中药化学课件-陈勇-黄酮类化合物

1、 中药化学药学院中药化学教研室陈 勇黄酮类化合物黄酮类化合物是一类重要的含氧杂环天然有机化合物。 分布广泛：高等植物中常见 存在形式：苷元、苷 活性多样：抗氧化、心血管、保护肝脏、抗炎、 抗癌、雌激素作用等概 述经典含义：主要是指根本母核为2苯基色原酮类的化合物；现代定义：泛指二个苯环A环和B环通过三个碳原子相互连接而成的一系列化合物的总称，即具有C6-C3-C6结构的一类化合物的总称。概 述黄酮类化合物一、苷元的结构与分类 分类依据 1三个碳的饱和程度 2三个碳链是否成环 3C环上羟基取代位置3位羟基取代与否 4B-环连接位置(2、3-位) 5C-4是否有羰基等分 类黄酮B环连接位置C环羟基

2、取代位置黄酮醇异黄酮三碳链是否成环C-4是否有羰基查耳酮花色素黄烷-3-醇三碳氧化程度二氢黄酮二氢异黄酮二氢黄酮醇二氢查耳酮分 类木犀草素，抗菌作用黄芩苷，清热解毒槲皮素：R = H芦 丁：R = 芸香糖 具有Vp样作用， 恢复毛细血管的正常弹性 。最常见的黄酮醇类化合物 黄酮类 flavones 黄酮醇类 flavonols 分 类9 二氢黄酮类 flavanones 二氢黄酮醇类 flavanonols 橙皮苷 Vp样作用 甘草素 对溃疡有抑制作用 水飞蓟素 保肝作用分 类 异黄酮类 isoflavones 二氢异黄酮类 isoflavanones 鱼藤酮 农业杀虫剂大豆异黄酮分 类大豆异

3、黄酮 进入20世纪90年代，国内外的生物学家、化学家、医学家被一种神奇 的物质所吸引，这存在于大豆中的神奇物质被称作“大豆异黄酮。 流行病学资料说明，长期食用大豆的东南亚人群中，癌症、动脉粥样硬化等心血管病症的发病率明显低于西方。在日本，乳腺癌的发病率是美国的1/4；妇女更年期综合症的发病率只有美国的1/3；这个现象已引起科学家的注意。经研究发现，大豆中含有一种结构与雌激素相似的物质叫异黄酮，它是大豆中的一种非营养成份，具有生理活性，能产生类似雌激素的效应，而被称之为“植物雌激素。 对身体雌激素的双向调节作用。当人体内雌激素水平低时，大豆异黄酮占据雌激素受体，发挥弱雌激素效应，表现出提高雌激素

4、水平的作用。当人体内雌激素水平高时，大豆异黄酮以“竞争方式占据受体位置，同样发挥弱雌激素效应，但由于它的活性仅为体内雌激素的2%，因而从总体上表现出降低体内雌激素水平的作用，这就是著名的大豆异黄酮对雌激素的双向调节作用机制。 分 类大豆异黄酮对身体雌激素的双向调节作用 抗癌作用 降低胆固醇，预防动脉硬化 改善骨质疏松 预防冠心病 大豆异黄酮美国的食品药物管理局FDA把大豆列为能够“真正降低心脏病危险的食品之一 分 类12 植物雌激素雌二醇12 分 类 查耳酮类 chalcones 花色素类 anthocyanidins矢车菊素：R1 = OH, R2 = H飞燕草素：R1 = R2 = OH天

5、竺葵素：R1 = R2 = H锦葵花素：R1 = R2 = OCH3分 类 黄烷醇类 黄烷-3-醇 R = H黄烷-3,4-二醇 R = OH儿茶素：抗癌活性麻黄宁A/B：抗癌活性分 类 橙酮类 aurones 较少见黄花波斯菊花：硫黄菊素酮类 xanthones异芒果苷：止咳祛痰芒果叶和知母叶分 类分 类双黄酮 构成双黄酮的单黄酮分别是黄酮和二氢黄酮；是由两分子黄酮、或两分子二氢黄酮、或一分子黄酮和一分子二氢黄酮通过C-C或C-O-C键方式连接而成。多局限分布在裸子植物。如银杏的双黄酮是由两分子黄酮通过C-C键连接的。分 类其他特殊黄酮类化合物水飞蓟素既属于黄酮又属于木脂素榕碱既属于黄酮又属

