《动物传染病学（猪病）》课件4-5(13)猪传染性胃肠炎 流行性腹泻 轮状病毒病

1、猪腹泻性疾病及其控制 蔡旭旺 农业微生物学国家重点实验室204 电 话QQ:2532609832 E-mail： 1. 概述猪的腹泻是集约化养猪生产条件下的一种典型的多因素性疾病，给养猪业造成重大经济损失。 肠炎与腹泻是引起仔猪死亡的重要原因之一，若猪场管理不当，肠炎与腹泻常成为一个猪场长期难以解决的问题。猪的腹泻可以由传染性和非传染性因子引起。1.1 引起肠炎与腹泻的主要病因细菌及其毒素病毒寄生虫真菌变态反应营养无机物中毒普通病肠炎腹泻1.2 引起腹泻的主要传染性因子 猪瘟病毒 伪狂犬病毒病毒性病原 传染性胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 猪轮状病毒 猪圆环病毒 致病性

2、大肠杆菌 沙门氏杆菌细菌性病原 C型魏氏梭菌 猪痢疾短螺旋体 其它（弯曲菌、胞内劳森菌） 球虫寄生虫性病原 隐孢子虫 蠕虫（结肠小袋纤毛虫等） 黄曲霉毒素真菌及其毒素 镰刀菌毒素 其它 1.3 引起腹泻的生物性病原可分原发性腹泻病原：只限制在肠道局部繁殖的病原，是引起肠炎和腹泻的直接病因。继发性腹泻病原：是全身循环经过性传染病的病原，在这些病原中，腹泻是作为被病原侵害的组织器官在肠道出现的一种结果。1.4 几种腹泻疾病的发病年龄区间 24小时 5天 3周 5周 10周 20周 30周 成年 类圆线虫 大肠杆菌 严重症状 TGE 轻微症状 严重症状 PEG 轻微症状 梭菌性肠炎 轮状病毒肠炎 球

3、虫 沙门氏菌肠炎 猪痢疾2. 猪传染性胃肠炎（Transmissible gastraenteritis of pigs，TGE）猪传染性胃肠炎是一种急性胃肠道传染病，以呕吐，严重腹泻和脱水为特征。各种年龄猪都可发病，10日龄以内仔猪病死率很高，可达100%，5周龄以上猪的死亡率很低，成年猪几乎没有死亡。病理变化主要是肠道的卡他性炎症和小肠黏膜微绒毛萎缩。2.1 概述猪传染性胃肠炎病毒，属于冠状病毒科冠状病毒属，基因组为单股正链RNA。有囊膜，形态多样，呈圆形、椭圆型和多边形，直径约为80120nm，表面有一层棒状纤突。只有一个血清型，病毒能在猪肾、猪甲状腺和唾液腺等细胞中繁殖继代，引起细胞病

4、变的能力因病毒株而异。2.2 病原冠状病毒粒子结构示意图。病毒存在于病猪各器官、体液和排泄物中，以空肠、十二指肠和肠系膜淋巴结含毒量最高，在发病早期呼吸系统和肾脏的含毒量也相当高。病毒不耐热，在4以上很不稳定，加热5645分钟，6510分钟死亡。但在4以下的低温可以长时间的保持其感染性。肠道内的病毒在20可保存6个月，在18保存18个月仅下降1个对数滴度。对光线敏感，在阳光下曝晒6小时即被灭活。紫外线能使病毒迅速灭活，但在阴暗处历时7天仍保持感染力。病毒在pH48稳定，pH2.5时则被灭活。病毒对乙醚，氯仿敏感，所有对囊膜病毒有效的消毒剂对其均有效。0.5%石炭酸在37处理30分钟可杀死病毒。

5、冠状病毒复制示意图 冠状病毒进入宿主细胞后，首先直接以病毒基因组RNA为模板翻译出RNA聚合酶，然后利用该酶完成负链亚基因组RNA的转录、各结构蛋白mRNA的合成，以及基因组RNA的复制。结构蛋白和基因组RNA复制完成后，在宿主细胞内质网装配成新的病毒颗粒，并通过高尔基体分泌到细胞外，完成其生命周期。3. 流行病学传染源：主要是病猪和康复后带毒猪。病毒主要存在于猪的小肠黏膜（空肠含毒量最高可达106PID猪感染剂量）、肠内容物、肠系膜淋巴结和扁桃体中。可随粪便排毒达8周之久，最长的达104天。传播途径：主要通过食入被污染的饲料经消化道传染，也可通过空气经呼吸道传染。密闭猪舍，湿度大，猪只集中的

