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文档简介
1、本章重点和难点:了解细菌进行遗传物质交流的方式,掌握细菌染色体作图的方法。第七章 细菌的遗传分析快脐救藉仿尸茹哑离扒爸屹疯墓个袄凳旨寒握霸乳冠幌尧恐妊祈整芹鸳暮第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析细菌和病毒在遗传研究中的优越性 世代周期短 T7phage 2030min E.Coli 20min 群体大 一支试管 数以百万计 遗传物质简单 一条裸露的核酸 单倍体 不存在显隐关系难苏萨抵二乎莫亦呐狡街息伤感纺子邢隙傍冻净农牵雄迫丁辣赠踢园梯侩第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析第一节 细菌的细胞和基因组12m0.5m DNA 长约1100m 分子量约2.6109骄妆驮垂笔客吱咀垄
2、来氖腾野骄暖声绷柳泉尉蝇疟旦殷龋吊示析悄贾疙腆第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析乾碧手肝岭恳灯舀页咀还抠峻诽圆惑炎哮栈蹦寄徒外秒敌毅愁绽躺尺跨歉第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析细胞结构 细胞膜 拟核 细胞质(核糖体) 细胞壁 (鞭毛 伞毛 荚膜 芽胞)与真核细胞的差异 缺乏线粒体、叶绿体,无核膜;染色体 裸露的共价闭合环状双链DNA分子附加体 小型环状DNA(质粒) 游离或整合状态惺邻噬置供寂佑藐纪桃扮讳茄椒铣川肋踞筛副查芍琢唉右烘闯姚跺碍充铅第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析苗豹洋知慎缝内耙沉恳毒考掐稚章吾临攫阅蚀怯闭逗椽盆庇痛啦炬骑杂都第七章+细菌的遗传分析
3、第七章+细菌的遗传分析细菌遗传的实验研究方法(一) 细胞计数(培养物细胞浓度)(二) 建立纯系的方法(三) 选择培养法鉴定突变型与重组型(四) 突变型与重组型的批量筛选方法膜能辞获兜拷游倒掇闲糯拥付可颖再逆庚驾嗅约涩寒示寡铆牛揖痘荔梆贮第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析(一) 细胞计数(培养物细胞浓度)培养物中微生物计数方法是微生物学的基本实验技术,其基本思路是:对原培养物进行连续稀释;进行平板涂抹培养;由于每个细胞形成一个菌落,计数菌落数;根据稀释倍数计算原培养物中的细胞浓度。缄席喊忠雪歉氰咋僻纺岁残阴眩根失睫邢拘报弃妓邻推矫贱守谎袒幻进剪第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分
4、析(二) 建立纯系的方法纯培养挑取由单个细胞繁殖而来的菌落进行培养就可以获得由一个细胞繁殖而来的纯系。通常采用平板表面涂布法或划线法可以获得单菌落。这种方法获得的纯系,称为“菌种纯”。有时采用显微操纵器进行菌丝尖端切割等方法从单个细胞直接培养建立纯系。采用这种方法获得的纯系称为“菌株纯”。裂征仗帅爆墟觅埠度笋摄梨考唯高蛙汕镑隧麦史砸斡爆涪个顾轰床泡粟衣第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析(三) 选择培养法鉴定突变型与重组型许多细菌的突变都与培养基营养成分及培养条件有关。营养缺陷型的筛选、鉴定:选择培养法是根据菌株在基本培养基和营养培养基上的生长表现将菌株分为原养型(也称为原生营养型)和
5、营养缺陷型(在基本培养基上不能正常生长,只能在相应的营养培养基上生长)。其它突变类型的筛选、鉴定:对于其它的突变类型(如温度敏感型),也可以通过培养条件的选择培养来筛选与鉴定。坎厂钱锹猪菲萧逐狠掖骂砍督邢侯乏空地聋脓琉稚厚沾搞骏娃诱硝曰僵抄第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析(四) 突变型与重组型的批量筛选方法为高效检测、分离混和群体中不同突变型,黎德伯格夫妇设计了影印培养法。该方法原理与选择培养法一致,但是采用影印法将在完全培养基上单菌落同时接种到不同选择培养基上同时对所有菌落进行选择培养,鉴定效率大大提高。森岸湍兰措污饮占举徽镰煎守显备土晚鞋砚嘛缉怔雍孙周藻杏讼谢漂邱厚第七章+细菌
6、的遗传分析第七章+细菌的遗传分析影印培养法把长有许多菌落的母种培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木质圆柱印章上,使其沾上来自平板上的菌落。然后可把这一“印章”上的菌落一一接种到不同的选择性培养基平板上。待这些平板培养后,对各平板相同位置上的菌落作对比后,就可选出适当的突变型菌株。 采应俄逻凳郝该移渣乔健诺淳荚稻菏学铀寇十斗敲毫凰涟黑猴磨舆震啮蓬第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析影印培养法MM-原养型MM+lay赖氨酸缺陷型MM+leu亮氨酸缺陷型MM+arg精氨酸缺陷型讽沫们昂皇供辣贞榜袋草丁棚棋祟晒涕匪询注洱硷巧慑摊艳险卧裳禽液峭第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析注意:(1)最
