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文档简介
1、关于染色体的分带技术第一张,PPT共十一页,创作于2022年6月目的要求 了解染色体C带、G带制备的基本原理,掌握染色体C带、G带的染色技术。第二张,PPT共十一页,创作于2022年6月C带显示的实验原理DNA分子经酸、碱、盐处理可以发生不同的变化,酸处理可以使DNA分子脱嘌呤,碱处理可以使DNA变性及溶解,2SSC溶液处理可以使DNA骨架断裂并使片断溶解。在C带显示过程中,染色体臂的DNA被酸、碱、盐选择性地破坏了,着色较浅,而结构性异染色质区哉DNA结构紧密,从而保护了C带区的异染色质免受酸、碱、盐的破坏,使其容易着色,从而产生C带。第三张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验用品1器
2、材:显微镜、恒温水浴箱、载玻片、染色缸等;2试剂:0.2MHCl、5%Ba(OH)2、2SSC溶液、Giemsa染液、1/15M磷酸缓冲液等。 3材料:小鼠染色体标本第四张,PPT共十一页,创作于2022年6月方法与步骤取老化一周的染色体标本,室温条件下用0.2MHCl处理30分钟;DW冲洗三次后,转入505%Ba(OH)2中保温10-15分钟;自来水冲洗3-5分钟,再用DW充分分冲洗掉玻片上附着的Ba(OH)2;将标本放到652SSC处理60分钟,DW冲洗,空气干燥;Giemsa染色10分钟,冲洗,镜检。第五张,PPT共十一页,创作于2022年6月结果显示第六张,PPT共十一页,创作于202
3、2年6月G带显示实验原理由于构成染色体的DNA一级序列的差异,导致与之结合的蛋白质的状态也有所不同。如果染色体上某一区域DNA为重复序列,转录活性低,与之结合的蛋白质也较稳定,因此较利于染料的积累,从而显出暗带。相反,若某一区域的DNA富含转录活性的结构基因,包装它们的蛋白质也较松散,着色较浅,显明带。第七张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验用品1器材:显微镜、恒温水浴箱、载玻片、染色缸等;2试剂:0.25%胰蛋白酶、Giemsa染液、磷酸缓冲液等。 3材料:小鼠染色体标本第八张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验步骤将老化七天的染色体标本放入60温箱中烤片2小时以上;取出后放入0.25%的胰蛋白酶溶液中作用3-15秒;取出后,GKN溶液漂冼15秒,Giemsa染色15分钟,冲洗,镜检。第九张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验结果
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