【科学备考】2015高考生物二轮复习配套试题：基因工程及应用（含2014高考试题）

1、精品题库试题 生物1.(2014江苏，23，3分)下列关于基因工程技术的叙述,错误的是()A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达 1.ABC 1.限制酶的识别序列多为6个核苷酸,也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成,A错误;PCR反应中,起初的9095 高温是使目的基因解旋,后冷却至50 左右是使引物结合到互补DNA链上,最后再加热至72 左右是让DNA聚合酶催化DNA的子链延伸,B错误;载

2、体质粒上的四环素抗性基因、青霉素抗性基因等抗生素抗性基因常作为标记基因,C错误;目的基因即使成功地插入到受体细胞染色体上,如果不是在启动子和终止子之间,也不能正常表达,D正确。2.(2014重庆，4，6分)题4图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是()题4图A.的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B.侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到的染色体上C.的染色体上若含抗虫基因,则就表现出抗虫性状D.只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异 2.D 2.的构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶参与,A错误;侵染植物细胞后,通过农杆菌的转化作用,使目的基因进入植物细胞并

3、整合到的染色体上,B错误;的染色体上含有目的基因(抗虫基因)但不一定表达,C错误;基因工程依据的原理是基因重组,基因重组属于可遗传变异,D正确。3.(2014重庆，2，6分)生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述,错误的是()A.应严格选择转基因植物的目的基因,避免产生对人类有害的物质B.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验,但不反对治疗性克隆C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力 3.D 3.在获得转基因植物时,要严格选择目的基因,避免产生对人类有害的毒性蛋白或过敏蛋白等物质,A正确;当今社会的普

4、遍观点是禁止有关人类的生殖性克隆,但不反对治疗性克隆,B正确;反对设计试管婴儿的原因之一是有人将此技术用于设计婴儿性别,C正确;生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂及经过基因重组的致病菌等,干扰素不属于生物武器,D错误。4.(2014四川，3，6分)将牛催乳素基因用32P标记后导入小鼠乳腺细胞,选取仅有一条染色体上整合有单个目的基因的某个细胞进行体外培养。下列叙述错误的是()A.小鼠乳腺细胞中的核酸含有5种碱基和8种核苷酸B.该基因转录时,遗传信息通过模板链传递给mRNAC.连续分裂n次后,子细胞中32P标记的细胞占1/2n+1D.该基因翻译时所需tRNA与氨基酸种类数不一定相等 4.C 4.小

5、鼠乳腺细胞中的核酸有DNA和RNA两种,共包含5种碱基和8种核苷酸,A正确;遗传信息可通过转录过程传递给mRNA,B正确;亲代细胞仅一条染色体上的一个目的基因进行了标记,所以连续分裂n次可得到2n个子细胞,其中含有32P标记的细胞有2个,占1/2n-1,C错误;由于密码子的简并性,一种氨基酸可能由多种tRNA转运,所以翻译过程中tRNA与氨基酸的种类数不一定相等,D正确。5.(2014广东，25，6分)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图14所示,下列叙述正确的是()图14A.过程需使用逆转录酶B.过程需使用解旋酶和PCR获取目的基因C.过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制

6、备D.过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞 5.AD 5.由mRNA形成cDNA需要逆转录酶,A正确;过程需要使用限制酶和PCR技术获得并扩增目的基因,B错误;过程使用的感受态细胞可用CaCl2溶液制备,C错误;工程菌是指用基因工程方法,使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系,所以过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞,D正确。6.(2014天津，4，6分)为达到相应目的,必须通过分子检测的是()A.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B.产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选C.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D.21三体综合征的诊断 6.B 6.根据受体菌是否

7、对链霉素产生抗性进行携带链霉素抗性基因受体菌的筛选,不需要分子检测,A错误;用特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞,还需要进行克隆化培养和抗体检测,才能获得足够多的能分泌抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞,B正确;转基因抗虫棉是否具有抗虫特性,需要做抗虫的接种实验,C错误;21三体综合征可通过用显微镜直接观察体细胞中的21号染色体数目的方法进行检测,D错误。7. （江西红色六校2014级高三第二次联考）（15分）【生物现代生物科技专题】(第4小题1分，其他每空2分，共15分) 根据所学生物学知识回答：如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农

8、杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。目前临床上使用的红细胞生成素(一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血) 主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO) 。检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠 细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。在“试管牛” 的培育过程中，采用激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞，最常用的激素是 。从良种公牛采集的精子需 后才能进行受精作用。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构

9、或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理 (1分)A. 协调与平衡原理 B. 物种多样性原理C. 物质循环再生原理 D. 整体性原理 7.（第4小题1分，其他每空2分，共15分）(1) TDNA 染色体DNA(2) 杂交瘤B淋巴(3) 促性腺激素 获能 胚胎分割(4) B(1分) 7.（1）运用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，需要用Ti质粒构建表达载体，将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA，用含有构建好的表达载体的农杆菌感染植物细胞，最后使目的基因插入植物细胞的染色体DNA上。（2）单克隆抗体是通过动物细胞工程的细胞融合技术，筛选培养产生的杂交瘤细胞分泌的，该细胞的杂交瘤细胞由rhEPO

