微生物的实验室培养 习题

1、正阳一高2012级高二生物同步测题(21)2014-5-181平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是()都要将菌液进行一系列的梯度稀释平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养都会在培养基表面形成单个的菌落2下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是()。植物组织培养常用的是固体培养基可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌3下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误

2、的()。用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于各组平板上将实验组和对照组平板倒置，37C恒温培养2448h关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，下列叙述错误的是()。操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯待培养基冷却至50C左右时进行倒平板平板冷却凝固约510min后将平板倒过来放置下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是()微生物培养前，需对培养基进行消毒测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养

3、基中的唯一氮源为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是()对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上临时保藏菌种容易被污染或产生变异对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-4C保藏的方法在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于()。空白对照B.标准对照C.相互对照D.条件对照8.下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是()硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻A能源NH.乳酸光能E碳

4、源co糖类等糖类等co.C氮源NHNO-r代谢类自养异养自养自养D型需氧型厌氧型需氧型需氧型9.无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是()对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌将用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基等进行灭菌为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触有关平板划线操作的叙述不正确的是（）第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种

5、环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者下列关于大肠杆菌的培养中叙述不正确的是（）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的稀释度使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（）用液体培养基可获得大量菌体纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长用液体培养基可以充分利用培养基中的营养物质用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌下列关于微生

6、物培养和利用的叙述不正确的是（）利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少14.下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（）成分牛肉膏葡萄糖KHPO24伊红美蓝青霉素琼脂蒸馏水含量10g10g2g0.4g0.065g1万单位适量1000mL能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因此培养基是天然鉴别培养基此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中下

7、列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是（）细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌稀释涂布法分散细菌得到单菌落的效果更好16.如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是（）操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌划线操作须在火焰上进行在5区域中才可以得到所需菌落在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌17.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中，不正确的是（）操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸C灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中

8、加2%琼脂，并使其溶解将培养基冷却到约50C时，在酒精灯火焰附近倒平板18亚硝酸盐是一类化学物质，易溶于水，常用于生产各种染料，也作为防冻剂使用。亚硝酸盐进入血液后能将血红蛋白氧化为高铁血红蛋白，高铁血红蛋白失去携带氧气的能力，导致组织缺氧，出现中毒现象。下列有关亚硝酸盐的叙述中，正确的是（）A.含有亚硝酸盐的泡菜、酱菜不能食用B.只在蔬菜类食品中能检测出亚硝酸盐C.在食品加工过程中也会产生亚硝酸盐D.吃剩隔夜后的蔬菜亚硝酸盐含量降低班级姓名学号123456789101112131415161718、非选择题:（14分）炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列

9、，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。（1）细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。（2）细菌鉴定：实验流程如图所示对照组r制片、检查接种戸尹伉如、时液体培养基（澄清）实验组加入（）35%：,6小时加入生理盐水配制液体培养基（浑浊）的澄清噬菌体液35乜伍小时对配制的液体培养基等需采取方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为（填“无机碳”或“有机碳”）。挑选可疑菌落制片后，用观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后，35C培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是对照组试管中应加入，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组（填“高

10、”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有、。21下列是有关微生物的培养与应用问题，请分析回答。如图是利用法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。图中右侧手执的器具称为。分析下面培养基的配方：NaNO、KHPO、NaHP0、MgSO7H0、KCl、HO。若用于32424422培养纤维素分解菌，应加入(物质)，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入染料。获得的菌种如果需要长期保存，可以采用的方法。(10分)在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化

11、合物)在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)。-1/长期使用该除草剂的土壤A.制备土壤浸出被A无透明带菌落有删带歯落(1)制备土壤浸出液时,B.培养基表面C.第戈次及具以斤划连蔓划盘线总从上次划线末端开始为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行一D培养基培养.处理。(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是。在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是或有氧条件抑制了这些细菌的生长。在固体培

12、养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是，有透明带菌落利用的氮源主要是，据此可筛选出目的菌。科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：接种的菌种一般培养基实验处理及结果A不生长添加营养物质甲，能生长B不生长添加营养物质乙，能生长A+B能生长不添加营养物质甲、乙就能生长突变株A不能在一般培养基上生长的原因是。突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是同步21：解析平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。答案D解析在只含有

