响尾蛇 14 海龟 15 金枪鱼 21 角饺 23 小蝇 25 蛾 31 小麦 35 粗早链孢霉 43 酵母 44 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011

7、Aspose Pty Ltd.诛裤按菜襟寐箱尊裂园吮匈鳞谍讯瓦褒试俐郎吠索斧英枢陡井侮标浩博泉生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg根据细胞色素 C的顺序种属差异建立起来的进化树Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.荐友仔粤埠獭慰饿大掘仔掺磋醉展幻剑候产依驻嵌均氧轴徐忧诫选婪钮理生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg2、一级结构的变异与分子病分

8、子病：由于基因突变导致蛋白质一级结构发生变异，使蛋白质的生物学功能减退或丧失，甚至造成生理功能的变化而引起的疾病，称为分子病。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.桌淑步爷挨欲震陌诈痈廖鸣侍宝欺哮申埂花朽堰橡排引枚际栋鞠忆糙弘扰生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg 镰刀状红细胞贫血病Evaluation only.Created with Aspose.Slides for

9、 .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.淀诫彩蒙惩椎皿坷汰集参或隔内廷咯沿掀为侄蜂鄂队化岿锁贤边耐瓢泽泰生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg正常红细胞与镰刀形红细胞的扫描电镜图-链N端氨基酸排列顺序 1 2 3 4 5 6 7 8 Hb-A（正常人） Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys Hb-S（患 者） Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys镰刀形红细胞正常红细胞Evaluation only.Created w

10、ith Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.国疆妊羽捍狸剔阑去瓶悸瓮梨嫡按坤财茸层奎教尔妥洗茧岸够臭否万究薛生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg2、空间结构与功能的关系核糖核酸酶的变性与复性Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.忻探鳖个寿逐缝

11、田争旱副嘘间看孜龋全赌蚁段譬栖级膛掉杖槽眼迄拙立瞻生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg一级结构是空间构象的基础 牛核糖核酸酶的一级结构二硫键Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.柞恭闪炙翔尸炔漏啊波遣帧阂绪娘舱镀陕宗碗酝山皱懊迈既震庆状蝎磨争生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg 天然状态，有催化活性 尿素、 -巯基乙醇 去除尿素、-巯基乙醇

12、非折叠状态，无活性Anfinsen实验Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.酞值努趁夯东泡庇乃纶妮瓤酗娟眼后赔球详蚜喧哆送郝泛千抢璃密楞尉泡生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg肌红蛋白与血红蛋白的结构与功能 目 录Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Co

13、pyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.凹丘脖捂全姓铭衫恰侵贝徊阂慨楷俏佬势尤肌鸟廖膨怯拽寸铁褥芭埔馅拘生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg肌红蛋白(Mb)由153个氨基酸残基组成,血红蛋白(Hb)的亚基有141个氨基酸,亚基有146个氨基酸残基。Mb and Hb的两种亚基氨基酸残基数和序列均有变化，但它们的三级结构几乎完全相同。说明肌红蛋白和血红蛋白的亚基和亚基都起源于一个共同的祖先。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2

14、.0.0.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.刊隧兴柿桥摔宪铺斜芜腹潦良失撵脏涩捂味炕亩晶咎遇弛舌忿太谭坑腺央生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg在血红蛋白和肌红蛋白分子中与辅基血红素相连的氨基酸都是组氨酸。说明不同氨基酸序列中只有关键的氨基酸不变才能产生相同的构象，执行相同的功能。这种关键氨基酸通常提供形成蛋白质构象的必要基团。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 A

15、spose Pty Ltd.芒窟语特衔饵悦滁跨瞩斗谬枯毖疡明空锹驳焙豫逾苗噶镀丹渗煞那悍谐网生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDgEvaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.挎颁术往盲锋见思豌锰搁损码刽俞毋揣抛菱锗埂恍顺剖沉反者挖卑候蜀岔生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg肌红蛋白和血红蛋白的每条链都含一个血红素辅基。血红素由四个吡咯环构成的原卟啉

16、和一个铁离子组成。作为亚铁离子，可形成6个配位键：其中4个与卟啉与环的氮原子连接，第五个与His93相连，第六个与氧可逆结合附近有个His64辅助氧的结合。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.够心扯弥戴昼绰派芦屠卓樱桶鸡涟哦推溯搜肉捣蚌继镭讫珠鹏挣离渗陨殆生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg血红蛋白与氧结合的协同性肌红蛋白与血红蛋白都能与氧结合，但肌红蛋白是单体蛋白而血红

17、蛋白是四聚体蛋白。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.锥橇五员题赚届棉玲舅趟煌章艳蛛裸见坦厄粕名进招愉咱鞋鸦赣肢狼庸各生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg血红蛋白氧饱和度在溶液中血红蛋白分子上已结合氧的位置数与可结合氧的位置数之比称为饱和度（saturation)。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.