6、猪场更易传播。易感动物：各种年龄的猪均有易感性，但10日龄以内仔猪的发病率和死亡率较高。断奶猪、肥育猪和成年猪发病的症状轻微，大多数能自然康复。其它动物无易感性。流行特点：多发生在冬春寒冷季节，即12月至4月之间。一旦发生，在猪群里迅速传播，数日内可使猪群大部分猪受感染。新疫区呈流行性，老疫区则呈地方流行性或周期性流行，发病率降低，症状较轻。4. 临床症状潜伏期随猪的年龄而有差异，仔猪1224小时，大猪24日。突然发病，传播迅速。仔猪先突然发生呕吐，接着发生急剧的水样腹泻，粪便为黄绿色或灰色，有时呈白色，并含凝乳块。部分病猪体温先短期升高，发生腹泻后下降。病猪迅速脱水，很快消瘦，严重口渴，食饮

7、减退或废绝。一般经27天死亡，10日龄以内的仔猪有较高的致死率，随着日龄的增长致死率降低，病愈仔猪生长发育较缓慢。架子猪，肥猪和成年猪的症状较轻，发生一至数日的减食，腹泻、体重迅速减轻，有时出现呕吐，哺乳母猪泌乳减少或停止。一般37日恢复，极少发生死亡。病猪消瘦、脱水。病猪呕吐和腹泻。猪传染性胃肠炎：架子猪呈水样腹泻。猪传染性胃肠炎：架子猪呈水样腹泻。呕吐物。 腹泻粪便。5. 病理变化主要病变在胃和小肠。仔猪胃内充满凝乳块，胃底部黏膜轻度充血，有时在黏膜下有出血斑。小肠内充满黄绿色或灰白色液状物，含有泡沫和未消化的小乳块，小肠壁变薄，弹性降低，以致肠管扩张，呈半透明状。肠系膜血管扩张，淋巴结肿

8、胀，肠系膜淋巴管内见不到乳糜。将空肠纵向剪开，用生理盐水将肠内容物冲掉，在玻璃平皿内铺平，加入少量生理盐水，在低倍显微镜下或放大镜下观察，可见到空肠绒毛显著缩短。组织学检查，黏膜上皮细胞变性，脱落。肾常发生变性，并有白色尿酸盐沉积。胃浆膜出血。胃底黏膜充血、点状或斑状出血。小肠扩张，肠壁极薄。小肠弥漫性充血、出血和变薄，肠管扩张。肠壁极薄，由于细菌感染致黏膜严重出血。左为病猪肠绒毛变平，右为正常。空肠与回肠绒毛显著萎缩。萎缩绒毛 正常绒毛6. 诊断病原学检查病毒分离：取病猪的肛拭、粪、肠内容物或空肠、回肠段为病料，经处理后接种猪肾细胞培养，盲传2代以上分离病毒，用中和试验或免疫电镜作鉴定。RT

9、-PCR。 血清学检查免疫荧光试验：取急性期病猪的空肠制成冰冻切片，荧光抗体染色后在荧光显微镜下观察，如胞浆内发现亮绿色荧光即可确诊。下痢初期荧光抗原最多，至感染后7天则减少，因此采样时间必须适当，若同时配合组织学检查，其可靠性更大。酶联免疫吸附试验（ELISA）、微量中和试验、间接血凝试验：也是本病常用的血清学诊断方法。双份血清的中和试验，康复血清效价4倍于病初血清为阳性。鉴别诊断 本病应与猪流行性腹泻、轮状病毒腹泻、猪大肠杆菌病和猪痢疾等相区别。7. 防制治疗：尚无特效治疗方法，患病期间大量补充等渗葡萄糖氯化钠溶液，供给大量清洁饮水和易消化的饲料，可使较大的病猪加速恢复，减少死亡。口服四环

10、素、磺胺、呋喃西林、黄连素、高锰酸钾等可防止继发感染，减轻症状。预防：保健措施：通过血清学调查对猪场进行监测，猪的交易必须控制在TGE血清学阴性的猪场。对后备种猪的买卖必须进行TGE的检查。对饲养的仔猪需进行抽样检查，每群可抽样510头。所有来自其它地区新购进的猪必须对TGE进行隔离检查。如在育种群和繁殖群出现腹泻时要禁止种畜的出售。免疫措施：免疫机理主要是细胞免疫和黏膜免疫，肌肉接种无效，口、鼻内接种可行。经胃肠外接种灭活疫苗和弱毒苗，仅能在乳汁中产生少量IgA分泌型抗体。通过母源抗体的被动传递来保护仔猪免受TGEV的侵袭。给妊娠母猪产前2040天口服强毒能够产生良好乳汁免疫。将发病猪的粪便

11、直接接种母猪或其它猪，让其集中发病，集中处理，缩短发病时间，提高母猪初乳中的抗体水平，被动保护仔猪。有散布强毒，使本病常在的危险，一定要在猪场没有其它传染病发生的情况下，严格控制下，谨慎进行。感染TGE病毒的猪对其它疾病的抵抗力或免疫机能明显改变。在出现TGE症状之前以及已出现TGE症状时，给猪注射猪瘟弱毒疫苗，常不能产生对猪瘟的有效免疫力。8. 猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea，PED）猪流行性腹泻是一种急性接触性肠道传染病，特征为呕吐、腹泻和脱水，各种年龄猪均易感。本病的流行特点、临诊症状和病理变化都与猪传染性胃肠炎十分相似，但哺乳仔猪死亡率较低，在猪群中的

