基础医学病原生物学课件细菌的生理与培养

1、细菌的生理与培养细菌的理化性状一、化学组成二、物理性状 细菌的化学组成构成：水75-90%、无机盐、蛋白质、 糖、脂类、核酸元素：C、O、N、S、H、P、K、Na、Fe、 Mg、Ca、Cl特有成分：肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨 基酸、砒啶二羧酸、二氨基庚二酸细菌的物理性状光学性质：半透明颗粒透射、折射外表积：较一般生物体大一万倍带电现象：G+菌，PI 2-3、G-菌，PI 4-5半透性：细胞壁、细胞膜渗透压：G+菌，20-25个大气压、 G-菌， 5-6个大气压细菌的生长与营养一、细菌生长的环境因素二、细菌的营养类型三、细菌的营养摄取方式 细菌生长的环境因素1、营养物质2、pH3、温度4、气

2、体营养物质水碳源氮源无机盐生长因子组成细胞的组成成分提供细胞代谢的介质直接参与代谢过程降低细胞内温度维持生物大分子的天然构象合成含氮物质提供能量合成含碳物质及细胞结构提供能量维持细菌的代谢、繁殖酶或辅酶的组成成分酶的调节剂维持渗透压提供能源维持生物大分子与细胞结构的稳定性细菌生长的营养物质细菌的营养摄取方式被动扩散：简单扩散 促进扩散主动转运：蛋白转运 基团转移促进扩散蛋白转运ATPADP+Pi呼吸链基团转移HPrPEP丙酮酸ATPADP+PiHPrHPrHPrE-IIE-IIE-II磷酸糖转移酶系统PTS营养类型自养型(autotroph)异养型(heterotroph 腐生型(saprop

3、hyte) 寄生型(parasite)细菌的营养类型细菌生长的酸碱度pH值：一般病原菌的最适pH值为：*嗜中性菌、嗜酸性菌、嗜碱性菌细菌生长的温度温度：一般病原菌的最适温度为37C*嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌细菌生长的气体按气体需求不同分为：专性需氧菌 微需氧菌 兼性厌氧菌 专性厌氧菌细菌的代谢一、能量代谢二、代谢产物及其意义 细菌的能量代谢1、能量代谢的形式 2、能量代谢的主要途径 细菌能量代谢的形式发酵以有机物为受氢体有氧呼吸以分子氧为受氢体厌氧呼吸以非氧无机物为受氢体细菌能量代谢的主要途径糖酵解途径需氧呼吸途径厌氧呼吸途径细菌的代谢产物及其意义1、分解代谢产物及其意义 2、合成代谢产物及其意

4、义细菌的分解代谢产物及其意义糖酵解试验吲哚(indol)试验甲基红(methyl red)试验VP (voges-proskauer)试验枸橼酸盐利用(citrate utilization)试验尿素酶试验硫化氢试验+气泡不发酵产酸产酸产气糖发酵试验+吲哚试验+色氨酸吲哚靛基质玫瑰吲哚红色+二甲基氨基苯甲醛甲基红试验葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇pH4.5+指示剂红色指示剂黄色VP试验葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰红色OH-+含胍基化合物+枸橼酸盐利用试验+枸橼酸盐碳源碳酸盐铵盐氮源氨培养基变为碱性蓝色尿素酶试验+尿素氨培养基变碱性红色硫化氢试验+含硫氨基酸硫化氢黑色硫化物+铁离子或铅离子肠道杆菌I

5、MViC试验特性 吲哚 甲基红 V-P 枸橼酸盐埃希菌属 + + 沙门菌属 + +志贺菌属 +/ + 克雷伯菌属 +/ +/ +/ 变形杆菌属 +/ + /+ /+细菌的合成代谢产物及其意义热原质pyrogenLPS毒素和侵袭性酶色素抗生素细菌素维生素 概念：细菌合成的脂多糖，可引起人 或动物体发热。特点：耐高温消除方法：高温干烤法 吸附法 蒸馏法热原质毒素与侵袭性酶内毒素(endotoxin)：G- 菌细胞壁的脂多糖外毒素(exotoxin)：细菌在释放的毒性蛋白质侵袭性酶：细菌引起宿主机体组织损伤的酶类色 素水溶性色素、脂溶性色素金黄色柠檬色白色绿色 由微生物代谢过程中产生的一些能抑制或杀

6、死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质，称抗生素。抗生素 某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质，其作用范围比抗生素狭窄，仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。细菌素 细菌在代谢过程中产生的维生素，除供自身所用外，还能分泌到周围环境。维生素细菌的生长与培养一、细菌的生长 二、细菌的人工培养细菌的生长1、细菌的繁殖方式2、细菌繁殖的生长曲线细菌的繁殖方式革兰阳性菌：染色体复制与中介体相连中介体分裂，向两端移动细胞膜内陷形成横隔细胞壁长入肽聚糖水解酶裂解肽聚糖革兰阴性菌：染色体复制与邻近细胞膜相连细胞膜内陷分隔染色体细胞膜沿横隔内陷细胞一分为二细菌繁殖的生长曲线生长速度：人工培养条件下，20min/代

7、。培养7小时后，可达200万生长曲线：缓慢期Lag Phase 对数期Log Phase 稳定期Stationary Phase 衰亡期Death Phase小时 0 4 8 12 16 20细菌总数活细菌数细菌生长曲线缓慢期对数期稳定期衰亡期缓慢期：菌体增大，代谢活泼，为细菌大量繁殖作好 物质准备。对数期：细菌繁殖迅速，菌数呈几何级数增长，细菌 的生物学性状典型。稳定期：随有害代谢产物的增多，细菌繁殖速度减慢， 死亡数增多，细菌的生物学性状发生某些 改变，芽孢，抗生素等产生。衰亡期：死亡菌数增多，超过活菌数，细菌形态显著 改变，生理活动趋于停止。细菌的人工培养1、细菌培养基2、人工培养环境下

8、的细菌生长状态细菌培养基细菌培养基的概念细菌培养基的种类细菌培养基的概念 由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物质。细菌培养基的类型按物理状态分类： 液体培养基 固体培养基 半固体培养基按用途分类： 根底培养基 增菌培养基 选择培养基 鉴别培养基 厌氧培养基按了解之化学成分分类： 合成培养基 天然培养基液体培养基+1.5-2.5%琼脂固体培养基+0.3-0.5%琼脂半固体培养基菌落(colony)纯培养(pure culture)液体培养基斜面培养基鉴别培养基细菌动力鉴别细菌生化反响鉴别血平板巧克力平板MacConkey平板平板Sabourand平板Mycosel平板选择培养基不同细菌在MacConkey平板上形成的菌落选择培养基的应用人工培养环境下的细菌生长状态液体培养基固体培养基半固体培养基液体培养基上的细菌生长浑浊生长沉淀生长外表生长固体培养基上的细菌菌落R型菌落S型菌落培养基上的细菌菌落类型平板划线接种第二次划线区第三次划线区培养基上的菌落别离一待别离标本涂布点第一