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文档简介
1、利用InDei分子标记辅助选育辣椒抗黄瓜花叶病毒病种质作者:郭广君朱雪梅潘宝贵刁卫平刘金兵高长洲王述彬来源:江苏农业学报2021年第05期a:PUC688、G29植株;b:P13C688/;29和1代的果实o图1高抗黄瓜花叶病毒CNW种质灌木状辣椒PBC688(C.frutencensci,PBC688)和高感CMV种质Gannuumcv.G29Fig.lGermplasmofCfrutencenscv.PBCfiSSndCamiuumcv.G29250bp100bp250bp100bp250bp100bpM:Marker;166:33个耳代株系,每个株系2个单株图23个InDel分子标记在部
2、分F&代株系中的扩増情况Fig.2PCRamplificationofthreeInlelmolecularmarkersinsomelinesofF6population表1F6代自交系的分子标记组合及果实性状Table1MolecularmarkercombinationandfmittraitsofF6inbredlines分子标记组合果实性状序号种质编呂lnl)rl-2-/54inl)e|.2-/4lnl)el-2-/52果形单果质虽(g)果实纵径(cm)果实横径(6-1346.67R00H6-1486.67K00H6-1783.70HR00H6-2165.19R()0H6-21710
3、.37K00心2197.41R00H6-22()1.48HR00H6-2226.67K00H6-2245.93K00H6-2258.15R00H6-22611.85R00IL-22818.52R00续表2Continued工抗CMV接种鉴定分F标记组合种质编号病情指数门増抗性ln(Jel-2ZJ4aVh-2-!401叫亠2402.22HK00H严4.44HK00平均S.I8H申14.07R221时6412.5?R22H&Z17.04R22仏-氐25A922H6-l&525.93TIR22%如25.19MR22H.-2J427.41Mil2217.04K2225,19MK72平均23.0727.
4、4JMR12Hb-2IO31.S3MK02H严1.48Hit?0平均20.25PBC688抗病对照)2.22HR00感病対照)45.19s11病情擂数(圍)=E(病略该病级株数)/(弱总株数)x10()免疫:DUD;高抗:040.0.S;感病溷R冲抗;R:抗病;HR:高抗。0:纯合杭病型;】:址合感病型忆:杂合型摘要:黃瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)是危害中国辣椒生产的第一大病毒,创制抗性育种材料、培育抗性品种是防治CMV最有效的方法。以高抗CMV材料PBC688为母本,与感病甜椒材料G29为父本杂交,通过连续自交获得F6代自交系。利用与抗性基因qCmr2.1紧密
5、连锁的3个InDei分子标记,结合人工接种鉴定和农艺性状调查对109个株系进行筛选。分子标记鉴定结果显示,携带纯合抗性片段的株系有28个,携带纯合感病片段的株系有65个,携带杂合片段的株系有16个,杂合率为14.7%。农艺性状调查结果显示,大部分携带qCmr2.1基因的自交系果实较小,首花节位高,花期和成熟期显著晚于感病材料G29。筛选到1份高抗CMV且农艺性状优良的育种材料H6-223,人工接种鉴定结果显示,21个纯合抗病型对CMV表现为高抗、抗;在14个纯合感病型中,13个株系表现为感病,1个株系表现为中抗;9个杂合型株系的抗病性出现分离,表现为抗、中抗;3个在分子标记间出现重组的自交系中
6、,H6-223表现为高抗,另外2个表现为中抗。由研究结果可以看出,3个InDei分子标记可以辅助创制辣椒抗CMV种质,创制的高抗CMV且农艺性状优良的种质H6-223可进一步用于辣椒抗CMV育种。关键词:辣椒;黄瓜花叶病毒;分子标记辅助选育中图分类号:S436.418.1+2文献标识码:A文章编号:1000-4440(2021)05-1251-11InnovationofpeppergermpiasmresourcewithresistancetocucumbermosaicvirusbyInDeimoiecuiarmarkerassistedseiectionGUOGuang-jun1,ZH
7、UXue-mei1,2,PANBao-gui1,DIAOWei-ping1,LIUJin-bing1,GAOChang-zhou1,WANGShu-bin1(1.InstituteofVegetabieCrops,JiangsuAcademyofAgricuituraiSciences/JiangsuKeyLaboratoryforHorticuituraiCropGeneticImprovement,Nanjing210014,China;2.CoiiegeofHorticuiture,NanjingAgricuituraiUniversity,Nanjing210095,China)Abs