6、于生物碱分 类氧苷碳苷 黄酮 异黄酮黄酮苷分 类常见重要黄酮苷中糖的结构芸香糖新陈皮糖龙胆双糖槐糖分 类黄酮类化合物的生理活性一对心血管系统的作用 1、降低血管脆性及异常的通透性 如：芦丁、橙皮苷 2、扩冠作用 如：槲皮素、葛根素 3、降低血脂及胆固醇的作用二抗肝脏毒活性 如：水飞蓟素、儿茶素三抗炎作用 如：芦丁、羟乙基芦丁、橙皮苷-甲基查尔酮四雌激素样作用 如：染料木素、大豆素等分 类芦丁片 芦丁是从中国所独有的国槐的花蕾中提取的植物药，也称维生素P，具有降低毛细血管的异常通透性和脆性的作用，是心脑血管保护药，国内用于心脑血管药品制剂的主要成分，国外还大量用于食品添加剂和化装品。 曲克芦丁片

7、(羟乙基芦丁片) 毛细血管保护药。具有防止血管通透性异常升高，抑制红细胞和血小板凝集，改善微循环等作用。可用于闭塞性脑血管病，中心性视网膜炎、动脉硬化、冠心病、堵塞前综合症、血栓性静脉炎等疾病。 分 类黄酮类化合物的生理活性五抗菌作用 如：木犀草素、黄芩素、黄芩苷六抗病毒作用 如：槲皮素、山柰酚等七泻下作用 如：营实苷A八解痉作用 如：异甘草素、大豆素等九其它作用 止咳、祛痰、平喘等作用分 类黄酮类化合物一、性状1 、形态 黄酮类化合物多为结晶形固体，少数苷类为粉未状 2、旋光性 苷元？ 一般没有，除了C环氢化苷？有，糖上有手性C原子3、荧光 颜色与结构有关，C环氢化没有理化性质4、颜色1颜色

8、与结构中是否存在交叉共轭有关。苯甲酰系统吡喃酮环桂皮酰系统理化性质灰黄黄色浅黄色橙黄色灰黄黄色无色无色2黄酮和黄酮醇在C-7和C-4位引入-OH及-OCH3后 颜色加深，其他位置影响小。理化性质3花色素及其苷元颜色随pH不同而改变。4、颜色pH8.5 显兰色。pH 非平面性分子 平面性分子7、4-OH因处于交叉共轭系统的端基，较其它位置的-OH极性大理化性质4、苷上糖的数目和位置与溶解度1苷亲水与糖数目 糖数目多亲水性强。原生苷大于次生苷。2苷亲水与糖的位置 3-OH苷化的亲水性大于7-OH苷化的亲水性。如棉黄素理化性质三、酸碱性1、酸性7,4-二羟基 7或4-羟基一般酚羟基5-羟基5%NaH

9、CO3 5%Na2CO3 0.2%NaOH 4%NaOH用于pH梯度别离理化性质注意1：二氢黄酮和异黄酮的4-OH 注意2：不是所有黄酮母核上的羟基都是酚羟基。5%NaHCO3 5%Na2CO3理化性质2、碱性H+在浓硫酸或浓盐酸溶液中表现碱性。生成 盐，难溶有机溶剂，不稳定，加水稀释，黄酮又游离。 呈碱性与-吡喃环上的醚氧原子有关。理化性质四、显色反响及其应用一复原反响1、盐酸-镁粉或锌粉反响1反响对象 黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇浓盐酸2阳性判断依据 反响升起泡沫呈红色，为阳性。3应用 用于上述四种黄酮与其它黄酮的鉴别。理化性质2、四氢硼酸钠钾反响1反响试剂 四氢硼钠、盐酸2鉴别对象

10、 二氢黄酮类化合物3反响现象 红紫 理化性质练习-鉴别(化学方法)ABCD理化性质二金属盐类试剂的络合反响5-羟基、4-酮基3-羟基、4-酮基邻酚羟基常见的金属离子：铝盐、锆盐、镁盐、锶盐等。理化性质1、三氯化铝反响反响试剂：鉴别对象：反响现象：反响机制： 注意：1%AlCl3-EtOH具3-OH，4 C=O、5-OH，4 C=O、邻二酚的黄酮邻二OH络合不稳定，加酸后即分解可见光下黄色加深，紫外下鲜黄色荧光加深4-OH黄酮醇、7,4-二OH黄酮醇天蓝色荧光。铝的络合物理化性质1 2 3 4 5 取本品粉末2g，加甲醇50ml,加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至干，加10盐酸溶液10ml，在水浴

11、中加热水解1小时，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取槲皮素对照品、山奈酚对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录 B试验，吸取上述两种溶液各2l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯乙酸乙酯甲酸5：2：1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5三氯化铝溶液，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，见图3。理化性质2、锆盐-枸橼酸反响反响试剂：鉴别对象：反响现象：2% ZrOCl2/ EtOH和 2

