蛋白结合率相关知识

1、蛋白结合率相关知识血浆蛋白结合率：药物与血浆蛋白结合的程度，即血液中与蛋白结合的药物占总药量的百分数。血浆蛋白结合率为可逆性疏松结合，结合型药物分子量增大，不能跨膜转运、代谢和排泄，并暂时失去药理活性，某些药物可在血浆蛋白结合部位上发生竞争排挤现象。药物分子与血浆蛋白结合的特点(和药物与受体蛋白结合情况相似)：具有饱和性与可逆性、结合物无活性、有竞争置换现象。药物进入循环后，有两种形式：结合型药物：药物与血浆蛋白结合。特点：(1)暂时失去药理活性。(2)体积增大，不易通过血管壁，暂时“储存”于血液中。意义：结合型药物起着类似药库的作用。药物进入相应组织后也与组织蛋白发生结合，也起到药库作用，影

2、响药物作用和作用维持时间长短，一般蛋白结合率高的药物体内消除慢，作用维持时间长。游离型药物：未被血浆蛋白结合的药物。特点：能透过生物膜，进入到相应的组织或靶器官，产生效应或进行代谢与排泄。药物与血浆蛋白结合方式：物主要酸性药物与白蛋白结合：华法林、非留体抗炎药、磺胺类药与血浆白蛋白结合，三环类抗抑郁药、氯丙嗪也与白蛋白结合。碱性药物与a1-糖蛋白结合：B-糖蛋白和a-酸性糖蛋白虽然量比白蛋白少很多，但在癌症、关节炎、心肌梗死等疾病中可增高，能与奎宁结合。特点：可逆性药物与血浆蛋白的结合是可逆的，极少数是共价结合（如烷化剂）。药物在血液中转运时，结合型与游离型药物快速达到动态平衡。游离型药物一透

3、过生物膜一血液中游离型药物浓度降低一结合型药物，释出游离型药物。饱和性血浆中蛋白有一定的量，与药物的结合有限，因此，药物与血浆蛋白结合具有饱和性。当药物浓度大于血浆蛋白结合能力时一饱和一游离型药物急剧增加一毒性反应。某些病理情况下，血浆蛋白过少（如肝硬化、慢性肾炎）、变质（如尿毒症）一药物与血浆蛋白结合减少一毒性反应。有些药物在老年人中呈现较强的药理效应，与老年人的血浆蛋白减少有关。竞争性两种药物T竞争结合同一蛋白T置换T游离型药物浓度增加T导致中毒。女口：保泰松T结合型双香豆素T游离型T浓度增加T出血倾向。与内源性代谢物竞争与血浆蛋白结合，如磺胺药T置换胆红素T新生儿核黄疸症。此外，注射白蛋

4、白可与药物结合而影响疗效。血浆蛋白与药物结合时，血浆蛋白在体内的各种作用暂时消失，但是与药物分离之后，血浆蛋白各种性质基本不变，继续发挥原来的作用。血浆蛋白结合率的测定、实验目的测定磺胺嘧啶钠在不同动物体内的血浆蛋白结合率。2、实验原理将蛋白置于一个隔室内，用半透膜将此隔室与另一隔室隔开。蛋白等大分子不能通过此半透膜，但系统中游离配基可自由通过。当达到平衡时半透膜两侧自由配基的浓度相等。若系统中自由配基的总量已知，测定不含蛋白隔室中自由配基的浓度，即可推算与蛋白结合的配基a量。具有游离氨基的磺胺药在酸性介质中与亚硝酸发生重氮化反应后，可与N-（1蔡基）乙二胺产生偶合反应生成紫红色偶氮染料，与经

5、过同样处理的磺胺药标准液比较，用721分光光度计比色法测出组织中和不同时间的血液中磺胺噂嗟浓度。由于亚硝酸不稳定，在实验中，用三氯醋酸与亚硝酸钠反应制的得。剩余的过量亚硝酸影响测定，用氨基磺酸胺分解除去。3、实验材料1、实验动物兔子一只。2、设备与器械712分光光度计、管状半透膜（周长5cm长约12cm）、丝线、广口瓶、移液器。3、药物与试剂10%磺胺噂嗟钠注射液15%E氯醋酸溶液0.1%亚硝酸钠溶液0.5%氨基磺酸胺溶液0.1%二盐酸N-（1蔡基）-乙二胺溶液磺胺喀喔钠贮存标准液磺胺喀喔钠应用标准液4、试验方法1、试剂的制备0.1%二盐酸N-（1萘基）-乙二胺溶液：0.5g溶于95%乙醇约4

6、00mL中，再用乙醇稀释至500ml，棕色瓶于冰箱中保存透析液（PBS:PH7.4的0.02M磷酸盐缓冲液，内含0.15MNaCI磺胺噂嗟钠应用标准液：10%磺胺喀嗟钠注射液3.75PI溶于约80ml3%E氯醋酸溶液再定容于100ml容量瓶中备用、血浆制备兔心脏采血，肝素抗凝，以3000rpm离心10min,取上清液即为血浆。、透析将管状半透膜一端折叠，用纱线扎紧，保留结扎线段10cm左右，以调节袋内外液面在同一水平，加血浆样品2.0ml于上述半透膜袋内，并扎紧口袋另一端，袋口不得污染血浆。将两端扎紧的半透膜置于盛有9.75ml透析液的30ml广口瓶中，用袋两端线段调节袋内外液面，加0.05mg/ml的磺胺嘧啶钠溶液0.5ml于各瓶袋外透析液中。置广口瓶于冰箱中，平衡透析约60h左右。吸出袋外透析液少许，加等量磺基水杨酸试剂，无浑浊，说明无血浆蛋白漏出。取出半透膜，用滤纸吸干袋外壁透析液，小心解开透析袋，使袋内血浆