10、免疫过的小鼠淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。（3）使母牛超数排卵常用促性腺激素；从良种公牛采集的精子须获能后才能进行受精作用，即模仿阴道环境中的物质，使精子获得与卵细胞结合的能力；欲获得较多的胚胎。可通过胚胎分割技术，将早期胚胎分割成合适的份数。生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其它物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡，这体现了生态工程的物种多样性原理，因为生态系统的稳定性取决于自我调节能力，自我调节能力的大小又于物种丰富度成正相关。8. （南通2014届高三第一次调研）英国科学家利用基因工程技术培育出发绿光的斑马鱼。下列有关转基因斑马鱼培育过程的说 法错误

11、的是（） A. 可以用两种限制酶同时处理目的基因、运载体 B. 目的基因导人受体细胞时可运用显微注射技术 C. 基因工程成功的标志是斑马鱼能发出绿色荧光 D. 转基因斑马鱼培育需要运用胚胎移植等技术 8.D 8.用两种限制酶同时处理目的基因、运载体，可以同时产生两个不同的黏性末端，从而避免了目的基因、运载体的自身连接；将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射技术；基因工程成功的标志是目的基因成功表达蛋白质，即斑马鱼能发出绿色荧光；鱼类属于水生动物，不需要胚胎移植。9. （广东省汕头市2014届高三3月高考模拟理科综合试题）玉米的PEPC酶固定CO2的能力较水稻的强60倍。我国科学家正致力于将

12、玉米的PEPC基因导入水稻中，以提高水稻产量。下列各项对此研究的分析中正确的是 （ ）A. 核心步骤是构建玉米PEPC基因表达载体B. 通常采用显微注射法将PEPC基因导入水稻细胞C. 在受体细胞中检测到PEPC酶则意味着此项研究取得成功D. 利用细胞培养技术将转基因水稻细胞培育成植株 9.A 9.将玉米的PEPC基因导入水稻中，应用基因工程技术，其核心步骤是构建玉米PEPC基因表达载体；将重组质粒导入植物细胞中常用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；在水稻的叶肉细胞中检测到PEPC酶则意味着此项研究取得成功，或者说水稻固定二氧化碳的能力提高了，意味着此项研究取得成功；利用植物组织培养技术将

13、转基因水稻细胞培育成植株。10.（安徽江南十校2014届高三联考）某致病基因b与其正常基因B中的某一特定序列，经限制酶A切割后产生的片段如图1 (bp表示碱基对) ，据此可进行基因诊断；图2为某家庭有关该病的遗传系谱图。下列分析不正确的是A图2中1的基因型为bb，其致病基因来自双亲B图2中I2基因诊断会出现142bp、99bp, 43bp三个片段C图1中限制酶A的作用结果能体现酶的专一性特点D对家庭成员进行基因诊断还可用DNA分子杂交技术 10.A 10.据图分析，该病可能为常染色体隐性遗传病，-1的基因型为bb，推断双亲为Bb；也可能为伴X性遗传病，-1的基因型为X-1的基因型为XbY，则其

14、致病基因来自母亲XBXb；-2的基因型可能为Bb，B基因被限制酶A切割出现99bp，43bp两个片段，b基因被限制酶A切割出现142bp片段；限制酶A能识别B基因的特定脱氧核苷酸系列进行切割，不能识别b基因进行切割，体现限制酶的专一性；可以用b基因作为基因探针，与DNA样品进行杂交，过程是否出现杂交带判断是否患有患病基因。11.（北京西城区2014届高三上学期期末）下列有关基因工程的叙述正确的是 （ ）A用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段可获相同黏性末端B以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功

15、D质粒上的抗生素抗性基因有利于质粒与外源基因连接 11.A 11.一种限制酶能识别特定的核苷酸序列，并在特定切点切割DNA分子，故要获得相同黏性末端，用同种限制酶切割载体与含目的基因的DNA片段即可；以蛋白质的氨基酸序列为依据推测其mRNA，再根据推测的mRNA碱基序列推测的目的基因，由于密码子的简并性和缺少基因内含子等，所以与原基因不同；受体细胞中含有目的基因就标志着目的基因成功导入，基因工程育种是否成功还要看目的基因在受体细胞内是否稳定维持和表达；质粒上的抗生素基因是作为标记基因利于筛选含有目的基因的细胞。12.（北京海淀区2014届高三上学期期末）下列现代生物科技所依据的原理不正确的是

16、（ ）A.植物组织培养技术细胞全能性 B.基因工程技术基因重组C.植物体细胞杂交技术细胞核移植 D.生态工程物质循环再生 12.C 12.通常我们所说的广义的组织培养，是指通过无菌操作分离植物体的一部分，接种到培养基上，在人工控制的条件进行培养，使其生成完整的植株，原理是细胞全能性；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品；植物体细胞杂交，又称原生质体融合是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方

