临床微生物检验自动化进展课件

1、临床微生物检验自动化进展安徽医科大学第一附属医院王中新8/8/20221第1页，共42页。 主要内容 临床微生物检验自动化现状全自动血培养系统；全自动微生物鉴定/药敏分析系统；其他全自动微生物系统。8/8/20222第2页，共42页。一、临床微生物检验自动化现状微生物检验自动化与生化、免疫检测的自动化程度相去尚远。手工操作多：样本处理、涂片染色、接种培养、挑选致病菌、配置菌液、血清学实验。主观判断多：仪器自动化程度低、鉴定参数少，需结合细菌形态和染色性、菌落形态特征、以及多个机外补充试验结果。8/8/20223第3页，共42页。一、临床微生物检验自动化现状目前国内外常用的系统： 鉴定/药敏分析

2、系统：MicroScan 、 Vitek系列、Phoenix、Sensititre 等； 全自动血培系统：Bactec FX 及9000系列、 Bact/Alert 3D等国产仪器：8/8/20224第4页，共42页。临床微生物自动化发展的机遇国家对抗生素合理使用相关政策法规 “抗菌药物品种的选用原则上应根据病原菌种类及病原菌对抗菌药物敏感或耐药，即细菌药物敏感试验 (以下简称药敏)的结果而定。” 抗菌药物临床应用指导原则卫医发285号8/8/20225第5页，共42页。临床微生物自动化系统将在临床耐药菌的检测和抗菌药物的合理使用中发挥越来越大的作用！2011年 抗菌药物临床应用管理办法责任涉

3、及面广：实行院长责任制，挂钩临床医生的绩效，涉及医务、药学、感染性疾病、临床微生物、护理、医院感染管理及临床各个科室接受抗菌药物治疗的患者中，微生物检验样本送检率不得低于30。每季度向医院发布一次细菌耐药监测结果8/8/20226第6页，共42页。卫生部在医院分级管理实施细则中规定二级以上的医院检验科必须开展细菌培养和抗生素药敏测定（基本设备如下） 显微镜（包括暗视野）荧光显微镜*CO2培养箱*普通培养箱（37）普通培养箱（30）普通培养箱（42）烤箱*PH计厌氧缸全自动细菌分离培养系统*厌氧操作箱*普通冰箱低温冰箱*分析天平*虑菌装置高压灭菌器细菌鉴定/药敏分析仪血液自动细菌检测仪*低速离心

4、机可调移液器 注： * 条件不够者可以不具备 * 可以和其它检验室合用 * 条件不够者可以用烛缸代替，但至少备2只 8/8/20227第7页，共42页。WHO对临床微生物实验室提出的指导性方针 1、临床微生物实验室尽可能把目标集中在快速诊断方面。2、显微镜检查对建立快速的初步诊断具有很大价值。3、实验室人员必须主动与临床结合，将实验室数据转化为临床有用的信息。 8/8/20228第8页，共42页。临床微生物自动化仪器要求结果准确！检测快速！使用简便！性能稳定！8/8/20229第9页，共42页。二 、全自动血培养系统美国BD公司： BACTEC FX BACTEC 9000 9050/ 912

5、0/9240法国生物梅里埃： BacT/Alert 3D 60/120/2408/8/202210第10页，共42页。1 美国BD公司9000系列BACTEC9240240瓶位BACTEC905050瓶位BACTEC9120120瓶位8/8/202211第11页，共42页。BACTEC FX8/8/202212第12页，共42页。独有荧光增强检测技术LEDPhotodiodeMicroprocessorPositively Algorithms检测灵敏度增加8/8/202213第13页，共42页。检测动态细菌生长状况Plot Utility生长曲线Start Protocal:17/MAR/1

6、993 Time To Detection: 6.26 Hours*生长曲线8/8/202214第14页，共42页。独有的荧光增强检测技术提高检测速度及检测结果准确性每10分钟检测一次，24小时连续监测90%阳性标本可在12小时内被检测，36小时内可检测出99%的阳性标本8/8/202215第15页，共42页。多种培养瓶选择标准需氧/厌氧培养瓶树脂需氧/厌氧培养瓶树脂儿童培养瓶专利技术，培养瓶含能吸附抗生素的树脂采血量只需1-3mL,最适合儿童细菌培养含溶血素厌氧菌培养的特殊培养瓶专利技术含溶血素分枝杆菌/真菌培养瓶8/8/202216第16页，共42页。专利树脂技术吸附抗菌素进入树脂内部吸附

7、营养物质在树脂表面，促进微生物的生长 撞破红细胞从而使其内营养物质释放出来供微生物利用 撞破白细胞,使其释放被吞噬的微生物,提高检出率 扩大表面积利于微生物的生长 8/8/202217第17页，共42页。2 法国生物梅里埃8/8/202218第18页，共42页。产色检测技术细菌生化代谢 细菌生长产生 CO2CO2 降低 pH 值颜色感应器转为黄色培养瓶底的颜色感应器 含有溶解染料的硅胶 不可逆颜色改变黄色 阳性培养8/8/202219第19页，共42页。二 、全自动血培养系统血培养系统的发展应用展望理想的血培养系统应符合检出的范围更广，阳性率更高；灵敏度更高，污染率、假阳性率和假阴性率应降至最

