风味物质提取方法

1、溶剂辅助风味蒸发（SAFE）：是一种从复杂食品基质中温和、全面地提取挥发性物质的方法，是德国 W.Engel等在1999年发明的。SAFE系统是蒸馏装置和高真空泵的紧凑结合，样品中的热敏性挥发性 成分损失少，萃取物具有样品原有的自然风味，特别适合于复杂的天然食品中挥发性化合物的分离分 析。顶空分析方法（HS）：顶空分析是密闭容器中的样品在一定温度下，挥发性成分从食品基质中释放到 顶空，平衡后，再将一定量的顶空气体进行色谱分析。顶空分析可以专一性的收集样品中易挥发的成 分，避免了冗长烦琐的样品前处理过程及溶剂对分析过程带来的干扰，因此在气味分析方面有独特的 意义和价值。顶空分析方法分二类：静态顶

2、空采样（SHS）是直接取顶空物进样，受容器温度和平 衡时间等因素的影响。SHS的样品制备简便，不用试剂，采集组分无干扰，但由于不同的香气组分挥 发性不同，其存在于容器顶空中的含量会不同，这种方法有时必须进行大体积的气体进样，会影响色 谱的分离效果，因此仅适于高度挥发性或高含量组分的检测。动态顶空（DHS）又称吹扫捕集技术， 是指用一种惰性气体（如高纯氮气）流从热的恒温样品中将顶空挥发性被分析物连续地“吹扫”出来， 再将挥发性组分加以富集，最后将抽提物进行脱附分析。这种分析方法不仅适用于复杂基质中挥发性 较高的组分，对浓度较低的组分也同样有效，具有取样量少、受基体干扰小、容易实现在线检测等优 点

3、，但是此系统提取步骤繁琐、效率低下、费用也较高。蒸馆法:水蒸气蒸馅法属于传统的提取方法，该方法只适用于具有挥发性的，能随水蒸气蒸馏而不 被破坏，与水不发生反应，且难溶或不溶于水的成分的提取。水蒸气蒸馏法提取进程时间长、温度高、 体系开放，其进程易造成热不稳固及易氧化成分的损坏及挥发丧失，对部分组分有损坏现象。同时 蒸馅萃取法（SDE）：是一种集蒸馏与萃取于一体，收集挥发性、半挥发性成分的有效方法。但该方法 操作繁琐、费时，溶剂和样品消耗量大，制备时间长，因此效率低下，而且长时间高温沸腾会引起热 降解，产生一些降解物。固相微萃取（SPME）： SPME与以往分析食品中挥发性化合物的常用方法相比，

4、将萃取、浓缩、解吸、 进样等功能集于一体，具有不使用溶剂、操作简单、成本低、检测速度快、灵敏度高、能够尽可能减 少被分析的香气物质的损失等优点。该方法不足是回收率低，不同批号萃取头重复性差和纤维头易损 坏等。吹扫捕集技术适用于从液体或固体样品中萃取沸点低于200C,溶解度小于2%的挥发性或半挥发性有机物。动态顶 空法作为样品的无溶剂的前处理方式，对环境不造成二次污染，而且具有取样量少、富集效率高（检出限比静态顶 空低10100倍）、受基体干扰小及容易实现在线检测等优点，广泛用于食品与环境监测等部门。操作方法：摘自-动态顶空进样GC/MS法测定不同酒龄绍兴酒的挥发性醛类化合物1.1仪器与试剂美国

5、 Agilent6890 plusGC/5973 N M S 气质联用仪； 美国Tekmar3100型动态进样浓缩器，配有Tenax捕集 管，异戊醛、糠醛、油酸乙酯由美国Sigma提供，苯甲 醛、乙酸正戊酯为分析纯试剂。L2分析条件气质联用的分析条件:HP-INNOW AX毛细管柱 （30 m X）.25 m m X）.25 um ）;载气为高纯氮气，10 psi;柱 温：初始温度40“C,保持2 m in,以5莒而in升至80 C, 再保持6 min,再以10 Vmin升至220 X?;分流比为 20 1;离子源温度230 X?,四极杆温度150 X?,EI源，电 子能量70 eV ,选择离

6、子采集（SM ），选取定量离子为异 戊醛58,糠醛96,苯甲醛106。吹扫捕集条件：捕集温度30 C;吹扫时间40 min; 空吹2 m in;预解吸温度为175 C,解吸温度180 C ;解 吸时间2 m in；烘烤温度300 C :烘烤时间10 m in, 1.3标准贮备液的配制分别精确称取异戊醛10.0 mg,糠醛lO.Omg,苯甲 醛10.0 m g于100 mL容量瓶，用15 %乙醇溶液稀释至 刻度，配制成浓度均为 网的混会林准储备液。1.4样品前处理精确吸取黄酒样品5.0 mL于100 mL容量瓶中，加 入消泡剂5 uLt加入1000 m g/L乙酸正戊酯内标溶液 （溶剂为15%乙

7、醇溶液）0.1 mL,以蒸慵水稀释至刻度。 摇匀后，取稀释样品5.0 mL,注入动态进样浓缩器中进 行分析测定，2.1测定体系中各组分间的影响绍兴酒测定体系中除水外，含量最大的是乙醇，样 品虽经稀释，仍为非理想溶液；样品中乙醇含量的变化 对各组分间的测定结果有一定的影响，因此，我们在考 察方法线性、精密度、回收率试验时调整待测溶液的乙 醇浓度以克服基质效应，2.2泡沫的影响黄酒在气提时泡沫较多，过滤可去除一部分消泡, 但在吹出过程中仍有许多泡沫，并沿管壁上升进入转移 管线，而使管线发生污染。为克服这一缺点，选择采用油 酸乙酯作为消泡剂经实践，油酸乙酯具有良好的消泡 效果，对测定不产生干扰。2.