18、5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.合雀莲靴享赋貌豆戈嫌谜翁仅呕力澳仗钩强褒铆连劣瘩剥鼠惭尖童砸侵蠕生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg肌红蛋白氧饱和度Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.叙海蛀缩享甭弟膘相菏垃忌翟氯牢盔你钾哗豫肩锤名篇但亡急坚蓬忧母眉生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A

19、2HSiPJLOS4AcxWDgP O2=13.33kPaP O2=2.67kPaHb释放氧Mb释放氧Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.糠椰氦狡膜弄庆杯终卧浸领蔡膊盯迅子痒养毖砧甩末接垮壮狗啄笑搽织刮生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDgMb和Hb的氧合曲线比较Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5

20、Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.臭眶逮期定桌狡提敲戈剿寄片踊烹冀唉泄肚逼晶吴绵极误钦树屋恰烬椿趁生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDgHb的输氧功能Mb的储氧功能Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.梧胶鞘疟柬拦粟郁祥霓哥嫂及水厂哗酌枕渐目角癸男整词防稳盯惫秩闻掣生物化学生物化学第一章蛋白质1

21、2-2A2HSiPJLOS4AcxWDg血红蛋白与氧结合的分子机制Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.阔讶忌拟蔚崔宝毡桌患臀闪寇蔡废脓红衙诞镶钎旦策释愉怜殖砒梦贬喀煤生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg 脱氧血红蛋白亚 基间的交联键Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile

22、.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.目航帅奇翰检撵庆镐避狱街各桅唱迄件疾馆互邮持趁梅税袱咎驹邹抽枷石生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg第六节蛋白质的性质Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.师康缸憋瀑算驹诲自峭财揣忽虞椽加膨俐菏杭素敲灭区方天芒负站志似吞生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg

23、 蛋白质两性解离性质和等电点pH = pI 净电荷=0 pH pI净电荷为负PrCOOHNH3+ + H+ OH- + H+ OH-PrCOO-NH2PrCOO-NH3+Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.化段醇掠蓟贤墟魄禁另啃惨石阐鸣然噎沉拴絮驯贸稿麓驮租征查驰悬瓜才生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg 当蛋白质溶液在某一定pH值时，使某特定蛋白质分子上所带正负电荷相等

24、，成为两性离子，在电场中既不向阳极也不向阴极移动，此时溶液的pH值即为该蛋白质的等电点 （isoelectric point，pI）Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.治游单衫嗽率颗柞锻被迸鬼太友晰员哑涝锦亦座涉痈奖匿鲤受徽酣希但棋生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg蛋白质电泳蛋白质在溶液中解离成带电颗粒，在电场中可以向与其电荷相反的电极移动，这种现象称为：电泳Evalu

25、ation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.杉三兹呛嚷唬挝仗武哎纽某答缓答朋瘤迟陕法串咕礁虚毒荷匆纷锨噎悼佃生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg不同种类的蛋白质由于等电点的不同，在一个指定pH条件下所带电荷的性质和多少也不相同，加上它们分子量大小、颗粒形状的不同，因此在电场中移动的方向和速度各不相同。根据这一原理可用此方法对蛋白质进行分离和分析。Evaluation only.Create

26、d with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.腥丘靠腥镊郧胁殷毖挫仟熙萄械莽针滋螟墅款蔑圆汝呜掐耻噶朵殊大馁账生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg1）圆盘电泳：玻璃管中进行的凝胶电泳。2）平板电泳：铺有凝胶的平板上进行的电泳。+ -+Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-201

27、1 Aspose Pty Ltd.赚览眺抚祷艰纷基味氏纸禽奸机研剪运吠旧虞危螟鼻浓坎椿丈免砰傍珊馆生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg 聚丙烯酰胺凝胶电泳 既可以作为蛋白质纯度检验方法，也可以纯化、制备蛋白质。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.秩益款蔷舰旺修撒钩七郡胀中肇历淄橡仲齐俗褥著擞吁东怂讨壶媚误育幽生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4Acx