8、tract:Cucumbermosaicvirus(CMV)isthemostseriousvirusthreateningtheproductionofpepperinChina.InnovationofpeppergermpiasmresourcesandbreedingvarietieswithresistancetoCMVisthemosteffectivemethodtopreventCMV.UsingtheresistantmateriaiPBC688asfemaieparentandthesusceptibiesweetpepperG29asmaieparent,F6inbred
9、iineswereobtainedthroughsuccessiveinbreedinginthisstudy.Totaiiy109F6inbrediineswereidentifiedbythreeInDeimarkerstightiyiinkingtoqCmr2.1.ThepeppergermpiasmswithresistancetoCMVwerechosenbycombiningwiththeartificiaiinocuiationidentificationandtheinvestigationofagronomictraits.Theresuitsofmoiecuiarmarke
10、ridentificationshowedthattherewere28iinescarryinghomozygousresistantfragment,65iinescarryinghomozygoussusceptibiefragment,and16iinescarryingheterozygousfragments.Theheterozygousratewas14.7%.TheinvestigationresuitsofagronomictraitsindicatedthatmostinbrediinescarryingqCmr2.1genehadsmaiierfruits,higher
11、nodepositionofthefirstfiower,andsignificantiyiaterfioweringandripeningthansusceptibiemateriaiG29.AbreedingmateriaiH6-223withhighresistancetoCMVandexceiientagronomiccharacterswasscreened.Theresuitsofartificiaiinocuiationidentificationindicatedthat21diseaseresistantmateriaiswithhomozygousgenotypesshow
12、edhighresistanceorresistancetoCMV.The13iineswithhomozygoussusceptibiefragmentweresusceptibietoCMVandoneiinewasmiddieresistancetoCMV.TheresistancetoCMVofnineiineswithheterozygousgenotypeswasseparatedproportionaiiy.Amongthethreeinbrediineswithrecombinantmoiecuiarmarkers,H6-223showedhighresistanceandth
13、eothertwoshowedmoderateresistance.Ingenerai,weestabiishedInDeimoiecuiarmarkerassistedseiectionsystemforpepperresistancetoCMV,andinnovatedonegermpiasmH6-223withresistancegeneqCmr2.1andexceiientagronomictraits,whichcouidbeappiiedinbreedingforresistancetoCMVinpepper.Keywords:pepper;cucumbermosaicvirus;
14、molecularmarkerassistedselection黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)是世界十大植物病毒之一,可以侵染超过100个科的1200种植物1。刘勇等2调查发现,从辣椒中检出的33种病毒中,CMV的检出率高达20.29%,超过烟草花叶病毒的检出率(14.64%)而成为危害中国辣椒生产的第一大优势病毒。在辣椒生产过程中,CMV不仅影响产量,而且危害果实品质,而培育抗性品种是防治CMV最经济、最有效的方法,也是中国辣椒抗病育种的主要目标。国内外育种家通过抗性转育,已经育成了一系列中抗或耐CMV的辣椒品种,但高抗CMV的品种稀缺。由于很多新CMV病毒株