17、法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术，利用的是细胞膜的流动性；生态工程是指应用生态系统中物质循环原理，结合系统工程的最优化方法设计的分层多级利用物质的生成工艺系统，其目的是将生物群落内不同物质共生、物质与能量多级利用、环境自净和物质循环再生等原理与系统工程的优化方法相结合，达到资源多层次和循环利用的目的。13.(2014福建，33，10分) Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:(1)步骤中,在核移植前应去除卵母细胞的_。(2)步骤中,重组胚胎培养到_期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。

18、(3)步骤中,需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的_设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用Hind和Pst限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有_酶的酶切位点。(4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的_,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。 13.(10分)(1)细胞核(2)囊胚(3)核苷酸序列Hind和Pst(4)蛋白质 13.(1)核移植是把体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中。(2)囊胚期才有内细胞团。(3)可根据目的基因的核苷酸序列设计引物,要把目的基因和表达载体直接连

19、接,目的基因和表达载体应具有相同酶的酶切位点。(4)欲检测Rag2基因的表达情况,需提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,进行抗原抗体杂交实验。14.(2014安徽，30，14分)胰岛细胞的内分泌活动的协调有利于维持血糖平衡。(1)支配胰岛细胞的交感神经兴奋时,其末梢释放的去甲肾上腺素促进胰岛A细胞的分泌,却抑制胰岛B细胞的分泌,原因是_。(2)胰岛素可通过作用于下丘脑神经元抑制胰高血糖素的分泌,验证此现象的实验思路是:将大鼠随机分成两组,一组在其下丘脑神经元周围施加适量的胰岛素溶液,另一组施加_,测定并比较施加试剂前后血液中胰高血糖素的浓度。为使实验结果更明显,实验过程中应将血糖维持在比正常浓度_

20、(填“稍高”或“稍低”)的水平。(3)用高浓度的糖溶液饲喂一只动物后,每隔30 min检测其血糖浓度,结果见下表。请在下方的坐标图上绘制血糖浓度变化的曲线图,并根据血糖浓度变化在同一坐标图上画出胰岛素浓度变化趋势的曲线图。时间/min0306090120150血糖浓度/mgmL-10.700.750.75(4)胰岛B细胞含有与某病毒相似的_,若人体感染该病毒,自身免疫系统在消灭病毒时可破坏胰岛B细胞,引起型糖尿病,该病可通过注射胰岛素治疗。用基因工程技术生产胰岛素的主要步骤:获取胰岛素A、B链基因,构建_,将其导入_的大肠杆菌,筛选可稳定表达的菌株。 14. (14分)

21、(1)胰岛A、B细胞与去甲肾上腺素结合的受体不同(2)等体积生理盐水稍低(3)如图所示(4)抗原含目的基因的表达载体感受态 14.(1)同种神经递质与不同种的细胞上的不同受体结合引起的作用不同。(2)作为空白对照组,另一组应施加等量的生理盐水。低血糖是诱导胰高血糖素分泌的重要因素,故血糖应维持稍低的水平,实验结果才会更明显。(3)根据表格中的数据,直接把时间对应的血糖浓度点标出,连接成线,即可得血糖浓度变化曲线图;胰岛素是降低血糖的一种激素,其浓度比血糖浓度低,随血糖浓度的升高而升高,血糖浓度下降是由胰岛素浓度升高所致,所以胰岛素浓度的峰值应落后于血糖浓度的峰值,随血糖浓度的降低而降低,然后再

22、维持不变。(4)由于胰岛B细胞与某些病毒有相似的抗原,自身免疫系统不能分辨二者,在消灭病毒时可破坏胰岛B细胞,引起型糖尿病;基因工程的步骤包括:获取目的基因,目的基因与运载体结合,将目的基因导入受体细胞,目的基因的检测与鉴定;大肠杆菌常用Ca2+处理,使其处于感受态,以利于目的基因的进入。15.(2014山东，36，12分)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:(1)htPA基因与载体用_切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用_技术。(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊

23、注射促性腺激素,使其_。采集的精子需要经过_,才具备受精能力。(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是_。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的_。(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到_,说明目的基因成功表达。 15.(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶)DNA分子杂交(或核酸探针)(2)超数排卵获能(处理)(3)显微注射法性别鉴定全能性(4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物) 15.(1)目的基因和载体先用同种限制酶切割后,再用DNA连接酶连接,以构建基因表达载体;判断受体细胞的DNA是否插入

24、目的基因可采用DNA分子杂交技术。(2)利用促性腺激素处理供体母羊可使其产生更多的卵母细胞;精子必须获能后才具备受精能力。(3)将重组表达载体导入动物受精卵常用的方法是显微注射法。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到人组织纤溶酶原激活物,说明目的基因成功表达。16.(2014天津，8，12分)嗜热土壤芽胞杆菌产生的-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:.利用大肠杆菌表达BglB酶(1)PCR扩增bglB基因时,选用_基因组DNA作模板。(2)上图为质粒限制酶酶切图谱。bglB