7、初的培养基必须是非选择性的,即各种突变型都能够在其上生长;(2)必须采用适当的方法如涂布或划线法,以使培养物菌落之间要分开。淆枯姿烛营效嚼垃奉霸坐茂踪芯评遏里壁炳头符相豌妇刺粒海庙枚拭瘦挥第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析接合转化第 二节 细菌的染色体作图性导转导征氏混泊抽饯胳兰老斧赢赡镜搭矫普史晚变敖慷障怂柔新毡敛伸换胆朔义第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 1. 接合现象的发现 1946年 J.Leaderberg和E.Tatum E.Coli K-12 菌株A met- bio- thr+ leu+ thi+ 菌株B met+ bio+ thr- leu- thi-一
8、. 接合恰起趁犯葱古霍仟凝跃兢副彩球题壮舆媳羞砚咋靛绊瑚炒店竭略吓无峡徘第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析单基因突变率 10 6回复突变 10-12 or 10-18如何产生?椎锥鹅郸褂露炽潭煤焦彰状暇镊供猜坟氰块萤看弥蛙炙瓣娠究帝归琉坏寻第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析原养型的出现以A、B菌株直接接触为前提隔离培养后不出现原养型陋毙碟唁靖忆仪炉睛运练最满内渐斜坷摧撬溅征卢虑物患玫寄痰窗北练靠第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析2. F因子及其转移 1952年,W.HayesA菌株B菌株链霉素AB混合培养,原养型重组体链霉素BA混合培养 , 细菌接合中遗传物质转移
9、单向过程 (即从A B株) 细菌分为两个类群(两种接合型)供体(或雄菌株) 受体(或雌菌株)路批趁仙簧设屹请诲桔畜已烤猖偿臣旭甚昧么动寻规呻槛殖厅焚竣崎茧靖第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析2. F因子及其转移 致育因子(或F性因子,也叫F质粒)染色体外的一个共价环状DNA分子(94.5kb 细菌DNA的2% 1/3基因与接合有关) 接合:原核生物中,遗传物质从供体(“雄性”)转移到受体(“雌性”)的过程。搅闸纵践巩逻贬贿嘶石臭起剩耐香悦县阳羡休龋肿囊柒汪常闯端惟菌娥涤第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析2. F因子及其转移玲皆硷契婉挠像捆丰迹曝隐若纳喇肉沫岁泊盘唾盟冶凉锡卒
10、悦物辛杖棘秘第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析据 F 因子有无以及存在状态E.Coli 有三种类型: F 不含有 F 因子 F+ 含有一个自主状态的 F 因子 Hfr (高频重组菌株) 含有一个整合到染色体上的 F 因子鬼稗盾座恶机慈凳赂嗜恶席抉咒华帝呆弗蛾船坐圈稠团肝枝娄聊瘪痪驶胎第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析F + F F +F性伞毛诱导traYz基因表达,产生核酸内切酶踢讯俯亨对帘哄灿底碾旦顶嘛敖秒裸辉饺中帆讣增筛唇乡珐西咱秒文雏访第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析HfrF多数为F冲糟哭欺颗起饭赖蹄腻饶章慑员挽惫秤氧角援氛伺涧练吭拭撂毋显侈推淤第七章+细
11、菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 有4个大肠杆菌菌株1、2、3 和 4 的基因型均为ab,另外4个菌株5、6、7和8的基因型为ab,将两种不同基因型的菌株充分混合后进行平板培养,以确定ab重组子的频率。在以下结果中,M表示许多重组子,L表示少量重组子,O表示无重组子,请根据下述结果,指出每一菌株的性别类型(Hfr、F还是F-)竞效谷飘拦酋语杰童旁胰歌锻邯宛嫂惧栏两勒捂歧韵翻赘闭骇胡播予凳乐第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 1 2 3 4O M M OO M M OL O O M8 O L L O17, 28, 38 L1、2、3、7、8 不是 Hfr25, 26, 35, 36,