12、%枸橼酸/ EtOH检查黄酮中是否存在3-OH或5-OH样品黄色2%枸橼酸2%ZrOCl2有3-OH和/或5-OH3-OH或3，5-二OH无3-OH，但有5-OH黄色不减褪黄色减褪理化性质 3、Mg(Ac)2反响反响试剂：鉴别对象：反响现象：1% Mg(Ac)2-EtOH区别二氢黄酮(醇)与其它类黄酮二氢黄酮(醇)：天蓝色荧光 其它黄酮呈黄褐色荧光理化性质4、氨性氯化锶反响1试剂2反响对象3现象4应用氨水+甲醇+氯化锶具有邻二酚羟基的黄酮。绿色至棕色乃至黑色沉淀 鉴别黄酮结构上的邻酚羟基理化性质练习-化学鉴别化合物理化性质三硼酸显色反响1、试剂2、反响对象酸性条件，硼酸可见光-黄色紫外光 -黄

13、绿色荧光3、显现 用于鉴别黄酮结构上的5-OH和查耳酮上的6-OH存在理化性质查耳酮二氢黄酮OH-H+同分异构体橙黄色无色四碱性试剂显色反响反响试剂：氨水/氢氧化钠对象/现象：黄酮 -黄橙 黄酮醇-黄/棕色(空气) 二氢黄酮-黄橙/红紫 异黄酮-黄 邻三OH黄酮-兰绿理化性质1、以下黄酮中为无色的黄酮是 A、黄酮醇 B、查耳酮 C、二氢黄酮醇 D、异黄酮 E、花色素2、A、黄酮 B、二氢黄酮 C、异黄酮 D、黄酮醇 E、黄烷-3-醇1黄芩苷和黄芩素属于A2儿茶素属于E3大豆素属于C4橙皮苷B3、以下化合物呈黄色的是C A、橙皮苷 B、杜鹃素 C、木犀草素 D、葛根素 E、柚皮素4、以下化合物酸

14、性最强的是A A、槲皮素 B、橙皮苷 C、黄芩素 D、橙皮苷元 E、槲皮素-7-葡萄糖苷5、可以区别黄酮与二氢黄酮的反响是 A、盐酸-镁粉反响 B、锆盐-柠檬酸反响 C、四氢硼酸钠反响 D、氯化锶反响 E、三氯化铝反响CC理化性质6、A、查耳酮 B、黄酮和黄酮醇 C、花色素 D、二氢黄酮 E、异黄酮1随pH不同而改变颜色的是 2自身无色，但在碱液中变为橙色的是 7、黄酮类化合物分类的依据是 A、中央三碳链的氧化程度 B、苯环取代的羟基情况 C、4位是否具有羰基 D、B环连接位置 E、三碳链是否成环8、黄酮类化合物的颜色主要取决于分子结构中的 A、酚羟基 B、色原酮 C、酮基 D、苯环 E、交叉

15、共轭体系9、水溶性最大的黄酮苷元是 A、黄酮醇 B、查耳酮 C、花色素 D、黄烷 E、黄烷醇10、能溶于5%碳酸氢钠水溶液的化合物是A A、木犀草素 B、水飞蓟素 C、黄芩素 D、汉黄芩素 E、橙皮苷元CDACDEEC理化性质11、黄酮母核上酚羟基的酸性以5-OH为最弱的原因是 A、p-共轭效应 B、吸电子诱导效应 C、供电子效应 D、交叉共轭效应 E、分子内氢键效应12、黄酮类化合物可与强无机酸形成盐是由于其分子中含有 A、羟基 B、羰基 C、双键 D、氧原子 E、内酯环13、某中药提取液不加镁粉，只加盐酸即产生红色，那么提示可能含有 A、黄酮 B、黄酮醇 C、花色素 D、二氢黄酮 E、异黄

16、酮14、山柰酚和槲皮素的鉴别用A A、SrCl2/NH3 B、Mg-HCl C、AlCl3 D、AlCl3/HCl E、MgAc2 15、黄酮类化合物加2%ZrOCl2甲醇液显黄色，再参加2%枸橼酸甲醇溶液，黄色显著消褪，该黄酮类化合物是 A、3-羟基黄酮 B、4,7-二羟基异黄酮 C、5-羟基黄酮 D、4,7-二羟基黄酮 E、7-羟基二氢黄酮EDCC理化性质黄酮类化合物提 取原理：黄酮类化合物的溶解性和酸性 相似相溶与酸碱理论提取：苷元：极性小的溶剂，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等回流提取苷及极性大的苷元： 用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇-水加热提取 极性稍大的苷元一般指：羟基黄酮、双黄酮、 橙