25、基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入_和_不同限制酶的识别序列。(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为_。.温度对BglB酶活性的影响(4)据图1、2可知,80 保温30分钟后,BglB酶会_;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在_(单选)。A.50 B.60 C.70 D.80 注:酶的热稳定性是酶在一定温度下,保温一段时间后通过其活性的保持程度来反映的.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突

26、变率。经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。(5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获取热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中_(多选)。A.仅针对bglB基因进行诱变B.bglB基因产生了定向突变C.bglB基因可快速累积突变D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 16.(12分)(1)嗜热土壤芽胞杆菌(2)NdeBamH(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶(4)失活B(5)A、C 16.(1)BglB由嗜热土壤芽胞杆菌产生,故PCR扩增bglB基因时,应选用嗜热土壤芽胞杆菌基因组DNA作模板。(2)目的基因在与质粒连

27、接时,需连接在启动子和终止子之间,且所用限制酶不能破坏启动子、终止子和标记基因,所以切割质粒应选用Nde和BamH两种酶,则扩增的bglB基因两端需分别引入Nde和BamH两种酶的识别序列。(3)转基因大肠杆菌含有的bglB基因表达,合成了耐热的纤维素酶,所以其获得了降解纤维素的能力。(4)由图2可知,80 保温30分钟后,BglB酶的相对活性为0,所以此时该酶失活;由图1可知:60 70 时BglB酶的相对活性最高。70 时,该酶活性易降低,所以为高效利用BglB酶降解纤维素应最好将温度控制在60 。(5)在PCR扩增bglB基因时加入诱变剂仅对该基因进行诱变,可快速累积突变,但诱发基因突变

28、时,突变仍是不定向的,且突变的结果可以改变酶中氨基酸的数目。若用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌,可诱发其内的任一基因突变,不能快速积累bglB基因突变,故A、C正确,B、D错误。17.(2014课标全国卷，40，15分)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题:(1)理论上,基因组文库含有生物的_基因;而cDNA文库中含有生物的_基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中_出所需的耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物_的体细胞

29、中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的_,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的_是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时,则可推测该耐旱基因整合到了_(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。 17.(15分)(1)全部(2分)部分(2分,其他合理答案也给分)(2)筛选(2分,其他合理答案也给分)(3)乙(2分)表达产物(2分,其他合理答案也给分)耐旱性(2分)(4)同源染色体的一条上(3分) 17.(1)基因组文库包含某种生物的全部基因,cDNA文库又称

30、为部分基因文库,含有生物的部分基因。(2)植物甲基因组文库中有该种植物的全部基因,从中可筛选出耐旱基因。(3)植物乙的耐旱性低,所以植物乙体细胞作为受体细胞;要确定耐旱基因是否正确表达,应检测该基因的表达产物,对于个体水平的检测,应在干旱的田间进行试验,检测植物乙耐旱性是否得到了提高。(4)将耐旱基因看作A,不耐旱基因看作a,AaAa耐旱与不耐旱数量比为31,则耐旱基因整合到了同源染色体的一条上。18. （湖北八校2014级高三第二次联考）（15分）图示为应用生物工程获得人们需要的生物新品种或新产品的方案。请回答下列问题：（1）方案中，通常利用Ti质粒将抗虫基因导入棉花受体细胞，为了使抗虫基因

31、顺利连接到受体染色体基因组中，抗虫基因通常位于Ti质粒的_片段中。从分子水平检测抗虫棉是否培育成功的方法是：_。（2）推测方案中 prG基因最可能的作用是_。（3）方案中的转抗血栓基因山羊可以通过分泌乳汁来生产抗血栓药物。在构建的相应基因表达载体中，抗血栓基因的首端必须含有使其仅能在山羊_细胞中特异性表达的_，人们通常将此类转基因动物称为_。（4）方案中的早期胚胎在移植入受体母羊子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定，一般是取处于_时期的_细胞进行检测。 18.（共15分, 除标记外每空2分）（1）T-DNA 抗原-抗体杂交法（2）调控细胞（无限）增殖（3）乳腺 启动子 乳腺生物反应器（4）囊胚 滋

32、养层（1分） 18.（1）农杆菌侵染植物后，Ti 质粒中的 T-DNA 区段脱离质粒而整合到受体植物的染色体上，因此，如果把 HYPERLINK http: /baike. /view/3852088. htm t _blank 外源基因插入 T-DNA 中，就有可能携带进入受体植物并整合到染色体上；抗虫棉是否培育成功的标志是是否具有抗性，即是否有抗虫蛋白质表达，检测蛋白质常用的方法是抗原-抗体杂交法。（2）能产生单克隆抗体的细胞是杂交瘤细胞，即能无限增殖，又能产生抗体，向免疫过的B细胞导入prG基因后，能产生单克隆抗体，说明该细胞具有杂交瘤细胞的特点，所以prG基因能激发细胞不断分裂。19.