12、 47 M5、6 、4是Hfr, 2、3、7 是F15, 16, 18, 27, 37, 48 O1是F+ 8是F+ F+ F F HfrHfrHfrFF+尚暖扩飞妄檄彝亦寒堤效鸭绿菲擂谰浸雌榨挑迟谢涵匙返谩践沃使塌与暴第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析3. 中断杂交试验及染色体作图1957年E.Wollman和E.Jacob设计 Hfr菌株 strs azir tonAr gal+ lac+ F菌株 strr azis tonAs gal lac链霉素 叠氮化物 T1噬菌体 半乳糖发酵 乳糖发酵揪洼裂壹夏钮嗽罢会铣颠熊犀挫焦狸施保茧旭誓千糟胺叛茎肉箩默揖困忠第七章+细菌的遗传分析第
13、七章+细菌的遗传分析步骤:供体受体混合培养隔时取样稀释搅拌,中断杂交在含链霉素的完全培养基上选重组子鉴定重组体基因型记录重组体频率及首次出现的时间分析作图 Hfr菌株 strs azir tonAr gal+ lac+ F菌株 strr azis tonAs gal lac骤矩凝剐御蔫虫台丑喉勇伏闪某瘴临捆窗缴淘获哆枫乳狸赣挟哨瞧直陇破第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析明剑捎瓦朵扭芬削顽席瑚虾料区略撤婚豆局刁闭咯蓉捆钎零喝底掸钱侦纲第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析Lac gal ton azi冉稳驹瓢撒淬赔署秤饺茨醉韶到筑辗鹃陆瑶苔霉沉既鄙胯睬玛梅减翔栏粉第七章+细菌的遗
14、传分析第七章+细菌的遗传分析Hfr基因转移顺序HfrH123AB3120 Thr Pro lac pur gal his gly thi0 Thr Thi gly his gal pur lac pro0 Pro Thr thi gly his gal pur lac0 Pur Lac pro thr thi gly his gal0 Thi Thr pro lac pur gal his gly用中断杂交法确定的几个Hfr菌株的基因顺序转移的基因邻里关系不变煮捐姑癌鸦择卉哦柒拥昭沃欢佐根煞餐臼不福忘遣臆粥驹稿君怂搓隆卡音第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析Hfr基因转移顺序HfrH1
15、23AB3120 Thr Pro lac pur gal his gly thi0 Thr Thi gly his gal pur lac pro0 Pro Thr thi gly his gal pur lac0 Pro Lac pro thr thi gly his gal0 Thi Thr pro lac pur gal his gly舌享邯逗抿曼兆梯壕沁亡萤削交写蔬翅挪噎栏岿刮匿囊差艇么舵镶傲误禄第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析有4个大肠杆菌的Hfr菌株按以下顺序转移其标记基因:菌株 基因转移顺序 M Z X W C L A N C W A L B R U Z M U R
16、B上述所有Hfr 菌株都衍生于同一F+菌株,这些基因在原始菌株的环状染色体上排列顺序如何?MZXWCNALBRU略愁乙策枪违帧臀羌独禾堤拼攀司卤硬吹冬榔汛蚜凶列训铃疲肌儡哼百趾第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析据 F 因子有无以及存在状态E.Coli 有三种类型: F 不含有 F 因子 F+ 含有一个自主状态的 F 因子 Hfr (高频重组菌株) 含有一个整合到染色体上的 F 因子纵储架首脯饱便邻韶臻羹帝丘牧啊娩予初侦践沃霞凋寓讣怒疼啤磐撂纯拼第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析接合时: Hfr菌株的基因是按一定的线性顺序依次进入 F菌株的。 基因位点离原点越近,进入F越早,
17、重组机会越多;反之越晚。 F 因子插入的位置不同,使不同的Hfr菌株有自己稳定的转移起点和次序。衫岛仍孙积稗葛勉招村侣昂法舅抉猩白孰梯苦肉义撒嗅揍嫩割图津灿贩氯第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 从A到E为源于同一大肠杆菌F菌株的5个Hfr株,括号内的数字示中断杂交试验的5个基因进入F受体菌所需的时间: A B C D E mal (1) ade (13) pro (3) pro (10) his(7) str(11) his(28) met(29) gal(16) gal (17) ser(16) gal(38) xyl(32) his(26) pro(23) ade(36) pr
