蕙兰组织培养操作技术_第1页
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文档简介

1、蕙兰组织培养操作技术作者:高山觉来源:花木盆景花卉园艺2008年第03期利用植物组织培养大量繁殖种苗,在兰花中的应用最早。种子繁殖时,从种子萌发到开花需要6 7年。如果从亲本植株获得相同的材料,进行分 株等无性繁殖,就会缩短开花期。随着植物组织培养技术的开发,从茎尖取出到开花株只要4年左右时间,并且在短期内得 到大量繁殖。下面介绍蕙兰组培培养大量繁殖的操作顺序。1、母株的选择选择花和叶片的形态、颜色、株形、生长发育状态良好的植株。2、采芽使用茎尖作为组织培养外植体时,取新叶尚未展开、正在伸长的新芽。这是因为随着蕙兰苗生长,生长点附近的分裂组织的活性会慢慢减弱。另外,随着叶片的 展开,杂菌容易进

2、入新芽内部,从而造成接种后污染严重。3、茎尖的摘出蕙兰的叶片包住茎部分,且茎比较短。叶片基部的柔软部分,尽量不要留在茎上,一 边用解剖刀的先端切开叶片基部,一边小心地从外向里一片一片地剥去叶片。茎尖外植体的大小为了获得脱病毒植株,取茎尖0.5mm以下为好:从脱毒植株进行大 量繁殖时,取茎尖1mm2mm为好。4、培养基从茎尖获得原球茎(PLB)的初代培养基可采用京都培养基(Hyponex). Knudson C(KC)、1 /2MS培养基,不添加6-苄基嘌吟(BA)、激动素(KT)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(1BA)等植物 生长调节剂。原球茎(PLB)增殖培养基中,添加NAA1mg / L。5

3、、培养摘出的茎尖接种后放置在培养室中,温度23C光照强度1500lxz,每天光照时间为12 一16小时,1个月左右开始形成原球茎(PLB)。形成的原球茎(PLB)继代培养在液体增殖培养基中,进行振荡培养,在液体培养基中的 原球茎(PLB)不断地增殖。最初培养时的增殖率较低,培养1个月左右后再添加新鲜的液体增殖培养基,这样培养 1个月可增殖6-7倍。原球茎(PLB)增殖培养也可以采用固体培养基。在培养基更新时,充分生长的原球茎(PLB)可转入茎叶分化的培养基中;幼嫩的原球茎 (PLB)继续返回到增殖培养基中。培养不久原球茎(PLB)的绿色会不断加深,变成全部浓绿时,毛根发生,也从底部开始 分化出根。当苗长大后,可进行驯化移栽。6、病毒检测侵染蕙兰的病毒有建兰花叶病毒(Cymbium mosaic virus: CyMV)、齿兰环斑病毒(Odom toglossum Hng spot virua: ORSV)、兰花斑点病毒(Orchidfleck vir

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