33、 （黑龙江省哈三中2014届高三下学期第一次高考模拟考试理综试题）【生物一选修1：生物技术实践】（15分）酒精浓度过高会抑制酵母菌的生长繁殖，影响酒精产量。为此，研究人员将酒精耐受基因转入野生型酵母菌中，经筛选得到了耐高浓度酒精的酵母菌。过程如图甲所示，请据图回答下列问题：（1）通过筛选得到耐高浓度酒精酵母菌的技术是_。、过程需要重复几次，目的是_。某同学尝试过程的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_。（2）为证明分离纯化得到的酵母菌能提高酒精产量，可将等量的_和耐高浓度酒精的酵母菌分别接种于含等量葡萄糖的A、B两组发酵装置中，在_条件下_（填“密闭” 或“充气

34、” ）培养。一段时间后取样，用_检测，若实验结果为_，则说明耐高浓度酒精的酵母菌能提高酒精产量。 19.（15分）（1）基因工程（转基因或基因拼接计算）（1分）进一步分离纯化获得耐酒精能力强的酵母菌（2分） 稀释涂布平板（2分）（2）野生型酵母菌（2分） 18-25（2分） 密闭（2分） 重铬酸钾（2分） B组的灰绿色比A组深（2分） 19.（1）由图中过程，可以看出获得耐受高浓度酒精酵母菌的过程，通过导入酒精耐受基因，构建重组质粒，导入酵母菌，筛选，该过程属于基因工程；、过程为筛选、接种和接种到新的培养基，重复该过程，是为了进一步分离纯化获得耐酒精能力强的酵母菌；由图乙中的菌落分布特点为左边

35、多，右边少，该同学的接种方法是稀释涂布平板法。（2）为证明分离纯化得到的酵母菌能提高酒精产量，需要有对照组，对照组选择野生型酵母菌；酵母菌生长的最适温度在20左右，所以将发酵装置放在18-25条件下；酒精发酵须在无氧条件下进行，所以需要密闭培养；酸性重镉酸钾与酒精反应出现灰绿色，颜色越浓酒精越多。20. （石家庄2014届高中毕业班教学质量检测）（15分）科学工作者通过基因工程创造出了“蜘蛛羊” ，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。请回答： （1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从 （基因组c DNA）文库中获取，并与 等调控组件重组在一起，然后与载

36、体相连构建成表达载体；再通过 方法，将表达载体导入羊的 ，获得重组细胞。 （2）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过 处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往徒还需要添加。若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊” 可将早期胚胎进行_ 处理。 （3）若所得到的“蜘蛛羊” （已知表达载体已进入细胞）乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，科学家为判断问题所在，应该采用 技术来检测。 20.（除标注外，每空2分，共15分）（1）cDNA 羊的乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵（2）同期发情 动物血清（动物血浆）胚胎分割（胚胎分割移植）（3）分子杂交（1

37、分） 20.（1）cDNA文库是利用mRNA逆转录获得的，除去了基因结构中内含子的干扰；为让目的基因在羊的乳腺中表达，应使用羊的乳腺蛋白基因的启动子，构建基因表达载体；基因表达载体常用显微注射技术导入受精卵，获得重组细胞。（2）重组细胞培养成早期胚胎后，进行胚胎移植时，对受体要进行同期发情处理；早期胚胎的培养中，除基本营养成分外，还需要添加动物血清；使用胚胎分割移植技术，可一次产生多头转基因“蜘蛛羊” 。（3）基因表达载体已进入细胞，但乳汁中没有检测到蜘蛛丝蛋白，基因可能没有表达，可采用分子杂交法测定mRNA，用抗原-抗体特异性结合检测蛋白质，并找出原因。21.（河北衡水中学2014届高三二调

38、）【生物-现代生物科技专题】（15分）根据所学生物学知识回答下列问题：（1）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。（2）目前临床上使用的红细胞生成素（一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血）主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO）。检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成，在融合过程中至少需要进行 次筛选。（3）在“试管牛” 的培育过程中，采用激素处理可使良种母牛一次

39、排出多枚卵母细胞，最常用的激素是 。从良种公牛采集的精子需 后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为 、 。（4）生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理 A协调与平衡原理 B物种多样性原理C物质循环再生原理 D整体性原理（5）左下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。右下图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamH或EcoR或Pst的酶切位点。现用BamH和Pst两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切

40、后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是 。A1 为Pst，2为EcoR，3为EcoR，4为BamHB1 为EcoR，2为BamH，3为BamH，4为PstC1 为BamH，2为EcoR，3为BamH，4为PstD1 为EcoR，2为Pst，3为Pst，4为BamH（6）运用基因工程技术已经创造出了“蜘蛛羊” ，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需从cDNA文库中获取，并与_等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成为表达载体；再通过_方法，将表达载体导入羊的_，获得重组细胞。将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到