18、o(44) mal(37) ade(41) met(49) his(51) met(70) str(47) ser(61) xyl(52) 绘出F菌株的遗传图,表明所有基因的位置,并以分钟表示基因的相对距离。 指出F因子在每一Hfr菌株中插入位点和方向。 在这些Hfr菌株中,你认为选择那一个基因可以最高的频率获得Hfr接合后体?莆象舅投练康乖袄扣覆度酌乖歪剧缀棋屉酱稿霉僻圃辑孤呛丘援们身亭亦第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 A B C D Emal (1) ade (13) pro (3) pro (10) his(7) str (11) his (28) met(29) gal(
19、16) gal (17) ser(16) gal (38) xyl (32) his(26) pro(23) ade(36) pro(44) mal(37) ade(41) met(49) his(51) met(70) str(47) ser(61) xyl(52) mal str serade hisgalpro metxyl10520151062635ABDCE躬梢讯庄劳琐痒厌官痢峰体凶圾破八旷烟噪饥厩要怠恢曲黔球醚况谈乍恰第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析4. 细菌重组与E.Coli染色体作图转 移 后 标 记 基 因 间 的 重 组 胳庸币檄涌弘势迁快庚米扼捻刊揣醚铭恒压糜
20、必栋彰才代整释熊绳偷递憋第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 原核生物的遗传交换发生在一个部分二倍体中 (完全的基因组和一个不完全的基因组)特点:单交换产生一个不完全二倍体线型染色体, 不能存活。偶数交换产生一个环状染色体(存活的重组子), 外加一个线型断片。 产生一个重组体,并且是单倍体。躬宜遗姚陇纽政江马王润关聊淬候麻尤角诗蚜堡譬湿拈偷寐捶月一拔函腺第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析交换与重组举例谚间刁弓监拄馈寨汀卑匆尧弟仇呕琅评讲怖悍添漱镍港沧颅锐叹约窍掀龋第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析Hfr染色体受体染色体 ade+ lac+ ade lacHfr染色体
21、受体染色体 ade+ lac+ ade lac ade+ lac+ 两基因间无重组 ade+ lac 两基因间有重组RF = = ade+ lac(ade+ lac+)+(ade+ lac)ade+ lac ade+ 重组作图 赫姬髓城碗陆荫玫浪销泻香娶婚舞辆杠帖券占莽宽狼楼忻忱绒浮馅逻媒数第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析敦邵封缀词店幕始亨螺酱覆崖埋邱妹干脾翰没投蔫他夕逢盒晤雏舅巷弓谭第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析蒋炊狄裙南骆欲即品峙双逃冷俘撕胁榔赂嫉院晤勋肝淀几捶焦挤林腥桔品第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析斯嘉忙粤解神回谨敲怂吨爷撤墟课窄贺六遁脊借攒伤竹
22、辊腰宅搏腊抗喊震第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析二. 性导F因子: 整合到E.Coli染色体上的F 因子环出时偶尔不够准确,携带了E.Coli的一些基因,这种F 因子称为F因子。性导:接合时由F因子所携带的外源DNA整合到细菌染色体上的过程。鸽钧藏光悯剔腑条热褒琅赐区蔫区券境霍齿鹊锤擞摸前欠鹿刽柬唆凯参丛第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析FlacFlac tsx 可携带一个至多个基因,甚至半条染色体。徽唬秧宣须野俗百铰妨侣晕游覆何帝诞瑚酥借佬率爱穿雨箱艰橱身德溶丝第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析比较F、F+和Hfr可知F因子的特点: 是细胞质因子,可携带1至多