15、系可突破原有抗性,导致现有品种已无法满足产业需求。鉴定和转育新的抗CMV基因或將多个抗性基因聚合,育成广谱、持久、高抗CMV的辣椒品种是解决高抗品种稀缺最有效的方法。目前,人们已经从辣椒上鉴定出30多个抗CMV相关的数量性状座位(Quantitativetraitlocus,QTL)和基因,除单显性基因Cmr1外,其他抗性基因均未得到转育应用5。传统育种技术通过杂交和回交进行抗性基因转育,通过田间鉴定或人工接种鉴定进行抗性单株的筛选,耗时长、效率低。现代育种技术可以通过分子标记辅助选择(Markerassistedselection,MAS)技术实现抗性基因的快速积累6-7。近年来,高通量基因
16、分型结合新一代测序技术可快速检测与抗病基因紧密连锁的单核苷酸多态性标记,大大缩短了高密度图谱构建、QTL位点分析和候选基因鉴定所需的时间8-10。随着分子标记开发技术的完善和标记类型的增多,越来越多的基因得到定位和克隆,例如MAS技术在辣椒育种中的应用愈发广泛。Barka等11对辣椒上真菌、细菌、病毒和线虫等引起的相关病害的抗性基因连锁标记开发和抗性基因克隆进行了总结分析。李宁等12根据已有文献公布的抗病分子标记对209份辣椒资源进行了抗病基因检测,明确了供试种质的抗性基因。中国农业科学院蔬菜花卉研究所利用种间杂交、回交和分子标记辅助筛选技术创制出辣椒抗番茄斑萎病病毒的育种材料0516Tsw1
17、3,育成了首个抗番茄斑萎病病毒(TSWV)的甜椒品种中椒115号14。综上所述,采用分子标记辅助筛选技术能够快速鉴定种质资源的抗性基因,分子标记辅助回交可以提高抗性基因转育和抗病育种材料的创制效率,加快辣椒抗病育种的进程。本课题组前期在辣椒抗源材料灌木状辣椒PBC688(Capsicumfrutescenscv.PBC688)的2号染色体上定位到1个抗CMV的主效QTL(qCmr2.1),并开发出3个与qCmr2.1紧密连锁的InDei分子标记15。抗源材料PBC688的果实极小,果实呈椭圆形,单果质量仅为1.0g左右,在江苏地区侧枝多、首花节位高,花期和成熟期晚,无法直接用于抗CMV育种。感
18、病材料C.annuumcv.G29坐果性好,果形为长灯笼形,单果质量约为50g,首花节位低,花期和成熟期早,是一个优良的甜椒育种材料(图1)。据此,利用PBC688与G29进行种间杂交,将抗性基因qCmr2.1进行遗传转育,创制新的高抗CMV且农艺性状优良的种质材料。本研究利用上述3个InDei分子标记对创制的F6代自交系进行辅助筛选,结合人工接种鉴定和农艺性状调查,检验抗性基因的转育效率,以期筛选高抗CMV的育种材料。1材料与方法试验材料母本材料为高抗CMV的C.frutencenscv.PBC68&父本材料为高感CMV的甜椒材料G29。2013年通过父母本种间杂交获得F1代杂种(图1),连
19、续自交5代,2020年6月获得109个F6代高代自交系材料。每个自交系选取2株代表1个自交系的遗传信息,单株留种作为F7代,用于抗CMV效果的人工接种鉴定。1.2试验方法2020年2-7月在江苏省农业科学院六合动物科学基地对F6代株系进行农艺性状调查和留种;4-6月在江苏省农业科学院蔬菜研究所实验室对F6代株系进行分子标记检测;8-10月在实验室用部分F7代株系进行抗CMV效果的人工接种鉴定。DNA提取基因组DAN提取使用DNA提取试剂盒(Cat#DP3112,北京百泰克生物技术有限公司产品),按照说明书要求逐步提取DNA。使用1%琼脂糖凝胶和NanoDropOne(ThermoScienti
20、fic)检测DNA的质量和质量浓度,调整DNA的质量浓度为40ng/yl。InDel分子标记辅助筛选抗CMV基因qCmr2.1用于抗CMV基因辅助筛选的3对InDel分子标记的引物分别为InDel-2-134-F(5,-TGCTTCAGTTGAGTTGTCCA3)+InDel-2134-R(5-TAAATCCCCTTGTGGTGGCT-3)、InDel-2-140-F(5-GGTTGGTTAGCATGGGTGTG-3)+InDel-2-140-R(5-CGAAACCGAACCGTTAAAGAC-3)、InDel-2-151-F(5-ACCCACGACTTAAACTCAAAACT-3)+InDe
21、l-2-151-R(5-TCAAGAGAGAAATAGTGATGCCA-3)。Keywords:pepper;cucumbermosaicvirus;molecularmarkerassistedselection黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)是世界十大植物病毒之一,可以侵染超过100个科的1200种植物1。刘勇等2调查发现,从辣椒中检出的33种病毒中,CMV的检出率高达20.29%,超过烟草花叶病毒的检出率(14.64%)而成为危害中国辣椒生产的第一大优势病毒。在辣椒生产过程中,CMV不仅影响产量,而且危害果实品质,而培育抗性品种是防治CMV最经济、最有效的方
