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文档简介

1、鸡场抗体检测与解读 抗体检测周报血凝（HA）和血凝(HI)抑制试验-以新城疫为例血凝试验（HA），目的：滴定病毒的血凝效价；原理：某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物的红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的现象称为血凝（HA）,也称直接血凝反应。病毒颗粒红细胞结果判定标准：1、：红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100凝集；2、：红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75凝集；3、 ：红细胞形成一个环状，四周有凝集块，即50凝集；4、 ：红细胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25凝集；5、 ：红细胞于孔底形成圆团，边缘光滑整齐，即无凝集。以100% 凝集的病毒最大稀释度

2、为该病毒的血凝价，即为一个凝集单位。上表看出，该新城疫病毒液的血凝价为1:32，则l:32为1个血凝单位，1:16、l:8分别为2、4个血凝单位，或将32/4=8，即1:8稀释的病毒液为4个血凝单位。根据判定结果，吸取1毫升已稀释的病原溶液再以8倍稀释，即为4个血凝单位的标准抗原，以备凝血抑制试验使用。+ + + + -血凝试验（HA）结果判定血凝抑制试验（HI），目的，确定抗体水平；原理：当在病毒的悬液中加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制（HI）反应，也称血凝抑制反应

3、。I am late！抗体抗原1、在血凝板上112孔内各加入50ul生理盐水；2、在第1孔内加入被检血清50ul，然后倍比稀释至第11孔，最后弃50ul；3、第112孔内加入4个单位血凝抗原50ul（第12孔为病毒对照）；4、每孔加入1鸡红细胞悬液50ul；5、轻轻振荡均匀，后放于室温或37中静置30分钟6、结果判定血凝抑制试验步骤7血凝抑制试验（HI）结果判定结果判定标准同血凝试验（HA）。将反应板倾斜成45度角，沉于管底的细细胞沿着倾斜面向下呈线状流动者为沉淀，表明红细胞未被或不完全被病毒凝集；如果孔底的红细胞铺平孔底，凝成均匀薄层，倾斜后红细胞不流动，说明红细胞被病毒所凝集。能将4单位病毒物质凝集红细胞的作用完全抑制的血清最高稀释倍数，称为该血清的红细胞凝集抑制效价，用被检血清的稀释倍数或以2为底的对数(10g2)表示。如上例，该血清的红细胞凝集抑制效价为1：4或HI效价为2(10g2)。如上表所示：MAX为多个样品中的HI抗体滴度最大值；MIX为HI抗体滴度最小值；GMT为多个样品的HI几何平均滴度；CV%为变异系数或离散度。酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫吸附试验（ELISA）,其基本过程是将抗原或抗体吸附于同相载体，在载体上进行免疫酶反应，底物显色后用肉眼或分光光度计判定结果。整个反应都必须在抗原结合抗体的最适条件下进行。每次试验时都需设阳性和阴性对照。

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