41、经过_处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加_。 21.（15分）（1）TDNA 染色体DNA （2）杂交瘤 2（3）促性腺激素 获能 透明带反应、卵黄膜封闭作用 （4）B （5）A（6）羊的乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵 同期发情 动物血清 21.农杆菌转化法是现将目的基因组合到农杆菌Ti质粒的TDNA上，然后把重组质粒导入到农杆菌细胞中，利用农杆菌感染植物细胞，将目的基因插入植物细胞染色体DNA上。单克隆抗体的制备流程：首先用相应的抗原免疫小鼠，并从免疫的小鼠的脾脏中提取B淋巴细胞，然后让B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细

42、胞融合，融合的细胞在特定的选择培养基上筛选出杂交瘤细胞，然后在通过克隆化培养和抗体检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，用该细胞进行体内培养或体外培养获得单克隆抗体。促性腺激素可促进超数排卵；精子获能后才具备与成熟卵子受精的能力；防止多精受精的两道屏障：透明带反应、卵黄膜封闭作用。由“生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置” 可知这里主要体现的是物种的多样性，所以该生态工程的原理为物种多样性原理。（5）防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状，则酶切后，形成的黏性末端不能进行碱基互补配对即可，B和C选项中的酶切后，目的基因的两端都是BamH

43、切割的序列，目的基因可以成环；D选项的酶切后，目的基因两端是Pst切割后的序列，目的基因可以自身连接成环；而A选项中酶切后，目的基因的一端是Pst切割后的序列，另一端是BamH切割的序列，二者不同，不能互补，所以自身不能连接成环状。（6）为了让目的基因在转基因养的乳腺细胞中表达，需要在重组质粒中添加羊的乳腺蛋白基因的启动子；培育转基因动物的受体细胞为受精卵，导入目的基因常用显微注射法；将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过同期发情处理的受体母羊子宫内；因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清除，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加动物血清。22.（福州2014届高中毕业班质量检测）

44、【生物现代生物技术专题】(1O分) 将PVY病毒外壳蛋白基因(PVY-CP) 导人马铃薯，并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，PVY-CP可以从质粒A中获取；质粒B是选用的运载体，另已知部分限制酶识别序列和切割位点：BamH IHind Bgl IISma IGGATCCCCTAGGAACCTTTTCGAAAGATCTTCTAGACCCGGGGGGCCC请结合图像，运用所学知识回答问题：(1) 含有PVY-CP的质粒A保存在某细菌群体中，各个细菌含有相关不同的基因，这样的细菌群体称为 。(2) 关于步骤中Klenow酶的猜测，合理的是 。A. 催化合成的片段

45、起引物作用B. 可以将DNA片段的粘性末端变成平末端C. 能催化DNA链的合成D. 与DNA连接酶的功能相同(3) 步骤中应该使用的限制酶是 。(4) 利用农杆菌转化法进行转化，首先需要将质粒C导人 中，进而转化马铃薯，然后通过 技术获得抗PVY病毒马铃薯苗，最后进行相关的鉴定。 22.（10分、每空2分）（1）基因文库 （部分基因组文库、基因组文库给分）。（2）BC（3）Bgl、Sma(仅答出一种酶给1分)（4）农杆菌 植物组织培养 22.将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌群体储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，为基因文库。据图分析，该过程表示PCR技术，该DNA片段

46、是要获得PVYCP；Klenow酶将DNA的粘性末端变成平末端，需要合成新DNA片段与之配对；没有起到连接DNA片段作用。据表格分析，质粒B用Bgl和Sma切割后，刚好一端为平末端，与步骤DNA的平末端互补；另一端粘性末端，与步骤DNA的粘性末端互补，再用DNA连接酶连接为重组质粒。利用农杆菌转化法进行转化，首先需要将质粒C导入农杆菌，进而转化马铃薯，然后通过植物组织培养植物组织培养。23.（北京东城区2014届高三3月质量调研）（18分）普通番茄细胞中含多聚半乳糖醛酸酶基因（用A表示），控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄易软化，不耐储藏。抗多聚半乳糖醛酸酶基因可以使番茄不

47、再产生多聚半乳糖醛酸酶，从而使番茄长时间抗软化，容易储存和运输。下图是通过基因工程培育抗软化耐储藏番茄的过程及原理。请分析回答下列问题： （1）普通番茄（AA）也可以通过_育种的方法，最终获得基因型为aa（不能合成多聚半乳糖醛酸酶）的抗软化. 耐储存的番茄。 （2）利用基因工程将目的基因导入植物细胞，目前采用最多的方法是_，该方法中用到的目的基因载体是_，目的基因需插入到该基因载体的_上。 （3）将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞所需要的工具酶有_。 （4）图1中获得导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因的番茄细胞，需要经过_技术获得转基因番茄，这个过程需要在 条件下进行，细胞先经脱分化形成_，再形成丛