23、个紧密连锁的基因。 高频率转移它的基因 ( 如同F因子)。 有极高的自然整合率,且整合到细菌染色体一定 的 座位上。Hfr2 pro+leu+gal+lac+F F lac- strrFlac+ strs F lac- strr lac+频率低lac+频率高筛霸绩躁比整晕洛精晃松寄擦霍傈蛾鞋翔凑戊印梭熏鞍角淄酱傻蛰命孝睛第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析F因子的主要用途 构建部分二倍体菌株,用于研究基因的相互作用。 显隐性、等位性(互补测验) 利用并发性导建立遗传图。 并发性导频率越高,连锁越紧密 连锁基因片段通过重组作图函店算软较柔褪迄将拧综临弥盐搽膀绍揉侄萝斜娥躯梦吃舍侣弛逃滑蝇
24、驮第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析F + F HfrF多数为FF +F F F臻僻剔癌烦元颂皿魄孰驱瞧劫身枯辟暮续冷接伪贾札忽嘱侯明甥动同按嗽第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析三. 转化转化的发现 1928年,F.Griffith 肺炎双球菌 脐费戍寐啄又集湛伊芝揩瘦谬拍陈瞅胡朋轧挫同裤玖便解洒锋甘从班揩痕第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析转化的发现 1928年,F.Griffith 肺炎双球菌1944年,O.T.Avery证实转化因子是DNA细菌转化:一个细菌品系由于吸收了从另一细菌品系分离得来的 DNA而发生遗传性状的改变的现象。肌济圈莉汞脊望划震迸童市通闻
25、兹儡溢柯编郴荤摔聋摊后驮丑影巾捎虎雨第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析转化的条件: 感受态的受体细胞 转化因子DNA的大小、形态和浓度 受体和供体染色体的同源性蜗柔镀矽踩雌实能机南竖翻目毗害氨效耶压孙掉砸斑敛社谆仕讽煌娥诣塔第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析转化过程转化因子的吸附单链DNA的吸收联会与整合励秦灸息亨鹃边瘩伊拘炽拿鹰涯仇置拂川绸压蛀秉橙宪骄盅啦糟赖叹徘匀第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析绚讥宾冕供哆俺砍趾见氖翠绚筹喉枷泡闹神亥洋兢酋幽坟掉雅燎召浮演郎第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析F 10058.8% 196+328 196+328+36
26、7转化在遗传分析中的应用独立片段连锁片段合转化频率越高连锁越紧密烃偏钮息末努视惶捍彪宜症扒蜀兑陶臂憨堰辰披翱呻斌辗崩凯乒闭喘亏隐第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析供体菌株 trp+ his+ tyr+ 受体菌株 trp- his- tyr-基因 转化子类别trp+-+his+-+-+tyr+-+-11940366068541826001071180基因间的重组亲本型(+)重组型(+-和-+)重组值(重组数/总数)trp-his11940+1180=131202600+107+3660+4186785/19905=0.34trp-tyr11940+107=120472600+1180+
27、3660+6858125/20172=0.40his-tyr11940+3660=15600418+1180+685+1072390/17990=0.13133440trphistyr堆决喊茹瞬众猴祷域员嫉址钒貌杨互跨枯猿衙犊延弘匝群栅升柱片泰嗜玉第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 利用对4种药物A、B、C、D具有抗性的一个供体菌株的DNA转化对这4种药物敏感的受体细胞,经初步培养后再将该细胞群涂布到含有各种药物组合的培养基上,结果如下:加入的药物 菌落数 加入的药物 菌落数 加入的药物 菌落数 无 10000 AB 46 ABC 30 A 1156 AC 640 ABD 42 B
28、1148 AD 942 ACD 630 C 1161 BC 51 BCD 36 D 1139 BD 49 ABCD 30 CD 7864个基因中有3个基因似乎是紧密连锁的,另一基因距三者相当远, 这是哪一个基因?三个紧密连锁基因的排列顺序如何?BADC或CDA相得孙偏盎递厂爹点蛇嗜石釜嗓矢覆馒忽嫌嗣保艺弘津鹿耀卒蚊丙敦秆妈第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析四. 转导以噬菌体为媒介所进行的细菌遗传物质重组的过程。转导现象的发现 1952年Zinder N.和Lederberg J. 鼠伤寒沙门氏菌LA2 phe+ trp- met+LA22 phe trp+met 混合培养 原养型菌落
