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1、同济大学附属同济医院检验科临检组干化项目操作指导书TJYYJYKLJ/GHZ204第2版标题: 门冬氨酸氨基移换酶(AST)测定第2章 第04节第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页1. 目的:保证门冬氨酸氨基移换酶(AST)检测结果准确、可靠2. 适用范围:AST在全自动干式生化分析仪上的检测3. 项目名称:AST4. 检测方法:速率法5. 检测原理:将一滴11l患者样品滴于干片上,样品就均匀分布并渗透到下面的试剂层。在磷酸吡哆醛的催化作用下,谷草转氨酶使天门冬氨酸的氨基向-酮戊二酸转移生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸在草酰乙酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸和二氧化碳。随后丙酮酸被丙酮酸
2、氧化酶氧化生成乙酰磷酸和过氧化氢。最后是过氧化氢与白色染剂在过氧化物酶的催化下生成一种有色染剂。在37用反射仪可以测定白色染剂的氧化率,然后再将某一线性范围内反射强度变化率转化为以U/L为单位的酶活性度。干片支撑层上的短波滤光剂可以减少入射光在有色染剂形成过程中的影响。6. 试剂:6.1 检测试剂:6.1.1 品牌:美国强生6.1.2 货号: 84338156.1.3 包装规格:300片/盒 6.1.4干片成分:反应成分:天门冬氨酸钠,-酮戊二酸钠,磷酸钠,2-(3,5-二羊甲基-4-羟苯)-4,5-二(4-甲氨基)咪唑(白色染料),氧化丙酮酸,过氧化物酶以及草酰乙酸脱羟酶。其它成分:酶辅助因
3、子,染色剂,粘合剂,缓冲剂,表面活性剂,稳定剂,染料溶剂,滤色剂,净化剂及聚合物交叉连接剂。6.2 定标液:6.2.1 品牌:美国强生6.2.2 包装规格:KIT3干粉3ml/瓶;稀释液5ml/瓶6.3 质控物:6.3.1 品牌:美国强生6.3.2包装规格:V250质控品干粉3ml/瓶;稀释液5ml/瓶7. 仪器:VITROS2508 操作:测定波长: 670nm 测试时间和温度: 37约5分钟 样品量: 11l 具体操作见:强生VITROS250全自动干式生化分析仪操作指导书(编TJYYJYKLJ/YQZ406)9. 线性范围:3.0 750.0 U/L10. 参考范围:0 46 U/L(测
4、定温度37)11. 临床意义:11.1 当心肌梗塞时,血中AST活力增高,在发病后612小时之内显著增高,在48小时达到高峰,约 35天恢复正常。血清中的AST也可来源于肝细胞,各种肝病可引起血清AST的升高。 心肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎等也可引起血清AST的轻度增高。12. 标本要求:血浆(肝素锂抗凝,04真空采血管)13. 注意事项:13.1 血不宜反复冰冻保存,以免影响酶活性。13.2 红细胞中含有AST,溶血样品不宜使用。13.3 抗坏血酸 30 mg/dl、胆红素 40 mg/dl、脂血 2000 mg/dl及甘油三酯不影响测定。 若标本中含有妥拉磺脲、乙酰半胱氨酸会影响测定结果。13.5 敏感度
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