48、芽和根。 （5）根据图2分析抗多聚半乳糖醛酸酶基因能使番茄抗软化的原理是两个基因分别转录出的mRNA_，从而阻断了_过程。 23.（除注明外，其余每空2分）（1）诱变 （2）农杆菌转化法 Ti质粒 T-DNA（3）限制酶和DNA连接酶（4）植物组织培养（1分） 无菌 愈伤组织（1分）（5）结合形成双链RNA 多聚半乳糖醛酸酶基因的表达 23.要想利用普通番茄（AA）获得基因型为aa的抗软化. 耐储存的番茄，也可以采取诱变育种的方法，使A基因突变成a基因，从而获得所需要的品种。目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒是目的基因表达载体；Ti质粒上的一段T-DNA能转移到

49、受体细胞的染色体DNA上，因此目的基因必须插入T-DNA中。基因工程的工具酶有限制酶和DNA连接酶。由一个植物体细胞得到一个植物个体，必须采用植物组织培养技术；植物组织培养技术需要在无菌条件下进行；先经过脱分化形成愈伤组织，再经过再分化形成从芽和根。从图2可以看出多聚半乳糖醛酸酶基因和抗多聚半乳糖醛酸酶基因转录出来的mRNA能够互补配对形成双链RNA；从而阻断了多聚半乳糖醛酸酶基因的表达过程（翻译过程）。24. （天津市河东区2014年高三一模）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示) 。（10分

50、）（1）图甲中，过程需要的酶有_。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应加入_（2）-淀粉酶基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间的原因是_（3）除了用选择培养基筛选工程菌之外, 还可用DNA杂交技术直接鉴定带有重组质粒的酵母菌。具体操作如图乙所示，结合图乙回答一下问题利用PCR技术制备DNA探针，需加入_才能是DNA探针具有放射性。如何根据放射性自显影结果做出判断_ 24.（10分)（1）限制酶、DNA连接酶 淀粉（2) 使目的基因能够表达和发挥作用(3) 同位素根据光学胶片上放射自显影的具体斑点位置, 确定和挑选出克隆了目的基因的菌落 24.（1）步骤为将目的基因与运载体连接，需要先用同一

51、种限制性核酸内切酶分别切割质粒和目的基因，露出相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶连接为重组质粒；而在以淀粉为唯一碳源的培养基中，其他微生物难以利用淀粉而被抑制，从而筛选高效利用淀粉的工程酵母菌。（2）启动子的作用是使转录开始，而终止子的作用是使转录结束，所以要使目的基因成功的表达，必须位于重组质粒的启动子和终止子之间。（3）要使DNA探针具有放射性，必须对探针用放射性同位素进行标记；培养基上的菌落相当于复制到胶片上，将胶片上的菌落裂解，使DNA变成单链，与放射性同位素标记的探针结合，洗去未结合的探针，曝光后，会在相应菌落上出现放射性，根据根据光学胶片上放射自显影的具体斑点位置, 确定和挑选出

52、克隆了目的基因的菌落。25.（重庆名校联盟2014届高三下学期联考）如图表示水稻育种的一些途径。请回答下列问题：（1）若要在较短时间内获得上述新品种水稻，可选图中_(填编号) 途径所用的方法。其中过程的原理是_。（2）以矮秆易感稻瘟病(ddrr) 和高秆抗稻瘟病(DDRR) 水稻为亲本进行杂交，得F1。F1自交产生F2，F2矮杆抗病水稻中不能稳定遗传的占_，若让F2中的全部矮秆抗病的水稻植株自由授粉，则所得子代中的ddRR和ddRr的比是_。（3）科学工作者欲培育能产生含铁量较高的转基因水稻新品种，应该选择图中表示的途径最为合理可行，具体步骤如图所示：若铁结合蛋白基因来自菜豆，利用菜豆细胞内形

53、成的mRNA通过逆转录过程形成cDNA，将这些cDNA用限制酶处理后储存在受体菌群体内，这些受体菌群被称为菜豆的_。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用_处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得导入成功的受体细胞，该筛选过程是通过在培养基2中加入_实现的。所得含铁量较高的转基因水稻新品种与野生水稻属于同一物种，原因是它们无_。 25.（16分） 植物细胞的全能性 2/3 1：1 cDNA文库 CaCl2 潮霉素 生殖隔离 25.从图上看是诱变育种，为基因工程育种，为多倍体育种，是杂交，是花药离体培养，是秋水仙素处理，