8、3空吹时间的选择挂品厕定时会佳直水慈遥的吹出,丕11王玉二盅 的 吸附,会绘色高萤去困避,芸且湿度的增加会引起峰面 程的变化登丢去峰耳 我们选择空吹时间2 m in,虽延长 了分析时间，但减少了水的峰面积且提高了信号质量， 2.4线性试验及检出限准确吸取混合标准储备液（按L3方法）0, 0.1 ni L, 0.5 m L, 1.0 m L, 1.5 m Lt 2.5 m L 于 6 个 10 m L 容量瓶， 用15 %乙醇-水溶液定容，分别精确吸取5.0 m L按1A 操作方法进行分析，以峰面积比（X）对相应组分的浓度 比W）进行线性回归分析，得线性回归方程、相关系数丁、 线性范围和检出限L

9、OD,分别为：异 戊醛：Y 二54.64X -L40,1=0.9990,1 25 m g/L, LO D :0.33 m g/L ;糠 醛：Y 二36L02X+1.69,1=0.9955, 1 25 mg/L, LO D :0.69 m g/L ;苯甲醛:Y =53.19X +1.78, i=0.9985,1 25 mg/L, LO D :0.87 m g/L “ 2.5精密度及回收率试验选择5年陈绍兴酒作为样品，精确吸取5.0 m L按 1操作方法进行前处理，测定考察方法的精密度；精确 吸取处理酒样4.0mL,3.0niL置于2个100 m L容量瓶 中，分别加入混合标准储备液（按1.3方法

10、）0.15 mL, 0.25 mL,以下操作按1.4操作方法进行测定来检验方法 的准确度，结果见表1.表1 3种组分的精密度（n二6）和回收率（n二3）测定项目本底值（mg/L）标准 偏差 （mg/L）相对标准偏差（%）加标量平均检平均 回收率 （%）（岫出量（岫异戊醛2. 350. 114. 6815. 025. 024. 2230. 819& 8095, 04糠醛12, 690, 2L 8115. 025. 067. 2460. 64109. 8790. 28苯甲醛6. 280. 294. 6215. 025. 039, 5944. 7096.47103. 442. 3. 2.1静态顶空法

11、分离提取样品中挥发性风味物质移取姑1鲜牛乳放人自动静态顶空专用的顶空样品岐中. 1ml内标溶液 限L)和2? gNaC，j EC F保持min，燃后使用自动进样器抽取1ml顶空挥发性 网味成分.进样至GC-MS ffi fi分析.2, 3, 2. 2吹扫捕集法分离提取样品中挥发性风味物质移取lOmli?牛乳放人专用的顶空样品临中,加入1ml内标溶液L0 缺和运用自动吹扫捕集派缩仪将顶空挥发性风味物质吹扫出来.并吸附到一装有Ten赤吸附村料 的毛细管捕集器上。样品在6MC温度条件下加玮10mm,然后通人包气l氮气纯度大于 99 999%.流速lOml/min 咪扫60 min，完成吸附过程。最后

12、通过20j3C. 4 min快速热解 析将挥发性风味物卮解析下来.同时注 GC-MS iS行分析。2. 3. 2.3顶空固相微萃取法分离提取牛乳中挥发性风味物质移取1鲜牛乳至15ml贝空瓶|带1封垫中.加入I ml内标溶( 0 05pg/L :(: 2 5 g N迎L旋紧盖于密封。样品在60 C水圭中平衡60mm,然后将10mm长的PDMS纤维 ;k 氽提*捉样 顼涕3、卬1叫项；：1 ；,i.C=.了“：叶口，匚厂,星 取头，进样GC-MS M行分折 PW 辎头使用前先在* ；相色谱进样 2503C活化30m皿2. 2主要仪器气相色谱-质朴任用彼An k：-11 队洒：）-,七|-11 7

13、77A-：-|右细管邑谱柱Ag lenL 二口美静态顶空傥AgJcnl HSNA灾扫捕集浓缩位O 1002. 3一 4保鲜乳中挥发性物质的风味评价I本试验采用评定检出物质风味强度的方法对巴氏杀菌乳和UHT乳中挥发性物质进行风味评价。风味强度(Fu)是表征某种物原对风味贡献程度的大小，由下式表示风味强度(Fu)二风味物质浓度/风味阕值如果某物廉Fu值)1。表示.国味显著Fu值在，表示有风味；Fu 3的9种风味化合物的标准品1 pL, 再加入内标物2-甲基-3庚酮IpL,用正己烷定溶至1 mL,则得到标准溶液。再将相同量的内标物加入到待 测样品中，组成样品溶液。在相同的条件下两种溶液 分别进样,先根据标准溶液和内标物的浓度和峰面积 之间的关系求出一个校正因子，再用样品溶液和内标 物的峰面积之比求出的待测组分的浓度乘以校正因子 则求出校正后的待测组分的浓度，计算公式如下】f= Ci/j4i（3）