12、传播速度相对缓慢。20世纪80年代初以来，中国陆续有发病的报道，并分离到病毒。8.1 概述8.2 病原冠状病毒科冠状病毒属的成员，呈球形，有囊膜，单股正链线性RNA。可在PK和ST细胞中增殖，并产生明显的CPE，不能凝集人、兔、猪、鼠、犬、马、羊、牛的红细胞。对外界抵抗力弱，对乙醚、氯仿敏感，一般消毒药物都可将其杀灭。 8.3 流行病学本病毒可在猪群中持续存在，各种年龄的猪都易感。哺乳仔猪、架子猪和育肥猪的发病率可达100%，母猪的发病率则为1590%。传播途径是消化道。病毒多经发病猪的粪便排出，以运输车辆、饲养员的鞋子或其它带毒动物作传播媒介。多发生于寒冷季节，呈地方性流行。 8.4 临床症

13、状主要表现为水样腹泻，或者伴随呕吐。1周内新生仔猪常于腹泻后24天内因脱水而死亡，病死率可达50%。断奶猪和肥育猪以及母猪常呈现沉郁和厌食临诊症状，持续腹泻47天，逐渐恢复正常。成年猪仅表现沉郁、厌食、呕吐等症状，若没有继发其它疾病和护理得当，很少发生死亡。8.5 病理变化小肠膨胀，充满淡黄色液体，肠壁变薄，个别小肠黏膜有出血点。小肠绒毛变短，重症者绒毛萎缩，甚至消失。肠系膜淋巴结水肿。胃充满胆汁样的黄色液体。病猪严重脱水，小肠膨胀，肠壁变薄。断奶仔猪严重肠炎和肠道内黄色内容物。萎缩绒毛。 正常绒毛。小肠绒毛萎缩（HE染色）。8.6 诊断发生于寒冷季节。直接取病猪的粪便检查PEDV粒子或接种胎

14、猪肠组织原代细胞或Vero细胞培养分离病毒。在仔猪可用荧光抗体与病猪小肠冰冻切片染色作出本病的确诊。RT-PCR。PED X40PED X 100PED X 400荧光抗体检测猪流行性腹泻病毒（绿色）。 1 2 3 M525bp400bp600bpFig. RT-PCR products of PED viral RNA M: Marker 1: sample 2: negative 3: Positive（PED） RT-PCR检测猪流行性腹泻病毒。免疫组织化学染色方法标记小肠细胞内的猪流行性腹泻病毒（棕色）。猪流行性腹泻在仔猪、架子猪和育肥猪的发病率都很高，哺乳仔猪发病死亡率最高，而猪传染

15、性胃肠炎在架子猪、育肥猪发病率较低。猪流行性腹泻多为水样腹泻，或在腹泻过程中有呕吐，多发生于食后；而猪传染性胃肠炎是先呕吐，后腹泻。猪流行性腹泻病死率较猪传染性胃肠炎低，在猪群中传播亦较慢。鉴别诊断8.7 防制目前尚无特效治疗药物，对症治疗可以减轻脱水、酸中毒和防止并发感染。可对怀孕母猪在分娩前2周以病猪的粪便或小肠内容物进行人工感染，具体方法与猪传染性胃肠炎所用的类似。免疫TGE-PED二联灭活苗或弱毒苗。9. 轮状病毒感染（Rotavirus infection）由轮状病毒引起的儿童（6个月2岁）及幼龄畜禽（如8周龄以内猪）的急性胃肠道传染病。临床上以腹泻和脱水为特征。成年人和成年动物一般

16、呈隐性感染。9.1 概述9.2 病原属于呼肠孤病毒科轮状病毒属。双链RNA病毒，无囊膜，有双层衣壳，从内向外呈放射状，形态似车轮。病毒很难在细胞培养中生长繁殖，对理化因素有较强的抵抗力，耐酸碱（pH3.510）。共11个基因片段，编码6个结构蛋白（VP14、VP6、VP7）和5个非结构蛋白（NSP15）。外衣壳蛋白VP4（血凝素，决定血清型和感染性），VP7（糖蛋白，促病毒穿入），均为中和抗原。根据内衣壳VP6的抗原性，轮状病毒可分为A、B、C、D、E 、F 6群。轮状病毒在电镜下的形态。轮状病毒的大体结构。9.3 流行病学患病的人、畜和隐性感染者都是传染源。通过粪便向外散毒，经消化道传染易感人畜禽。传播迅速，多发生在秋冬寒冷季节。仔猪多发，发病率高死亡率低。主要