17、酮、查尔酮多糖苷类：一般用沸水提取 水或醇-水，加热提取提取液浓缩，加3-4倍醇醇水液沉淀水杂浓缩，回收醇，加水水 液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取石油醚层氯仿层乙酸乙酯层正丁醇层水层叶绿素等脂溶性成分黄酮苷元大极性苷元小极性的苷黄酮苷多糖蛋白质药 材1、溶剂提取法 2、碱提酸沉法 利用黄酮苷元具有酸性，可溶于碱水，难溶于酸水的性质提取黄酮苷元。常用的碱水：稀氢氧化钠溶液、石灰水 花、果药材提取黄酮最适宜采用石灰乳或石灰水。石灰水的作用？提 取槐花米0.4%硼酸水溶液煮沸15min,滴加石灰水, pH 89提取液加盐酸, pH 5沉淀水洗芦丁注意： a 当分子中有邻二酚羟基时，可加硼

18、酸保护。 b 碱水浓度不可过高，以免破坏黄酮母核 c 酸化时，酸性不可太强，以免生成烊盐而溶解提 取极性酚羟基酸性分子量官能团溶剂法硅胶、氧化铝色谱聚酰胺色谱pH梯度葡聚糖凝胶化学别离分 离一柱色谱法1、硅胶柱色谱应用范围： 主要别离小极性和中等极性的化合物，应用最为广泛。 异黄酮、二氢黄酮醇、高度甲基化乙酰化的黄酮及黄酮醇 多羟基黄酮、黄酮醇及其苷类：硅胶加水去活化吸附规律： 极性大吸附能力强e g ： A 苷元 B 二糖苷 C 单糖苷 Rf：A C B分 离原理：氢键吸附作用洗脱规律：先后母核上羟基增加，洗脱顺序递减羟基数目相同时，有缔合羟基 无缔合羟基苷元相同：三糖苷 双糖苷 单糖苷 苷

19、元 不同类型黄酮类化合物的洗脱先后顺序为： 异黄酮二氢黄酮醇黄酮黄酮醇。分子中芳香程度高、共轭双键多，那么聚酰胺对其的吸附力强，故难于洗脱。应用范围：适合各种类型的黄酮类化合物，包括苷、苷元、 查耳酮及二氢黄酮2、聚酰胺柱色谱分 离溶剂洗脱能力 水甲醇丙酮稀碱甲酰胺二甲基甲酰胺槲皮素 氯仿:甲醇 (7：3) 聚酰胺柱层析 槲皮素 芦丁分 离聚酰胺“双重色谱原理 正相色谱 反相色谱聚酰胺：极性固定相极性酰胺基团 洗脱剂：有机溶剂氯仿-甲醇，极性小先洗脱：游离黄酮苷元，极性小 Rf值： 苷元 苷 非极性固定相非极性脂肪链含水溶剂甲醇-水，极性大 苷极性大柱色谱别离苷元 流动相醇极性时为正相聚酰胺

20、固定相聚酰胺脂肪链极性 7或4-OH 其它一般酚-OH 5-OH 5%NaHCO3 5%Na2CO3 0.2%NaOH 4%NaOH 分 离乙醚液脂杂乙醚液乙醚液乙醚液游离总黄酮乙醚液碱液(3或5-OH黄酮)碱液(一般酚OH黄酮)碱液(7,4-二OH黄酮)碱液(7或4-OH黄酮)5% NaHCO35% Na2CO30.2% NaOH4% NaOH梯度pH萃取法分 离四特殊官能团分 离原理：利用分子中某些特定官能团性质进行别离 具有邻二酚羟基的成分，用醋酸铅沉淀 不具有邻二酚羟基的成分，用碱式醋酸铅沉淀 具有邻二酚羟基的黄酮类化合物还可以与硼酸反响形成溶于水的硼酸络合物，可以与不具有邻二酚羟基的

21、其它黄酮类化合物别离1、常用碱提取酸沉淀法的是 A、黄酮类 B、甾体皂苷 C、生物碱 D、香豆素 E、羟基蒽醌2、在聚酰胺色谱上对黄酮类化合物洗脱能力最弱的溶剂是 A、95%乙醇 B、丙酮 C、水 D、甲酰胺 E、碱水3、用聚酰胺层析别离以下黄酮苷元，以醇-水混合溶剂洗脱，最先洗脱下来的是 A、黄酮 B、二氢黄酮醇 C、查耳酮 D、黄酮醇 E、异黄酮4、从总黄酮乙醇浸膏中萃取黄酮单糖苷，用 A、石油醚 B、乙酸乙酯 C、氯仿 D、乙醚 E、苯ADECEB练 习5、假设提取黄酮多糖苷，最常用的提取溶剂是 A、沸水 B、酸水 C、乙醇 D、醋酸乙酯 E、氯仿6、当药材为花或果实时，采用碱溶酸沉淀提

