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文档简介
1、关于血涂片染色及白细胞分类计数第一张,PPT共十八页,创作于2022年6月1.瑞氏染色1.1试剂成分:伊红酸性嗜碱性染料亚甲蓝(美蓝)碱性嗜酸性染料甲醇固定 溶剂磷酸缓冲液(pH: 6.4-6.8)第二张,PPT共十八页,创作于2022年6月1.2着色原理:化学亲和作用+物理的吸附作用伊红+细胞中的碱性物质红色亚甲蓝+酸性物质蓝色中性物质+伊红和亚甲蓝淡紫色第三张,PPT共十八页,创作于2022年6月1.3 pH对细胞染色影响pH过低 PI 负电荷增多易与亚甲蓝结合偏蓝最适环境:弱酸(pH6.4-6.8)第四张,PPT共十八页,创作于2022年6月 血涂片: 淡紫红色 镜 下: 成熟红细胞粉红
2、色 白细胞胞质 呈现其特有的色彩 细胞核 紫红色 染色质结构清楚判别方法第五张,PPT共十八页,创作于2022年6月染色偏酸: 红细胞、嗜酸粒细胞颗粒偏红 白细胞核 淡紫红色或不着色染色偏碱: 红细胞 灰蓝色 中性粒细胞颗粒 深暗、偏粗,紫黑色 嗜酸性粒细胞 暗褐色或紫黑色、蓝色第六张,PPT共十八页,创作于2022年6月第七张,PPT共十八页,创作于2022年6月1.4器材 载玻片、推玻片、洗耳球1.5试剂 瑞氏染液(商品) I液:瑞特染料、纯甲醇、甘油 I液:磷酸盐缓冲液(KH2PO4 Na2HPO4) 第八张,PPT共十八页,创作于2022年6月1.6 操作制备血涂片(待完全晾干) 加I
3、液数滴覆盖整个血膜0.5-1min 滴加等量或稍多的II液(洗耳球混匀)5-10min 冲洗(注意) 干燥 第九张,PPT共十八页,创作于2022年6月注意事项1.血涂片干后方可染色2.加染液不能过少3.冲洗时应以流水冲洗4.染色过淡可复染,先加缓冲液再加染液5.染色过深可用水冲洗或浸泡一定时间,也可用甲醇脱色6.染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关。应在具体实践中摸索合适的时间。 第十张,PPT共十八页,创作于2022年6月2.WBC分类计数2.1原理2.2器材:显微镜、香柏油、拭镜纸、清洁剂2.3操作步骤 1.采末梢血染色 2.低倍镜下选择细胞分布均匀、着色良好的域, 滴香柏油一滴 3.
4、油镜下分类,分类时要有秩序的连续进行(“几” 字形),避免主观选择视野。通常分类100个白细胞,计 数并报告各种白细胞所占百分比。 4.计算 5.报告方式:XX细胞:XX%第十一张,PPT共十八页,创作于2022年6月2.4 外周血正常白细胞形态特征:中性粒细胞:杆+分10-15 m圆形胞质粉红胞质内颗粒量多、细小、均匀、紫红色核弯曲呈杆、带状染色质粗糙,紫红色分叶核:核分2-5叶第十二张,PPT共十八页,创作于2022年6月13-15 m圆形胞质着色不清胞质内颗粒粗大、整齐、均匀、充满胞质、桔红色核多分2叶染色质粗糙,紫红色嗜酸性粒细胞+淋巴细胞第十三张,PPT共十八页,创作于2022年6月
5、10-12 m圆形胞质着色不清胞质内颗粒量少、大小不匀、排列零乱、紫黑色,可盖核上核形不清染色质粗糙,紫红色嗜碱性粒细胞第十四张,PPT共十八页,创作于2022年6月6-15 m圆形/椭圆形胞质透明、淡蓝色胞质内多无颗粒核形 圆/椭圆/肾形染色质粗紧成块,深紫红色,核外缘光滑淋巴细胞第十五张,PPT共十八页,创作于2022年6月12-15 m圆/椭圆/不规则胞质半透明、灰蓝色或灰红色胞质内有细小、尘土样紫红色颗粒核形 不规则/山字/肾/马碲形,扭曲折叠染色质疏松网状,淡紫红色,有膨胀感和立体起伏感第十六张,PPT共十八页,创作于2022年6月2.5注意事项:1.分类最佳区域为体、尾交界处2.分类时要有秩序地连续进行3.白细胞总数与分类个数4.分类中如见幼红细胞,不计入100个细胞内,以分类100个白细胞过程中见到幼红细胞多少个来报告,并应注明其所属阶段。 5.分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形
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