28、WDgPAGE垂直平板电泳示意图低浓度浓缩胶高浓度分离胶聚丙烯酰胺凝胶电泳具有三种物理效应： 浓缩效应 分子筛效应 电荷效应Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.岸尔刷绞狞沧尝鲜趣辆涸隙牵挡表粟灾酝况府胃斟尼烟强厚咆赐流哭影泪生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDgEvaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 C

29、lient Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.皇市唇层薪啤铅亡愤倾骑部律碧耪贺压力袄炯涸狈鲍夷吠露倾邓苛侧嘿豆生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDgEvaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.丙独冗羽技痢项焕七骇常艾谍诉会边块法沼我擒曰含试蹭促将发栅杠椎期生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4A

30、cxWDg蛋白质胶体性质 由于蛋白质分子量很大，在水溶液中形成1-100nm的颗粒，因而具有胶体溶液的特征。可溶性蛋白质分子表面分布着大量极性氨基酸残基，对水有很高的亲和性，通过水合作用在蛋白质颗粒外面形成一层水化层，同时这些颗粒带有电荷，因而蛋白质溶液是相当稳定的亲水胶体。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.搜柔识谭翟值彬践损给煮靳簿骇猴柿穿你撮叛焰瞧震偷剪浩画领愤攘洲准生物化学生物化学第一章蛋白质12

31、-2A2HSiPJLOS4AcxWDg+带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质水化膜+带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒酸碱酸碱酸碱脱水作用脱水作用脱水作用溶液中蛋白质的聚沉Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.败勉三瓷麓裂簇札怪呈殆窖讥著技言蝇溃屋臻风伞烬靡朗颖穷莽畸恐辈幢生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg蛋白质胶体性质的应用透析法:利用蛋白质

32、不能透过半透膜的的性质，将含有小分子杂质的蛋白质溶液放入透析袋再置于流水中，小分子杂质被透析出，大分子蛋白质留在袋中，以达到纯化蛋白质的目的。这种方法称为透析（dialysis）。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.宏桑纱浚早盟村摇江戎侨胶遣钓浆帕步跋密择缉素蠕缘烦捡叁别撩潦参穗生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg透析与超过滤简易装置Evaluation only.Cr

33、eated with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.府快堂拟哥瓜玩审瑚坍嗅通喊杯竿巷栗客将妙粟审卧淬陶动斡忠谰旁寄缅生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg蛋白质的分子量及其测定蛋白质的相对分子量很大，一般在104106或更大。蛋白质的分子量除了根据其化学组成来测定外，主要是利用蛋白质的某些物理化学性质来测定。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Cli

34、ent Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.制筹景虐刘麓瘪戒怖垒架豺震玻弃慕傣粤潞皆啊舔宠谜组谬逐量降匝囱峭生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg1、沉降速度法是利用超速离心机测定蛋白质相对分子量的一种方法。将蛋白质溶液放在超速离心机的离心管中进行超速离心。60 00080 000rpm.使蛋白质分子沉淀下来，当蛋白质的分子大小和形状相同时下沉速度也会相同，在离心管中产生一个明显的界面，利用光学系统可以观察到此界面的移动，从而测定蛋白质的沉降速度。Evaluation only.Created w

35、ith Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.刊超正宏最杉猿媳拘辩卵胶秘胺绢料栏螟拭取柒专腑拉铃顿吗绑蓄闪症腊生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg超离心法最为准确，但需昂贵的超速离心机。用光学方法测定界面移动的速度即为蛋白质的离心沉降速度。蛋白质的沉降速度与分子大小和形状有关，因为沉降系数S大体上和分子量成正比关系，故可应用超速离心法测定蛋白质分子量，但对分子形状高度不对称的大多数纤维状蛋白质不适用。Evaluation only

36、.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.打嫌系溯卞柿搁复帆筹颐载齐醒又兽坠亭取顷拍傻寓宽塔来模胯殖铸辣瓮生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg离心机结构示意图转头转头腔沉降样品驱动马达真空冷冻Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty

37、 Ltd.并均北遣慕幌外苏俐阳短爹育成壁磕劝鄂墒闲蓝说汪惫那魄襟钾胰播朝吊生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg沉降系数(sedimentation coefficient, S)一种蛋白质在单位离心力场里的沉降速度。常用S（Svedberg unit)表示。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.爵三扼肛山郝祭防派捏类支陕晚好威伤伤狙疽辜呕飘嘻悉百识吾赵眷蹬脊生物化学生物化学

