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文档简介
1、关于种子生活力测定第一张,PPT共十二页,创作于2022年6月一、实验目的 通过实验,掌握主要作物种子生活力测定方法、基本操作和结果计算。氯化三苯基四氮唑(TTC)法红墨水(酸性大红)染色法第二张,PPT共十二页,创作于2022年6月二、实验原理1、氯化三苯基四氮唑(TTC)法 凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生活力的种胚则无此反应。当TTC溶液渗入种胚的活细胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)还原时,可产生红色的三苯基甲腙(TTF),胚便染成红色。当种胚生活力下降时,呼吸作用明显减弱,脱氢酶的活性亦大大下降,胚的颜色变化不明显,故可由染色的程度推
2、知种子的生活力强弱。第三张,PPT共十二页,创作于2022年6月2、红墨水(酸性大红)染色法 有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性,有选择吸收外界物质能力,某些染料如红墨水中的酸性大红不能进入细胞内,胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力,染料进入细胞内使胚部染色,所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。第四张,PPT共十二页,创作于2022年6月第五张,PPT共十二页,创作于2022年6月三、试材与设备【实验材料】玉米种子【仪器与用具】培养皿、镊子、单面刀片、垫板(切种子用)、烧杯、棕色试剂瓶、搪瓷盘、pH试纸。【试剂】TTC溶液的配制:取1g TTC溶
3、于L蒸馏水或冷开水中,配制成0.1的TTC溶液。药液p应在6.57.5,以pH试纸试之(如不易溶解,可先加少量酒精,使其溶解后再加水)。红墨水溶液的配制:取市售红墨水稀释20倍(1份红墨水加19份自来水)作为染色剂。第六张,PPT共十二页,创作于2022年6月四、实验步骤 1.将玉米种子用温水(30)浸泡26h,使种子充分吸胀。(待充分吸胀后取出一部分种子,在沸水中煮沸35min,作为死种子) 2.随机取种子50粒,沿种胚中央准确切开,并取几粒死种子作为对照。 3.将每粒种子的一半用TTC法染色,溶液以浸没种子为度。 第七张,PPT共十二页,创作于2022年6月4.TTC染色的种子放入3035
4、的恒温箱内保温30min.也可在20左右的室温下放置4060min;红墨水法室温染色1020min5.保温后,倾出药液,用自来水冲洗23次,立即观察种胚着色情况,判断种子有无生活力,把判断结果记入表1内。第八张,PPT共十二页,创作于2022年6月表1 染色法测定种子生活力记载表种子活力()有活力的种子数/种子总数100%第九张,PPT共十二页,创作于2022年6月【注意事项】 1.TTC溶液最好现配现用,如需贮藏则应贮于棕色瓶中,放在阴凉黑暗处,如溶液变红则不可再用。2.染色温度一般以2535为宜。3.判断有生活力的种子应具备:胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色;子叶有小部分坏死,其部位不是胚中轴和子叶连接处;胚根尖虽有小部分坏死,但其它部位完好。4.TTC反应结束,从黑暗下取出后立即观察,因光下久放TTC本身会变色。5.不同作物种子生活力的测定,所需试剂浓度、浸泡时间、染色时间不同。现将主要作物种子生活力测定所需条件列入下表。第十张,P
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