22、取黄酮类化合物，常选用的碱液为 A、5%碳酸氢钠液 B、5%碳酸钠液 C、饱和石灰水 D、1%氢氧化钠液 E、10%氢氧化钠液7、别离黄酮类化合物的方法有 A、溶剂萃取法 B、聚酰胺吸附法 C、pH梯度法 D、硼酸络合法 E、离子交换树脂法ACABCD练 习从柠檬果皮中别离降血压有效成分提取别离实例1使要得到的化合物溶解，而使蛋白质、黏液质等大极性成分形成沉淀除去 溶剂萃取法铅盐沉淀法凝胶色谱法硅胶色谱法除去Pb，生成PbCO3 提取别离实例1满山红化学成分的提取别离 提取别离实例2黄酮类化合物 一 色谱法的应用二 UV三 1H-NMR四 13C-NMR五 MS结构鉴定一、黄酮类化合物的检识颜

23、色：多呈黄色母核检识： 盐酸-镁粉反响 黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇 四氢硼钠反响 二氢黄酮醇类取代基团检识：锆盐-枸橼酸反响 3-OH、 5-OH黄酮鉴别 氨性氯化锶反响 邻二酚羟基理化检识结构鉴定硅胶TLC：用于分析与鉴定弱极性黄酮类化合物。展开剂：甲苯-甲酸甲酯-甲酸(5:4:1)，苯-甲醇，氯仿-甲醇等。聚酰胺TLC： 适合于含游离酚OH的黄酮及其苷类的分析。 聚酰胺对黄酮类化合物吸附能力强，大多数展开剂中含有醇、酸或水。纸色谱PC： 适用于各种黄酮类化合物及其苷类的分析色谱法一、黄酮类化合物的检识结构鉴定色谱法83第一相展开采用醇性展开剂如: BAW n-BuOH: HOAc:

24、H2O=4:1:5上层 TBA t-BuOH: HOAc: H2O=3:1:1 水饱和n-BuOH层析行为: Rf值: 苷元单糖苷双糖苷一般:苷元在以上，而苷那么小于。分配作用第二相展开采用水性展开剂 如：26% HOAc水溶液 3% NaCl 水溶液 HOAc:浓HCl:H2O= 30: 3 : 10层析行为: 连接糖链越长, Rf 越大(0.5); 苷元Rf较小，有的留在原点。吸附作用ABCDABCD苷元苷元纸色谱结构鉴定色谱法双向PC 第I向 醇性展开剂 第II向 水性展开剂BAW、TBA、水饱和正丁醇 28%HAc、3%NaCl、1%HCl 正相色谱 反相色谱固定相水极性 流动相 *有

25、认为是吸附原理？Rf规律：极性小的化合物Rf大 极性大的化合物Rf大 苷元以上 单糖苷 双糖苷以下 苷元中，平面型分子 非平面型分子 Rf规律与左边相反 母核相同，2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黄酮 苷元的别离鉴别黄酮苷及花色素类 结构鉴定色谱法苷元:平面型分子: 黄酮(醇)、查耳酮的Rf小, 几乎留在原点不动 Rf 0.02非平面型分子: 二氢黄酮(醇)、二氢查耳酮的Rf大, 因亲水 性较强 层析检查方法: 观察荧光,用紫外光灯照射看到有色斑点，NH3处理产生明显的色变。 用2%AlCl3甲醇液喷雾,UV灯下呈亮黄色荧光斑点。双向纸层析结构鉴定色谱法一般步骤： 1 待测样品在甲醇中

26、的UV光谱 2 待测样品在甲醇中参加各种诊断试剂后的UV光谱 诊断试剂：NaOCH3 , NaOAc, NaOAc/H3BO3, AlCl3, AlCl3/HCl 3 苷类水解前后的UV光谱，确定糖的连接位置及甙元结构。 二、UV光谱结构鉴定UV苯甲酰基带II：240280nm桂皮酰基带I：300400nm1、甲醇中的UV光谱结构鉴定UV两者UV光谱图形相似，但带I位置不同。整个母核上氧取代程度越高，那么带I将向长波方向位移红移。 a. b. 黄酮、黄酮醇304-350 nm358-385 nm结构鉴定UV带II吸收峰为主峰，带I很弱，常在主峰的长波方向有一肩峰。c.d.异黄酮、二氢黄酮、二氢

27、黄酮醇270-295 nm245-270 nm结构鉴定UV共同特征是带I很强，为主峰而带II那么较弱，为次强峰。带I的位置不同。e. f.查耳酮、橙酮类340-390 nm370-430 nm结构鉴定UV91峰形带II（240285nm，苯甲酰系统）带I（300400nm，桂皮酰系统）类型取代240-285304-350黄酮类OH取代可以使相应的带I或I I红移，环具有, 4羟基，带II为双峰328-385黄酮醇类（3-OR）352-385黄酮醇类（3-OH）245-270300-400异黄酮类B环OH和OMe对带I影响不大270-295二氢黄酮220-270340-390查尔酮类2-OH使带

