同济医院检验科ISO15189体系文件06总游离前列腺特异性抗原测定

1、同济大学附属同济医院检验科免疫组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ106第2版标题：总/游离前列腺特异性抗原（T/F PSA）测定第1章 第06号第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页1. 目的：测定血清或其它体液中总/游离前列腺特异性抗原（T/F PSA）的含量。2. 适用范围：同济医院检验科免疫室。3. 项目名称：前列腺特异性抗原（T/F PSA）测定。4. 检测方法：时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）。 检测原理：采用两株针对不同抗原位点的单克隆抗体，采用固相夹心法进行检测， 以 铕原子标记的单克隆抗体为示踪物，当铕在增强液中从单克隆抗体上解离后发出荧光， 其强度与总

2、、游离PSA浓度有关。 试剂：6.1 品牌：Perkin-Elmer。6.2 包装规格：96人份。6.3 内含物：6.3.1 PSA标准：7瓶，每瓶1.1ML。含量分别为0，0.1，0.5，2.0，10，50，250（g/ml）。标准浓度随试剂批号的不同有所改变6.3.2 铕标抗-TPSA-抗体：2瓶，每瓶0.75ML。6.3.3 铯标抗-FPSA-抗体：2瓶，每瓶0.75ML。6.3.4 分析缓冲液：1瓶，50ML。6.3.5 包被了抗PSA抗体的固相塑料板条：96孔。6.3.6 条形码标签：2张。7 仪器：芬兰AutoDELFIA1235-时间分辨荧光仪。8 操作步骤：8.1 打印工作单：

3、8.1.1 打开电脑及打印机电源,8.1.2 双击齐效检验系统,登入自己的工号与密码；8.1.3 双击报告处理,单击标本申请信息打开标本申请明细信息查询,打开左上角的所有信息,选择未生成报告信息。8.1.4 在检验项目处选择PSA执行查询,点击打印申请单，打印出工作单。8.2 排列待测标本：根据打印出的工作单上的库位号在标本架中找出相应待测标本,并按工作单上的顺序排列到时间分辨荧光仪的样本架上。8.3 分别打开仪器的微孔板处理器、样品处理器、主控计算机和打印机并运行系统软件。根据待测标本数量多少选择试剂板条数目，备足洗涤液、增强液及稀释杯，按要求上样后开始检测。8.4 实验参数及仪器自动操作流

4、程：见下表。缓冲液100ul样本25ul孵育30min洗涤2次示踪液稀释倍数1：100示踪液200ul孵育1h洗涤4次增强液200ul震荡孵育5min读数340nm8.5 结果：仪器自动记录结果并传输到LIS系统后发送报告（详见免疫报告发送程序）。9 线性范围：0-250g/ml。10参考范围：游离PSA1ng/ml；总PSA5ng/ml。11临床意义：11.1 前列腺癌时有一定比例患者水平明显增高，检测血清中PSA对病情预后有一定参考价值，当病情缓解或完全消退时PSA值下降，反之，当病情恶化时PSA值迅速上升。11.2 慢性前列腺炎和单纯前列腺肥大有时可出现轻度增高，应结合临床情况综合判断。12 病人准备、标本要求：标本为血清时最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。其它体液标本无特殊要求。13 注意事项：13.1 试剂盒在效期内使用，不同批号组分不可混用。13.2 血液采集后，应尽快分离血清。当日不能测定者应置-20以下保存，避免反复冻溶。13.3 血清冻存后常出现絮状物，可在