13、尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。答案D3解析在细菌计数时，为保证实验结果的准确性，一般选择菌落数在30300的平板进行计数，求出平均数，再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数。答案D4制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。待培养基冷却至50C,用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态。平板冷却几分钟后还需倒置A5解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度，以便能从中选择

14、出菌落数在30300的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的唯一氮源。A6解析：对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在一20C的冷冻箱中保存。DD乙组和甲组实验的培养条件不同，形成了条件对照。解析：本题综合考查了不同微生物的代谢类型及营养要求。从能源来看，乳酸菌需糖类等有机物供能；从氮源看，乳酸菌需要NH+、N0-；从代谢类型看，根瘤菌为异养需氧型；从碳源43看，硝化细菌与衣藻需CO，乳酸菌和根瘤菌需要糖类等有机物。答案：B9解析：无菌操作技术的第一方面是：对实验操作的空间，

15、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。第二、三、四方面分别是选项B、C、Do答案：A10.解析：纯化大肠杆菌的平板划线中，接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环可能存在的微生物污染培养物，以后每次划线前灼烧接种环为了杀死上次划线后残留的菌种，划线结束仍需灼烧接种环，是避免细菌污染环境和感染操作者，从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。答案：C11解析：本题主要考查微生物培养和无菌操作的相关知识。培养过程中，除营养条件要满足需要外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件是否适宜；灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以，对培养基和培养皿进行灭菌而不是消毒；使用稀释

16、涂布平板法时要保证样品稀释比例合适，这样才会有更科学的数据；有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，所以使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。答案：B解析：液体培养基有利于纤维素分解菌的生长和繁殖。答案：A解析：接种划线可以将菌体分散，最后得到单个菌体细胞，经过培养可以得到单个菌落；用稀释涂布平板法可以分离微生物也可以对微生物进行计数；在泡菜的腌制过程中，开始亚硝酸盐含量增加，10天后含量开始下降；以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌。答案：A解析：此表表示鉴定大肠杆菌的合成培养基。抗性基因一般位于大肠秆菌的质粒上，而不

17、是拟核上；此培养基只能用来检测自来水中大肠杆菌含量是否符合饮用水标准。答案：D解析：细菌繁殖方式是二分裂方式，噬菌体是没有细胞结构的病毒，需要在活细胞中才能生活，在蛋白胨培养基中不能增殖；灭菌目的是防止杂菌和培养菌发生竞争。答案：B在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落答案：D解析：琼脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中，熔化后再灭菌。答案：C18.C19.解析：培养基应用高压蒸汽方法进行灭菌。炭疽杆菌同化类型为异养型，应选有机碳作为其碳源。微生物个体小，肉眼观察不到，必须借助显微镜才能观

18、察到菌体特征。在液体培养基中，细菌大量繁殖会导致培养液变浑浊；该实验中实验变量为是否加入噬菌体，所以对照组除不加噬菌体外，其他处理都应该和实验组保持一致（即应加入不含噬菌体的生理盐水）。噬菌体可破坏细菌细胞，从而使培养液变清。在特异性免疫过程中，吞噬细胞参与了对抗原的处理与呈递，浆细胞是直接产生抗体的细胞。答案：（2）高压蒸汽（100kPa蒸汽）有机碳显微镜细菌大量繁殖等量生理盐水低吞噬细胞、浆细胞20.（1）平板划线稀释接种环（2）纤维素粉刚果红（3）甘油管藏21.解析：（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。（2）从物理状态来看，题图培养皿中培养基属于固体培养基；从用途方面来看，该培养皿中培养基属于选择培养基。该除草剂为含氮有机化合物，降解该除草剂的细菌可以除草剂为氮源，故该培养基中除加入除草剂外，不再含有其他氮源，以选择出能降解该除草剂的细菌。（3）在以该除草剂为唯一氮源的培养基上，不能降解该除