22、法,也是中国辣椒抗病育种的主要目标。国内外育种家通过抗性转育,已经育成了一系列中抗或耐CMV的辣椒品种,但高抗CMV的品种稀缺。由于很多新CMV病毒株系可突破原有抗性,导致现有品种已无法满足产业需求。鉴定和转育新的抗CMV基因或将多个抗性基因聚合,育成广谱、持久、高抗CMV的辣椒品种是解决高抗品种稀缺最有效的方法。目前,人们已经从辣椒上鉴定出30多个抗CMV相关的数量性状座位(Quantitativetraitlocus,QTL)和基因,除单显性基因Cmrl外,其他抗性基因均未得到转育应用5。传统育种技术通过杂交和回交进行抗性基因转育,通过田间鉴定或人工接种鉴定进行抗性单株的筛选,耗时长、效率
23、低。现代育种技术可以通过分子标记辅助选择Markerassistedselection,MAS)技术实现抗性基因的快速积累6-7。近年来,高通量基因分型结合新一代测序技术可快速检测与抗病基因紧密连锁的单核苷酸多态性标记,大大缩短了高密度图谱构建、QTL位点分析和候选基因鉴定所需的时间8-10。随着分子标记开发技术的完善和标记类型的增多,越来越多的基因得到定位和克隆,例如MAS技术在辣椒育种中的应用愈发广泛。Barka等11对辣椒上真菌、细菌、病毒和线虫等引起的相关病害的抗性基因连锁标记开发和抗性基因克隆进行了总结分析。李宁等12根据已有文献公布的抗病分子标记对209份辣椒资源进行了抗病基因检测
24、,明确了供试种质的抗性基因。中国农业科学院蔬菜花卉研究所利用种间杂交、回交和分子标记辅助筛选技术创制出辣椒抗番茄斑萎病病毒的育种材料0516Tsw13,育成了首个抗番茄斑萎病病毒(TSWV)的甜椒品种中椒115号14。综上所述,采用分子标记辅助筛选技术能够快速鉴定种质资源的抗性基因,分子标记辅助回交可以提高抗性基因转育和抗病育种材料的创制效率,加快辣椒抗病育种的进程。本课题组前期在辣椒抗源材料灌木状辣椒PBC688(Capsicumfrutescenscv.PBC688)的2号染色体上定位到1个抗CMV的主效QTL(qCmr2.1),并开发出3个与qCmr2.1紧密连锁的InDei分子标记15
25、。抗源材料PBC688的果实极小,果实呈椭圆形,单果质量仅为1.0g左右,在江苏地区侧枝多、首花节位高,花期和成熟期晚,无法直接用于抗CMV育种。感病材料C.annuumcv.G29坐果性好,果形为长灯笼形,单果質量约为50g,首花节位低,花期和成熟期早,是一个优良的甜椒育种材料(图1)。据此,利用PBC688与G29进行种间杂交,将抗性基因qCmr2.1进行遗传转育,创制新的高抗CMV且农艺性状优良的种质材料。本研究利用上述3个InDei分子标记对创制的F6代自交系进行辅助筛选,结合人工接种鉴定和农艺性状调查,检验抗性基因的转育效率,以期筛选高抗CMV的育种材料。1材料与方法试验材料母本材料
26、为高抗CMV的C.frutencenscv.PBC68&父本材料为高感CMV的甜椒材料G29。2013年通过父母本种间杂交获得F1代杂种(图1),连续自交5代,2020年6月获得109个F6代高代自交系材料。每个自交系选取2株代表1个自交系的遗传信息,单株留种作为F7代,用于抗CMV效果的人工接种鉴定。1.2试验方法2020年2-7月在江苏省农业科学院六合动物科学基地对F6代株系进行农艺性状调查和留种;4-6月在江苏省农业科学院蔬菜研究所实验室对F6代株系进行分子标记检测;8-10月在实验室用部分F7代株系进行抗CMV效果的人工接种鉴定。DNA提取基因组DAN提取使用DNA提取试剂盒(Cat#
27、DP3112,北京百泰克生物技术有限公司产品),按照说明书要求逐步提取DNA。使用1%琼脂糖凝胶和NanoDropOne(ThermoScientific)检测DNA的质量和质量浓度,调整DNA的质量浓度为40ng/yl。InDel分子标记辅助筛选抗CMV基因qCmr2.1用于抗CMV基因辅助筛选的3对InDel分子标记的引物分别为InDel-2-134-F(5,-TGCTTCAGTTGAGTTGTCCA3)+InDel-2134-R(5-TAAATCCCCTTGTGGTGGCT-3)、InDel-2-140-F(5-GGTTGGTTAGCATGGGTGTG-3)+InDel-2-140-R(
28、5-CGAAACCGAACCGTTAAAGAC-3)、InDel-2-151-F(5-ACCCACGACTTAAACTCAAAACT-3)+InDel-2-151-R(5-TCAAGAGAGAAATAGTGATGCCA-3)。Keywords:pepper;cucumbermosaicvirus;molecularmarkerassistedselection黃瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)是世界十大植物病毒之一,可以侵染超过100个科的1200种植物1。刘勇等2调查发现,从辣椒中检出的33种病毒中,CMV的检出率高达20.29%,超过烟草花叶病毒的检出率(14.