28、I红移370-430橙酮类带I有3-4个小峰结构鉴定UV2、诊断试剂在黄酮、黄酮醇类结构测定中的应用 甲醇钠(NaOCH3) 乙酸钠(NaOCOCH3) 醋酸钠/硼酸(NaOCOCH3/H3BO3) 三氯化铝(AlCl3) 三氯化铝/盐酸(AlCl3/HCl)结构鉴定UV甲醇钠(NaOCH3)-4-OH带I 红移40-60 nm 强度不降 有4-OH强度下降 有3-OH,无4-OH含有3,4- 二羟基或3, 3, 4- 三羟基的黄酮类，或其它邻二羟基，吸收带随测定时间延长而衰退结构鉴定UV乙酸钠(NaOCOCH3)-7-OH带红移5-20 nm对碱敏感的基团存在，吸收带随测定时间延长而衰退结构

29、鉴定UV醋酸钠/硼酸(NaOCOCH3/H3BO3)-邻二酚OH 在醋酸钠碱性下，邻二酚OH与硼酸络合，引起峰带红移。B环有邻二酚羟基：带红移1230nm，A环有邻二酚羟基：带红移510nm不包括5,6-邻二酚羟基结构鉴定UV三氯化铝(AlCl3)、三氯化铝/盐酸(AlCl3/HCl)AlCl3/HCl 谱图AlCl3 ：无邻二酚羟基AlCl3/HCl 谱图AlCl3 ：带I 紫移30-40 nm B环有邻二酚羟基分子中有3-OH，5-OH，邻二酚OH时，可与Al3+络合，引起吸收峰红移。铝络合物稳定性： 黄酮醇3-OH 黄酮5-OH 二氢黄酮5-OH 邻二酚OH 二氢黄酮醇3-OH结构鉴定U

30、VOOHOOHHOOHOOOOHOOAlAlOOHOOHOOHAl带I紫移30-40 nm2AlCl3HCl结构鉴定UVAlCl3/HCl 谱图MeOH：无3-OH或5-OHAlCl3/HCl 谱图 MeOH：可能有3-OH或5-OHa、带I 红移35-55nm, 有5-OH,无3-OHb、带I 红移5060nm, 有3-OH或3,5-二OH三氯化铝(AlCl3)、三氯化铝/盐酸(AlCl3/HCl)结构鉴定UV诊断试剂带II带I归属NaOCH3红移40-60nm, 强度不降示有4-OH红移50-60nm, 强度下降示有3-OH, 但无4-OH吸收谱随时间延长而衰退示有对碱敏感的取代方式NaO

31、Ac红移5-20nm示有7-OHNaOAc/H3BO3红移5-10nm示A环有邻二酚羟基，但不包括5,6-二羟基红移12-30nm示B环有邻二酚羟基结构鉴定UV诊断试剂带II带I归属AlCl3及AlCl3/HClAlCl3/HCl谱图 = AlCl3谱图 示结构中无邻二酚羟基AlCl3/HCl谱图 AlCl3谱图 示结构中可能有邻二酚羟基带I紫移30-40nm示B环有邻二酚羟基AlCl3/HCl谱图 = CH3OH谱图 示无3-或5-OHAlCl3/HCl谱图 CH3OH谱图 示可能有3-或5-OH带I红移35-55nm示只有5-OH带I红移50-60nm示可能同时有3-和5-OH结构鉴定UV

32、芦丁的UV光谱CH3OHNaOCH3AlCl3AlCl3/HClNaOCOCH3NaOCOCH3/H3BO3259, 266sh, 299sh, 359272, 327, 410275, 303sh, 433271, 300, 364sh, 402271, 325, 393262, 298, 387结构鉴定练习 结构解析 从中药中分得一淡黄色结晶A，分子式为C27H30O16，HCl-Mg反响+，Molish反响+，ZrOCl2乙醇液显黄色，加柠檬酸后黄色不褪。 将A以稀酸加热水解，有黄色沉淀生成，精制后为结晶B, 母液经PC鉴定有glu，A以箱守法全甲基化后再甲醇解，糖的局部经检识为3，4，

33、6-三甲基葡萄糖甲苷及2，3，4，6-四甲氧基葡萄糖甲苷。结构鉴定练习A和B的UV光谱数据如下： UV max(nm) 晶A 晶BMeOH 265 364 267 367NaOMe 265 425(5min消失) 276 422(5min消失)NaOAc 265 385 274 384 AlCl3 266 424 268 424AlCl3/HCl 266 422 269 424NaOAc/H3BO3 265 370 267 372试推测其可能的结构，并说明理由 结构鉴定练习结构鉴定练习常用溶剂: CDCl3、DMSO-d6、C5H5N;当用DMSO-d6 时: 5-OH: ; 7-OH: ;