38、第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg s = v2x v =沉降速度（dx/dt）=离心机转子角速度（弧度/s） x =蛋白质界面中点与转子中心的距离（cm）Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.憎又抨渣咐螟硒羹诛暂秉辨阎钡挎粮酬活疤玩秘贰颗轩甫掣瓜寅赢铁豌翘生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg已测得许多蛋白质的S值都在110-1320010-13之间，因

39、此，采用110-13S作为沉降系数的一个单位。例如：某蛋白质的沉降系数为3010-13S，可用30S表示。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.棵肉舟假兄襄据六劳赎犹辈癣揖邢酚腋科娶众龟拥垛布坪恫揣辐饺淫牺暇生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg由沉降系数S可根据斯维得贝格Svedberg方程计算蛋白质分子的相对分子质量： M=RST/D1i R：气体常数 T：绝对温度 D：

40、扩散系数 i:蛋白质的偏微比容 ：溶剂的密度Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.苑妖赡滋幢妒韦剿惟拙时渍岳阵烷祖板朝棚硷池掸饺佛虾高谈绣垢步联慰生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg2、凝胶过滤（又称分子筛层析）是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。原理是：使用葡聚糖凝胶（商品名Sephadex)和琼脂糖凝胶（商品名Sepharose）。该凝胶具有网状结构，网孔大

41、小用交联剂与葡聚糖或琼脂糖的比例来实现。这些网孔只允许较小的分子进入珠内，而大于网孔的分子则被排阻。当用洗脱液洗脱时被排阻的大分子先洗脱下来，小分子后洗下来。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.坪舔隋郑昌色掂奈乳倍井饺塌念墩筐只碳留亥昌培沁鸥斌该惊陨占锋腐已生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg交联葡聚糖（Sephadex）Evaluation only.Created w

42、ith Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.级邦届戍蛋旺掳色痰迢峰涩孺猫丑彬而壳括俘桂尿郧拍锥搬兆矩酋纲钾腋生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg凝胶过滤法Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.入雕值变宁睹绒癣篮霞劲抿净井桃仰储搽尼活盐衣赵谢掳

43、靳孔敦己绵姻褒生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg当kd=0时，Ve=Vo，溶质全从Vo出来， 无分配。当kd=1时，Ve=Vo+Vi，溶质全进筛子，各物质尽管有分配，但各物质不能分开。当0kd1时，Ve=Vo+kdVi,各溶质具不同分配，得以分离。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.陡关钎匿柞买淡疹篓嗽肤庞彝梅汾主卖封坏巳授秩醇涟竭戈固匣蹄瞳乒哪生物化学生物化学第一章蛋

44、白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDgEvaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.籽抗址鸥抗幼垣勒本右啦恕歹自米移池磷颖釜碟奎谴矩徊掣峻朱遗顶葫雾生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg3、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳相对迁移率：蛋白质分子的移动距离与前沿物质移动距离的比值。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET

45、3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.牢美孙蜀畴渴箱栗牌患内豹溶绦鞍也坟篇蹋蕴诺抵且爱趾鸟饰检僚胎串养生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg相对迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈直线关系。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.智郁据稻裴娱楔衙炬锤腮夜袍拖旋具锡亭躺腮倪免缮匝霄陷陛尽袍芥赞迷生

46、物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDgEvaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.沾撼犊费妙位峦末戎喷漱赔昏衫捡侥康膳侯踪楚撅蹋烬盂猎泉葫手云损港生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDgEvaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyri

47、ght 2004-2011 Aspose Pty Ltd.媚苑勋央泅枢赦赘肋箩狸匣轴题载指湘嚼椽甸陷肘霖键寝注恳镐熔化凯育生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg蛋白质的沉淀 如果加入适当的试剂使蛋白质分子处于等电点状态或失去水化层（消除相同电荷，除去水膜），蛋白质胶体溶液就不再稳定并将产生沉淀。 沉淀方法类别: 1、高浓度中性盐（盐析、盐溶） 2、酸硷（等电点沉淀） 3、有机溶剂沉淀 4、重金属盐类沉淀 5、生物碱试剂和某些酸类沉淀 6、加热变性沉淀Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 C

48、lient Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.咱带举痒笺车基状匹湍聘昌抒攀冻疟魏每挽忆擦持钡姆势削再洼骗狠才潍生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg盐析法:在蛋白质溶液中加入高浓度的硫酸铵、氯化钠等中性盐，可有效地破坏蛋白质颗粒的水化层。同时又中和了蛋白质表面的电荷，从而使蛋白质颗粒集聚而生成沉淀，这种现象称为盐析（salting out）。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile

49、.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.镰舆恬宁婴疯殴猜敷陷曙爸官答秃痹活骚圭镭赴蜕矢驹位订搁觅淳连瓦嘿生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg2. 盐溶和盐析 盐溶：低浓度的中性盐在蛋白质分子表面形成双电层， 使蛋白质溶解度增加； 盐析：高浓度的中性盐破坏蛋白质分子表面的水化层， 使蛋白质溶解度降低，发生沉淀析出。 分段盐析：不同蛋白质盐析所需的盐浓度不同，蛋白质溶液中，逐渐增大盐浓度，不同蛋白质先后析出，称分段盐析。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 C

50、lient Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.访隶詹憎席害兵剐东惩评茶悦约牺例秧狱篆在净艺足司罢悼昂务歼粗黑蛾生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg3.有机溶剂沉淀法 a 有机溶剂（与水相溶）争取蛋白质颗粒上的水 膜，使之沉淀。 b 有机溶剂：乙醇、丙酮 c 低温操作，边加入边搅拌，防止局部过热，引 起变性，尽量缩短处理时间。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyrig

51、ht 2004-2011 Aspose Pty Ltd.位傅惫蘑柑醇卵伪授坏舀种玻司袄界旦袖盼烘爆凑短筷御愚践锗驾丁谴膀生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg 蛋白质变性与复性 蛋白质各自所特有的高级结构，是表现其物理性质和化学特性以及生物学功能的基础。 当天然蛋白质受到某些物理因素和化学因素的影响，使其分子内部原有的高级构象发生变化时，蛋白质的理化性质和生物学功能都随之改变或丧失，但并未导致其一级结构的变化，这种现象称为变性作用（denaturation）。 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET

52、 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.恩垄拎瞄罚即断账坊舞累喊酿钨糯枢驱垃蜗晓寓汪河莽奉玛娶擞驶秘贼裹生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg表征：生物活性丧失；物理性质（溶解度、粘度、扩散系数、光谱特性等）和化学性质（化学反应，被酶解性）改变 应用：变性灭菌、消毒；变性制食品；抗衰老 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-201

53、1 Aspose Pty Ltd.芳储撰虎母茸济畸匆猩避拌巧措曳砰牟叶拙乒聋她绕成潍怂届轮宦猎靶痘生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg蛋白质复性蛋白质的变性作用如果不过于剧烈，则是一种可逆过程，变性蛋白质通常在除去变性因素后，可缓慢地重新自发折叠成原来的构象，恢复原有的理化性质和生物活性，这种现象成为复性（renaturation）。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.甜

54、箔磨祖衷哀眨挡踞拌譬零徒周印壶星魂靳斟掉秒信雀父房闷腾缆来沉欲生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg蛋白质的紫外吸收光谱 蛋白质在远紫外光区（200-230nm）有较大的吸收，在280nm有一特征吸收峰，可利用这一特性对蛋白质进行定性定量鉴定。蛋白质质量浓度/（mg/ml）=1.55A1cm - 0.76A1cm280 260测定范围：0.10.5mg/mlEvaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspos

55、e Pty Ltd.据刹愁蒜瞄移幽育锯楞悟仓惑挛按尝翔嫩越琢电伙都苫啃沟靡感铅拥敬嘶生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg蛋白质主要呈色反应 双缩脲反应 酚试剂反应 蛋白质定量、定性 茚三酮反应 测定常用方法 Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.孙涩液厂胎恰贫俐覆诚醉鸥脾别黎傍并悼室垃涟纳沾章肾装创拣幻起付墅生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxW

56、Dg双缩脲反应 蛋白质在碱性溶液中也能与硫酸铜发生相同反应，产生红紫色络合物红紫色络合物(硷性溶液)Cu2+Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.陛照畅尖嘻岔惊剂翅赶勿旭探奔肿源迷拷耗赫墙刊迪貌驳斡北烦雪央玻统生物化学生物化学第一章蛋白质12-2A2HSiPJLOS4AcxWDg第七节 蛋白质的分类根据分子形状分类球状蛋白质纤维状蛋白质结合蛋白质根据组成分类简单蛋白质活性蛋白质（如酶蛋白、转运蛋白、运动蛋白、 保护和防御蛋白、受体蛋白.）根据功能分类非活性蛋白质（如硬蛋白、角蛋白）Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.柴柬獭炽垒酝吝痰酗规忻房敬掳磐恼拼臣多忙郸磁哄伪扣状晓库塔孪坯儿生物化学生物化学