29、64%)而成为危害中国辣椒生产的第一大优势病毒。在辣椒生产过程中,CMV不仅影响产量,而且危害果实品质,而培育抗性品种是防治CMV最经济、最有效的方法,也是中国辣椒抗病育种的主要目标。国内外育种家通过抗性转育,已经育成了一系列中抗或耐CMV的辣椒品种,但高抗CMV的品种稀缺。由于很多新CMV病毒株系可突破原有抗性,导致现有品种已无法满足产业需求。鉴定和转育新的抗CMV基因或将多个抗性基因聚合,育成广谱、持久、高抗CMV的辣椒品种是解决高抗品种稀缺最有效的方法。目前,人们已经从辣椒上鉴定出30多个抗CMV相关的数量性状座位(Quantitativetraitlocus,QTL)和基因,除单显性基
30、因Cmr1外,其他抗性基因均未得到转育应用5。传统育种技术通过杂交和回交进行抗性基因转育,通过田间鉴定或人工接种鉴定进行抗性单株的筛选,耗时长、效率低。现代育种技术可以通过分子标记辅助选择(Markerassistedselection,MAS)技术实现抗性基因的快速积累6-7。近年来,高通量基因分型结合新一代测序技术可快速检测与抗病基因紧密连锁的单核苷酸多态性标记,大大缩短了高密度图谱构建、QTL位点分析和候选基因鉴定所需的时间8-10。随着分子标记开发技术的完善和标记类型的增多,越来越多的基因得到定位和克隆,例如MAS技术在辣椒育种中的应用愈发广泛。Barka等11对辣椒上真菌、细菌、病毒
31、和线虫等引起的相关病害的抗性基因连锁标记开发和抗性基因克隆进行了总结分析。李宁等12根据已有文献公布的抗病分子标记对209份辣椒资源进行了抗病基因检测,明确了供试种质的抗性基因。中国农业科学院蔬菜花卉研究所利用种间杂交、回交和分子标记辅助筛选技术创制出辣椒抗番茄斑萎病病毒的育种材料0516Tsw13,育成了首个抗番茄斑萎病病毒(TSWV)的甜椒品种中椒115号14。综上所述,采用分子标记辅助筛选技术能够快速鉴定种质资源的抗性基因,分子标记辅助回交可以提高抗性基因转育和抗病育种材料的创制效率,加快辣椒抗病育种的进程。本课题组前期在辣椒抗源材料灌木状辣椒PBC688(Capsicumfrutesc
32、enscv.PBC688)的2号染色体上定位到1个抗CMV的主效QTL(qCmr2.1),并开发出3个与qCmr2.1紧密连锁的InDei分子标记15。抗源材料PBC688的果实极小,果实呈椭圆形,单果质量仅为1.0g左右,在江苏地区侧枝多、首花节位高,花期和成熟期晚,无法直接用于抗CMV育种。感病材料C.annuumcv.G29坐果性好,果形为长灯笼形,单果质量约为50g,首花节位低,花期和成熟期早,是一个优良的甜椒育种材料(图1)。据此,利用PBC688与G29进行种间杂交,将抗性基因qCmr2.1进行遗传转育,创制新的高抗CMV且农艺性状优良的种质材料。本研究利用上述3个InDei分子标
33、记对创制的F6代自交系进行辅助筛选,结合人工接种鉴定和农艺性状调查,检验抗性基因的转育效率,以期筛选高抗CMV的育种材料。1材料与方法试验材料母本材料为高抗CMV的C.frutencenscv.PBC68&父本材料为高感CMV的甜椒材料G29。2013年通过父母本种间杂交获得F1代杂种(图1),连续自交5代,2020年6月获得109个F6代高代自交系材料。每个自交系选取2株代表1个自交系的遗传信息,单株留种作为F7代,用于抗CMV效果的人工接种鉴定。1.2试验方法2020年2-7月在江苏省农业科学院六合动物科学基地对F6代株系进行农艺性状调查和留种;4-6月在江苏省农业科学院蔬菜研究所实验室对