34、3-OH: 。参加D2O交换后，-OH信号消失。结构鉴定1H NMR氢核磁共振根底知识一NMR根底知识氢核磁共振根底知识二102345678910111213C3CH C2CH2 C-CH3环烷烃CH2Ar CH2NR2 CH2S CCH CH2C=O CH2=CH-CH31.73CH2F CH2Cl CH2Br CH2I CH2O CH2NO210.512CHCl3 (7.27)910OH NH2 NHCR2=CH-RRCOOHRCHO常用溶剂的质子的化学位移值DNMR根底知识01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemical shift (d, ppm)Cl2

35、CHCH34 lines;quartet2 lines;doubletCH3CH核磁共振根底知识三NMR根底知识01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemical shift (d, ppm)BrCH2CH34 lines;quartet3 lines;tripletCH3CH2核磁共振根底知识四NMR根底知识01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemical shift (d, ppm)BrCH(CH3)27 lines;septet2 lines;doubletCH3CH核磁共振根底知识五NMR根底知识01.02.03.04.05

36、.06.07.08.09.010.0Chemical shift (d, ppm)OCH3HHHHClOCH3核磁共振根底知识六NMR根底知识doublet of doubletsdoubletdoublet核磁共振根底知识七NMR根底知识Chemical shift (d, ppm)ClCH2CH2CH2CH2CH3020406080100120140160180200CDCl3核磁共振根底知识八NMR根底知识Chemical shift (d, ppm)020406080100120140160180200核磁共振根底知识九NMR根底知识Chemical shift (d, ppm)020

37、406080100120140160180200OCCCHCHCHCH2CH2CH2CH3CCH2CH2CH2CH3O核磁共振根底知识十NMR根底知识1H-NMR在黄酮结构分析中的应用A 环质子 B环质子 C环质子 糖上质子 取代基团质子 芳环质子 芳环质子 与类型有关 端基质子 -OH、-CH3、 其他质子 -OCH3、-OCOCH3 黄酮类化合物各质子的信号特征、峰形状、J、峰面积符合芳环质子规律结构鉴定1H NMR黄酮类化合物A、B环的取代模式结构鉴定1H NMR6-H 6.9 (d, J = 2.5 Hz)8-H 6.9 (d, J = 2.5 Hz)6-H信号总比8-H高场H-6H-

38、8黄酮、黄酮醇、异黄酮6.00-6.20, d6.30-6.50, d上述化合物7-O-糖苷6.20-6.40, d6.50-6.90, d二氢黄酮、二氢黄酮醇5.70-5.95, d5.90-6.10, d上述化合物7-O-糖苷5.90-6.10, d6.10-6.40, d5,7-二取代黄酮结构鉴定1H NMR芹菜素5,7-二取代黄酮实例结构鉴定1H NMR5-H 8.2 (d, J = 9.0 Hz)6-H 7.1 (dd, J=9.0, 2.5 Hz)8-H7.0 (d, J = 2.5 Hz)黄酮、黄酮醇、异黄酮二氢黄酮、二氢黄酮醇H-57.90-8.20, d7.70-7.90,

39、dH-66.70-7.10, dd6.40-6.50, ddH-86.70-7.00, d6.30-6.40, d7-取代黄酮结构鉴定1H NMR7-取代黄酮实例刺槐亭结构鉴定1H NMRB环质子形成H-2,6及H-3,5两组形成AABB系统总体比A环质子低场H-2,6比H-3,5低场4-取代黄酮H-2,6H-3,5二氢黄酮类7.10-7.30, d6.50-7.10, d二氢黄酮醇类7.20-7.40, d异黄酮类7.20-7.50, d查耳酮类7.40-7.60, d橙酮类7.60-7.80, d黄酮类7.70-7.90, d黄酮醇类7.90-8.10, d结构鉴定1H NMR4-取代黄酮

40、实例芹菜素结构鉴定1H NMRH-2H-6黄酮类3,4-OH及3-OH,4-OMe7.20-7.30, d7.30-7.50, dd黄酮醇类3,4-OH及3-OH,4-OMe7.50-7.70, d7.60-7.90, dd黄酮醇类3-OMe,4-OH7.60-7.80, d7.40-7.60, dd黄酮醇类3,4-OH,3-O-糖7.20-7.50, d7.30-7.70, dd对于黄酮与黄酮醇H-5 (d, J=8.5 Hz)出现在处H-2(d, J=2.5 Hz)及H-6(dd, J=8.5, 2.5Hz) 出现在异黄酮、二氢黄酮及二氢异黄酮H-2,5,6作为一个多重峰出现在3,4-取代