8、低；自动化程度更强；体积更小，血液标本用量少；检验周期更短，时间更快； 成本更低。8/8/202220第20页，共42页。三、全自动微生物鉴定药敏系统美国BD公司： Phoenix-100法国生物梅里埃： VITEK- 2 Compact西门子公司： WorkAway-968/8/202221第21页，共42页。1、BD Phoenix -100最大的标本容量：对100个标本同时进行鉴定与药敏测试！适合对大样本量的同时检测！18/8/202222第22页，共42页。配套齐全的试剂独立的鉴定板GNGPPMIC/ID鉴定药敏复合板NMIC/IDSMIC/ID独立的药敏板多种板型多种抗菌药物组合8/

9、8/202223第23页，共42页。简便的设计，全面的菌库2种板条（GN/GP）快速鉴定近400种细菌革兰氏阳性球菌及杆菌革兰氏阴性发酵菌及非发酵菌新推出真菌鉴定板免费升级细菌库！不断扩大鉴定范围最简单的选板操作：仅需革兰染色8/8/202224第24页，共42页。快速而可靠的鉴定检测原理鉴定部分：LOC SUB-CODE LOC SUB-CODE LOC SUB-CODEA1 BGEN B1 MTT C1 DTAGA2DSUCB2NGUC2MAL唯一同时双重鉴定方法：比色荧光检测无需附加实验与试剂51孔鉴定实验，45种反A3A4A5A6A7A8A9A10A11A12A13DGUA3MGADF

10、RUIMNCLSTPXBKGADMNTMAATHYPAGLUB3B4B5B6B7B8B9B10B11B12B13DTREBDCELLALTBDGLULPROBLPYRFLR_CTLLPHETLTRYPHOSMETAC3C4C5C6C7C8C9C10C11C12C13DEXARARRGLPRBBDGLCLLEUHNAGFLR_CTLLARGHPHOTLHISTLISO应底物A14A15PHOLVAALAB14B15ADGLUALALHC14C15BDGALUREA16LPROTB16ESCC16NCFA17B17C17荧光检测灵敏度更高！鉴定速度更快！双重方法，结果更准确！8/8/202225第

11、25页，共42页。商业化系统药敏结果的评价是否实测真实的MIC值是否报告准确的S I R结果是否实时检测多种耐药机制8/8/202226第26页，共42页。 Phoenix-100:每种检测板所含抗菌药物的浓度按倍比稀释通过比浊+ 氧化还原指示反应实测MIC值更及时准确地检测细菌变异导致的耐药表型改变。实测真实的MIC值8/8/202227第27页，共42页。Phoenix-100对产碳青霉烯酶类细菌检测更灵敏！更全面！比较BD PhoenixTM, Vitek 2 以及 MicroScan自动系统在检测和推断肠杆菌科细菌碳青酶烯耐药机制中的作用8/8/202228第28页，共42页。2、Vi

12、tek-2-Compact8/8/202229第29页，共42页。检测卡移液管：预置的 条码有效期卡的类型批号唯一编号光学的划线标记横条薄膜密封卡64 孔预置干燥的底物8/8/202230第30页，共42页。3、MicroScan 系统组成测试板WA96SIWA40SI快速菌液接种8/8/202231第31页，共42页。MicroScan鉴定/药敏 8/8/202232第32页，共42页。功能和特点1、细菌鉴定功能2、抗生素敏感度分析功能 用药参考；耐药监测；评价新药；有助鉴定；院感调查3 检测/提示细菌的耐药机制 ESBLs；AmpC酶；-lac;MRS;VRE;HLAR8/8/202233

13、第33页，共42页。四、其他全自动 微生物系统8/8/202234第34页，共42页。1、全自动革兰染片仪革兰染色细胞离心8/8/202235第35页，共42页。应用特点-清洁、快速、经济全封闭系统（清洁、安全）一机两用，革兰染色细胞离心快速 5分钟内得到标准化结果高通量设计，每小时处理120/300张涂片雾化喷嘴，降低试剂用量（满盘12通量）8/8/202236第36页，共42页。传统手工四区划线接种PREVI Isola自动化接种8/8/202237第37页，共42页。3、全自动细菌分离培养系统样本采集管放入分离培养装置的采集管位置，分离培养装置随机放入仪器的样本位，仪器内的条码扫描仪对放入的样本类型进行自动辨认、识别。粪便和拭子样本在采集管中的磁性搅拌器的带动下，按照设定的时间被不断翻动，与采集管中的增菌液充分接触，达到良好的增菌效果；痰液样本在采集管中按照设定的时间被不断翻动，与其中的均质化液充分混合，使痰液样本充分均质化