34、F6代株系进行分子标记检测;8-10月在实验室用部分F7代株系进行抗CMV效果的人工接种鉴定。DNA提取基因组DAN提取使用DNA提取试剂盒(Cat#DP3112,北京百泰克生物技术有限公司产品),按照说明书要求逐步提取DNA。使用1%琼脂糖凝胶和NanoDropOne(ThermoScientific)检测DNA的质量和质量浓度,调整DNA的质量浓度为40ng/yl。InDei分子标记辅助筛选抗CMV基因qCmr2.1用于抗CMV基因辅助筛选的3对InDei分子标记的引物分别为InDei-2-134-F(5,-TGCTTCAGTTGAGTTGTCCA3)+InDel-2134-R(5-TAA
35、ATCCCCTTGTGGTGGCT-3)、InDei-2-140-F(5-GGTTGGTTAGCATGGGTGTG-3)+InDei-2-140-R(5-CGAAACCGAACCGTTAAAGAC-3)、InDei-2-151-F(5-ACCCACGACTTAAACTCAAAACT-3)+InDel-2-151-R(5-TCAAGAGAGAAATAGTGATGCCA-3)。Keywords:pepper;cucumbermosaicvirus;molecularmarkerassistedselection黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)是世界十大植物病毒之一,可
36、以侵染超过100个科的1200种植物1。刘勇等2调查发现,从辣椒中检出的33种病毒中,CMV的检出率高达20.29%,超过烟草花叶病毒的检出率(14.64%)而成为危害中国辣椒生产的第一大优势病毒。在辣椒生产过程中,CMV不仅影响产量,而且危害果实品质,而培育抗性品种是防治CMV最经济、最有效的方法,也是中国辣椒抗病育种的主要目标。国内外育种家通过抗性转育,已经育成了一系列中抗或耐CMV的辣椒品种,但高抗CMV的品种稀缺。由于很多新CMV病毒株系可突破原有抗性,导致现有品种已无法满足产业需求。鉴定和转育新的抗CMV基因或将多个抗性基因聚合,育成广谱、持久、高抗CMV的辣椒品种是解决高抗品种稀缺
37、最有效的方法。目前,人们已经从辣椒上鉴定出30多个抗CMV相关的数量性状座位(Quantitativetraitlocus,QTL)和基因,除单显性基因Cmr1外,其他抗性基因均未得到转育应用5。传统育种技术通过杂交和回交进行抗性基因转育,通过田间鉴定或人工接种鉴定进行抗性单株的筛选,耗时长、效率低。现代育种技术可以通过分子标记辅助选择(Markerassistedselection,MAS)技术实现抗性基因的快速积累6-7。近年来,高通量基因分型结合新一代测序技术可快速检测与抗病基因紧密连锁的单核苷酸多态性标记,大大缩短了高密度图谱构建、QTL位点分析和候选基因鉴定所需的时间8-10。随着分子标记开发技术的完善和标记类型的增多,越来越多的基因得到定位和克隆,例如MAS技术在辣椒育种中的应用愈发广泛。Barka等11对辣椒上真菌、细菌、病毒和线虫等引起的相关病害的抗性基因连锁标记开发和抗性基因克隆进行了总结分析。李宁等12根据已有文献公布的抗病分子标记对209份辣椒资源进行了抗病基因检测,明确了供试种质的抗性基因。中国农业科学院蔬菜花卉研究所利用种间杂交、回交和分子标记辅助筛选技术创制出辣椒抗番茄斑
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