41、黄酮结构鉴定1H NMR3,4-取代黄酮实例木犀草素结构鉴定1H NMR 假设3 位和5 位取代基相同时，H-2 , H-6 作为一个单峰，出现在。 假设3 位和5 位取代基不相同时， H-2 , H-6 将以不同的化学位移分别作为二重峰出现，J。3,4,5-取代黄酮结构鉴定1H NMR刺槐亭3,4,5-取代黄酮实例结构鉴定1H NMRH-3常作为一个锋利的单峰信号出现在处，常会与H-6或H-8相混，应注意区别H-2常作为单峰出现在较低场区 7.6-7.8 (1H, s, CDCl3) 8.5-8.7 (1H, s, DMSO-d6)黄酮异黄酮结构鉴定1H NMR黄酮类C环1H NMR实例芹菜

42、素结构鉴定1H NMR黄酮类C环1H NMR实例奥洛波尔结构鉴定1H NMRH-2 5.2 (1H, dd, Jtrans=11.5, Jcis=5.0 Hz) H-3 2.8 (1H, dd, J=17.0Hz, J=11.5Hz) (1H, dd, J=17.0Hz, J=5.0Hz)二氢黄酮结构鉴定1H NMR黄酮类C环1H NMR实例甘草素结构鉴定1H NMR二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O糖苷H-24.8-5.0, d, J=11Hz5.0-5.6, d, J=11HzH-34.1-4.3, d, J=11Hz4.3-4.6 , d, J=11Hz二氢黄酮醇结构鉴定1H NMR黄酮类C环1

43、H NMR实例二氢槲皮素结构鉴定1H NMRH- 6.5-6.7 (1H, d, J=17.0Hz)H- 7.3-7.7 (1H, d, J=17.0Hz)苄氢 6.5-6.7 (1H, s, CDCl3) 6.4-6.9 (1H, s, DMSO-d6)查耳酮橙酮结构鉴定1H NMR糖上H-1黄酮醇3-O-鼠李糖苷5.0-5.1黄酮醇3-O-葡萄糖苷5.7-6.0黄酮类7-O-葡萄糖苷4.8-5.2黄酮类4-O-葡萄糖苷黄酮类5-O-葡萄糖苷黄酮类6-及8-C-糖苷二氢黄酮醇3-O-葡萄糖苷4.1-4.3二氢黄酮醇3-O-鼠李糖苷4.0-4.2糖结构鉴定1H NMR提供成苷位置的信息提供黄酮

44、醇3-OH成苷的糖种类的信息二氢黄酮醇3-OH成苷的糖种类无法区别黄酮类1H NMR实例芹菜素-7-O葡萄糖苷结构鉴定1H NMRHCH3甲基2.04-2.45 (3H,s)乙酰氧基2.30-2.45 (3H,s)甲氧基 3.45-4.10 (3H,s)5OH： 12 ppm7OH： 11 ppm3OH： 10 ppm其他取代基结构鉴定1H NMR黄酮类化合物骨架结构鉴定13C NMR黄酮类化合物骨架类型C=OC-2/C-C-3/C-类型168.6-169.8137.8-140.7122.1-122.3异橙酮类174.5-184.0160.5-163.2104.7-111.8黄酮类149.8-

45、155.4122.3-125.9异黄酮类147.9136.0黄酮醇类182.5-182.7146.1-147.7111.6-111.9=CH-橙酮类188.0-197.0136.9-145.4116.6-128.1查耳酮类75.0-80.342.8-44.6二氢黄酮类82.771.2二氢黄酮醇类结构鉴定13C NMR质谱在黄酮类化合物鉴定中的应用方法：EI-MS电子轰击、FD-MS场解吸、FAB-MS快原子轰击ESI-MS电喷雾苷元：EI-MS可得到分子离子峰(强, 往往为基峰)；苷：用FD-MS、FAB-MS、ESI-MS或将甙作成甲基化或三甲基硅醚化衍生物，再测EI-MS。结构鉴定MS主要

46、碎片离子峰为裂解途径I 产生的A1和B1 母核确定及裂解途径II产生的 B2+ A、B-环取代情况确定裂解途径I RDA裂解结构鉴定MS裂解途径II 通常，上述两种根本裂解途径是相互竞争、相互制约的。并且，途径I裂解产生的碎片离子丰度大致与途径II裂解产生的碎片离子的丰度互成反比。结构鉴定MS结构研究中注意的问题黄酮类6-及8-C-糖苷在常规酸水解的条件下不能被水解，而是发生互变，成为6-和8-C-糖苷的混合物。故确定其结构时常用核磁共振技术来解决。结构鉴定化学法：将黄酮类化合物与结构相似的化合物的旋光度进行比较来测定构型。单晶X-衍射法 ：常用方法之一，可信度高，但化合物必须是晶体。核磁共振法： 需使用手性的氘代试剂，利用其引起的化学位移的差异来