巨噬细胞应该如何培养呢

1、Word文档 巨噬细胞应该如何培养呢？ 一篇文章帮您解决培育巨噬细胞全部的苦恼 细胞 介绍单核吞噬细胞系统。单核细胞发生于骨髓的多能干细胞，循环于血液中，穿透血管内皮进入组织内，转变为巨噬细胞。单核吞噬细胞系统在体内分布广，细胞数量多，主要分布于疏松结缔组织、肝、脾、淋巴结、骨髓、脑、肺以及腹膜等处，并依其所在组织的不同而有不同的名称。 单核吞噬细胞系统的细胞有很强的吞噬力量，能吞噬异物、细菌、年轻和突变的细胞等。此外，也吞噬抗原抗体复合物，并参加脂质与胆固醇代谢，可吞噬和蓄积脂质。吞噬的生理意义在于消退体内不需要的物质，其中巨噬细胞与淋巴细胞、粒细胞、肥大细胞，在功能上，有相互促进和相互抑制

2、的作用。当单核吞噬细胞系的生理功能失调时，可引起多种疾病。 因此，巨噬细胞常被用来做相关讨论。RAW 264.7细胞源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤；在正常培育中，细胞会消失多边形和不规章外形，并伴有很多伪足的生成，细胞贴壁力量强。RAW 264.7细胞属免疫细胞，有多种功能，是讨论细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。 名 称RAW 264.7（小鼠单核巨噬细胞白血病细胞）形 态不规章形生长特性贴壁；细胞生长速度快，2-3天即可传一代养分体系DMEM+10%FBS 正常细胞形态：特别细胞形态：特点： RAW264.7细胞极其简单消失伪足（长角）。需要准时观看细胞，若消失伪足则提

3、示该传代了（可能是一天一传）。 当消失少量的伪足可正常传代，有少数分化的细胞是正常的，很难保证可以完全不分化。 分化的细胞：呈多角形，明显的体积变大，时常有较长的触角。 培育的苦恼与解决：1胰酶消化刺激RAW 264.7细胞严峻分化解决方法：刮取是比较合适的方法。把细胞培育液倒掉，加入37预温的PBS，然后刮细胞，食指和拇指夹紧细胞刮，细胞刮橡胶头刮面切面与平皿平行，用腕力轻轻刮（留意用腕力刮，不要用臂力），切记只能刮一次，不要来回刮和反复刮，吹打的力度肯定要轻，切勿暴力吹打。2血清批间差刺激RAW 264.7细胞严峻聚团缘由推断：血清来源于动物，其组成成分有1000种左右，且血清组成及含量常

4、随供血动物的年龄、生理条件和养分条件而异。每个批号的组分百分比含量都是不固定的，所以批间差异是存在的。RAW 264.7细胞本身有聚团生长特性，但严峻聚团可能受到血清里的某些因子刺激。 解决方法：先用血清试用装，试用效果好，可购买和血清试用装批次相同的正装，囤积半年或一年的用量，有效避开批间差对细胞的影响（胎牛血清在-20保存可达5年）。 3有分化的细胞说明细胞状态不好吗？ 解决方法：推举传代比例为1:3-1:6；推举传代时间：2-3天；推举传代融合率：80%-90%。 以下为培育不错的RAW 264.7细胞形态生长良好的RAW264.7 胞体边界感清楚，各个喂得圆鼓鼓、胖嘟嘟的，时刻预备着为

5、人类生命科学讨论而“献身”。听说热灭活的血清适合培育巨噬细胞？最终为大家普及一条学问 热灭活可以灭活补体系统。启动的补体参加溶解细胞大事，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。在免疫学讨论中，培育ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推举使用热灭活血清。 热灭活时请将血清置于 56水浴30分钟。最好另加一个盛放与血清等体积水的烧杯并将温度计插入水中，以水中温度56为计时开头时间，加热过程中不时轻轻旋转混匀血清。 试验显示，对大多数的细胞而言，不需要使用热灭活血清。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进或完全没有作用，造成细胞生长速率降低。同时沉淀物会显著地增多，这些沉淀物