54、染色体加倍，表示单倍体育种，单倍体育种的优点是明显缩短育种年限，而且获得的都是纯种，是花药离体培养过程的原理是植物细胞的全能性。以矮秆易感稻瘟病（ddrr）和高秆抗稻瘟病（DDRR）水稻为亲本进行杂交，得到F1的基因型是DdRr，F1自交产生F2，F2矮秆抗病水稻ddRR：ddRr=1: 2，不能稳定遗传的基因型是指ddRr占2/3，稳定遗传的都是纯合子；若让F2中的全部矮秆抗病的水稻植株自由授粉，自由授粉即随机交配或自由交配，矮秆抗病水稻ddRR：ddRr=1: 2，得出dR：dr=2: 1，所得子代中ddRR的比例为2/32/3=4/9，ddRr所占比例为22/31/3=4/9，ddRR和

55、ddRr的比是1: 1。铁结合蛋白基因是目的基因，获取目的基因的方法有：从基因文库中获取，人工化学合成，PCR技术扩增等；若铁结合蛋白基因来自菜豆，利用菜豆细胞内形成的mRNA通过逆转录过程形成cDNA，将这些cDNA用限制酶处理后储存在受体菌群体内，这些受体菌群被称为菜豆的cDNA文库。目的基因导入受体细胞的方法依据受体细胞的类型不同而不同，微生物主要是CaCl2溶液处理， 将细胞处理成感受态细胞，使重组Ti质粒易于导入；重组Ti质粒上的标记基因是抗潮霉素基因，标记基因的作用是用于鉴定和选择，筛选过程是通过在培养基2中加入潮霉素实现的。判断所得含铁量较高的转基因水稻新品种与野生水稻属于是否属

56、于同一物种的方法是看是否产生生殖隔离，新物种形成的标志是产生生殖隔离，它们仍是同一物种，没有生殖隔离。26. （重庆杨家坪中学2014级高三月考）（10分）豇豆对多种害虫具有抗虫能力，根本原因是豇豆体内具有胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI基因) 。科学家将其转移到水稻体内后，却发现效果不理想，主要原因是CpTI蛋白质的积累量不足。经过在体外对CpTI基因进行了修饰后，CpTI蛋白质在水稻中的积累量就得到了提高。其修饰和表达过程如下图所示：请根据以上材料，回答下列问题：(1) 一种植物出现的优良抗逆性状，在自然状态下很难转移到其他种类的植物体内，主要是因为存在 。(2) “信号肽” 序列及“内质网滞

57、留信号” 序列的基本组成单位是 ，此基因工程的核心是 。(3) 如果想在短时间内得到大量的CpTI基因可以采用 技术。(4) 如果种植上述转基因水稻，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染” 。把目的基因导入 中，根据母系遗传的特点，就可以避免“基因污染” 。(6分) 果蝇的灰身和黑身是一对相对性状（由B、b控制），红眼和白眼为一对相对性状（由A、a控制），现有两只果蝇杂交得到以下类型和数量的子代。 灰身红眼灰身白眼黑身红眼黑身白眼雄蝇1521484852雌蝇29701010(1) 两只亲本果蝇的基因型为 和 (2) 让纯种灰身红眼雄蝇与纯种黑身白眼雌蝇杂交得到F1，F1

58、中的雌雄果蝇相互交配得到F2，去掉F2中所有的白眼果蝇，剩下果蝇自由交配，F3中灰身所占比例为 。 26. 26.不同物种之间存在生殖隔离，自然状态下很难杂交成功。“信号肽” 序列及“内质网滞留信号” 序列都为DNA片段，基本组成单位是脱氧核苷酸；基因工程的核心是基因表达载体的构建。PCR技术经常用于体外快速扩增目的基因。细胞质遗传具有母系遗传特征，叶绿体是细胞质中含有DNA的细胞器之一，将目的基因导入叶绿体DNA中可以避免“基因污染” ，因为精子中几乎不含细胞质。根据两只果蝇杂交得到的子代类型和数量可知：子代雄蝇灰身：黑身=（152+148）：（48+52）=300: 100=3: 1；雌蝇

59、灰身：黑身=297: 1013: 1，该性状与性别无关，所以果蝇体色是常染色体遗传，且两亲本的基因型都为Bb；子代雄蝇红眼：白眼=（152+48）：（148+52）=200: 200=1: 1，由子代雌蝇全为红眼可知，该性状与性别有关，所以是X染色体上的隐性遗传，亲代雌果蝇为XAXa，雄果蝇的基因型为XAY；综合体色和眼色，两只亲本果蝇的基因型为：BbXAXa、BbXAY。由题意可知，雌雄果蝇自由交配，子代中灰身和黑身的果蝇没有被选择，则前后代基因频率不变；B基因频率：b基因频率=1/2，F3中灰身所占比例为：BB+Bb=（1/2）2+21/21/2=3/4。27.（山东潍坊2014届高三3月

60、月考）目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：(1) 获取外源基因用到的工具酶是 ，为了提高实验成功率，通常利用 技术获得大量标记的外源基因。(2) 外源基因能够整合到精子的 上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的 才能进入卵细胞中。(3) 过程采用的是 技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行 处理。(4) 过程需要在 (至少写出两点) 等条件下进行。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的 。(5