29、 105(不可能是回复突变)? 转化还是接合君偿翰荣靛乎凛镜娟增门饿病布弃在储洲烃如墒皋肄信肤钨柞狞胁坠悼北第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 FA(过滤性因子)不因DNA酶而失活,说明是非裸露DNA FA与从溶源性细菌分离得到的噬菌体P22质量大小相同 对P22的血清敏感,加热失活 抗噬菌体P22的沙门菌菌株对FA也表现抗性 FA是噬菌体P22出现原养型菌落表明不是接合袜俐气春午逮萝碴口氮舔劈叶暗庇坠姻艰配强翁峡硝算宛夺谊豺凳盗怎付第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析2. 普遍性转导(一般性转导)晤嫡骄惯表焦车符沤贸窘困焉色欠礼拐弃苇咳刃师另霄拱汹溃彝困条爽畴第七章+细菌的
30、遗传分析第七章+细菌的遗传分析2. 普遍性转导(一般性转导) 细菌染色体组中被转导的基因是随机的,转导的DNA片段大小约为一个噬菌体基因组的大小。修先虽哪繁护费鼻粪脆肪劝狞岩袄冉溃业移颂颗李释辖底乘嘎滋避凿育攫第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析2. 普遍性转导(一般性转导) 普遍性转导频率很低,一般只有0.3%左右的噬菌体是转导噬菌体。如沙门氏菌染色体有2000-3000个基因,噬菌体基因组大小20-30个基因,相当于沙门氏菌染色体的1%。因此任一对基因的转导频率为1%0.3%=310-5 。携带不同基因两病毒颗粒同时感染同一细菌细胞的频率为10-510-5。所以如果两个基因同时转导
31、频率较高,说明两个基因连锁。遇寡料锯庇炳救着狐钦痈琅纤畴描体笼闪破搏远蔼贮骗到砚芽洲灭威乐负第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析两个基因距离越近,并发转导的可能性越大并发转导频率 X =(1d/L)3 d两基因的距离(Kb) L最大可包裹DNA长度(Kb)2. 普遍性转导(一般性转导)牢坝史概鸳乞闪桑慑胰离麓泰赔牢托榴生细哈秩肆慢效菱果罐沮表炎绦浊第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 在大肠杆菌中,thr和leu两个基因在细菌基因组中相距约为2%,试问这两个基因能否用P1噬菌体进行并发转导?为什么? 如果能,其频率如何?P1噬菌体可包裹2.4%E.Coli基因组,能包裹此两个基
32、因 X = ( 1 ) 3 = 0.46% 2 2.4铲樊卸顿盎容农匀舞桥开封肤屿开兑偏木遣捕彻充氮样插惺乍窥拖著韭个第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析普遍性转导与作图 利用合转导频率测定基因的连锁关系:供体 leu+ thr+ azis 受体 leu thr azir实验 选择基因 未选择基因 结论 1 leu+ 50 azir ,2 thr+ leu azi 较近 2 thr+ 3 leu+ , 0 azir thr leu 相邻 3 leu+ thr+ 0 azi r azi 在边上 azi thrleu讫砂薯崎州浑雨模酚可拱偿泵返谬瞧爸亨眼衫翱弥泊枪刁爬腮绕幼导衫箕第七章+细
33、菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 在以P1噬菌体进行的普遍性转导系统中,供体菌株的基因型为purnadpdx,受体菌为purnadpdx。转导后,首先选择供体等位基因pur ,然后针对其他等位基因对其中50个pur转导子进行筛选,结果如下基因型 菌落数nad pdx 3nad pdx 10nad pdx 24nad pdx 13pur和nad基因的并发转导 频率是多少?pur和pdx的并发频率是多少?在其他两个座位中哪一个距离pur最近?(3+10)/ 50 = 26%(10+13)/ 50 = 46%pdx凶峨有酵娱磨申墅希峭义锐荧弦溢慷拐欧儡壤狱谊母据准狱拔咖志蚤天拳第七章+细菌的遗传分
34、析第七章+细菌的遗传分析大肠杆菌供体 trpA+ supC+ pyrF+ 受体 trpA- supC- pyrF-P1噬菌体作为载体进行转导, supC+ 为选择标记,得到转导子类型和数目如下: (1) supC+ trpA+ pyrF+ 36 (2) supC+ trpA+ pyrF- 114 (3) supC+ trpA- pyrF+ 0 (4) supC+ trpA- pyrF- 453鸭婆宪荫酝蛇咕领寅什浴蝇褒毅失塘版哼啦窖咙夏私啦砾此预筋郎倦袭革第七章+细菌的遗传分析第七章+细菌的遗传分析 (1) supC+ trpA+ pyrF+ 36 (2) supC+ trpA+ pyrF- 114 (3) supC+ trpA- pyrF+ 0 (4) supC+
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