桔梗总皂苷含量测定方法研究

1、桔梗总皂苷含量测定要领研究李妍张崇禧魏建和许旭东褚庆龙【摘要】目的创立一种香草醛-硫酸比色法测定桔梗中总皂苷含量的要领，为桔梗的质量操纵提供科学根据。要领索氏提取器提取，大孔吸附树脂纯化，香草醛-硫酸比色法测定桔梗总皂苷含量。效果比色法测定的线性方程为A=0.0034+0.0064，相干系数为r=0.9997，均匀加样接纳率为96.97%，RSD=1.51%(n=6)。对差异泉源桔梗中总皂苷含量举行测定，其含量范畴为1.07%3.76%。结论该法测定正确，重复性好，可用于桔梗药材中桔梗总皂苷的含量测定，便于对桔梗药材举行质量评价。【关键词】桔梗；总皂苷；桔梗皂苷D；比色法Keyrds：Radi

2、xPlatydnis;Ttalsapnins;PlatydinD;lrietry桔梗(RadixPlatydnis)为桔梗科(apanulaeae)植物桔梗PlatydngrandiflruJaq.A.D的枯燥根1，是一种药食同源的植物，用途普及。桔梗性味苦、辛、平，归肺经，有宣肺、利咽、祛痰、排脓之成果，用于咳嗽痰多，胸闷不畅，咽痛，音哑，肺痈吐脓，疮疡脓成不溃，被普及应用于祛痰止咳药2。桔梗中的皂苷类身分，是桔梗药用品格的重要评价指标，桔梗中含有大量的三萜皂苷，已经分散区分出四十多种单体皂苷，如桔梗皂苷D、桔梗皂苷A、桔梗皂苷B、桔梗皂苷D2、D3、桔梗皂苷E等35。当代药理学研究表白，桔

3、梗皂苷为桔梗重要的药理活性身分6。?中国药典?(2022年版)接纳重量法测定桔梗总皂苷含量，该要领操纵繁琐，特殊是此中糖类身分等杂质会对测定效果产生严峻滋扰，造成检测效果大大高于现实总皂苷的含量7,8。本实行以桔梗皂苷D为尺度品，接纳香草醛-硫酸显色，比色法对桔梗总皂苷的含量举行了测定。1仪器与质料1.1仪器与试剂UV2550型紫外可见分光光度计(日本岛津)；TB-214型电子阐发天平北京赛多利斯仪器体系产物；数显恒温水浴锅HH-6国华电器产物；旋转蒸发仪R-205BHI产物；电热恒温鼓风枯燥箱DHG-9240上海精宏实行装备产物；SK8200H型超声波洗濯器(上海科导超声仪器)；SHZ-型循

4、环水真空泵上海亚荣生化仪器厂；大孔树脂层析色谱柱(内径3，长30)。尺度品桔梗皂苷D(HPL制备纯化，纯度用归一化法盘算在98%以上)；AB8型大孔吸附树脂(南开大学化工场)；其他试剂均为阐发纯。1.2质料2要领与效果2.1尺度品溶液的制备细密称取经60减压枯燥至恒重的桔梗皂苷D3.5g，加70%甲醇适量溶解，置1l量瓶中，用70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。2.3测定波长的选择细密移取80l的尺度品及50l的供试品溶液，置10l具塞磨口试管中，于70水浴蒸发至干，细密参加10%香草醛试液0.5l，60%硫酸5l，摇匀，于60水浴加热15in，冰水浴中冷却3in，随行试剂做空缺，在紫外分光光度

5、计于400700n波长范畴全程扫描11，尺度品及供试品的最大汲取波长均在472n，且空缺比较无滋扰，应选择472n为测定波长。2.4尺度曲线的绘制细密汲取桔梗皂苷D尺度品溶液0，40，80，160，200l,置10l具塞磨口试管中，于70水浴蒸发至干，细密参加10%香草醛试液0.5l，60%硫酸5l，摇匀，于60水浴加热15in，冰水浴中冷却3in，以同法平行处置惩罚的空缺溶剂为空缺，在472n处测定吸光度。以尺度品浓度(l/l)为横坐标，吸光度A为纵坐标绘制尺度曲线，得到回归方程为:A=0.0034+0.0064，r=0.9997，效果看出在此浓度系列范畴内与A出现精良的线性干系。2.5细密

6、度实行细密汲取尺度品溶液80l，根据“2.4项下要领显色测定吸光度，一连测定5次，效果RSD为0.30%，说明仪器的测试性能精良。2.6不变性实行细密汲取供试品溶液50l，根据“2.4项下要领操纵，按差异时间测定其吸光度变革，在安排5，10，20，30，40，50，60in后，吸光度别离为0.214，0.214，0.214，0.215，0.216，0.215，0.217。效果表白该法在60in内，吸光度值不变。2.7重复性实行称取桔梗药材已枯燥粉末6份，每份1.0g，正确称定，根据“2.2项下操纵，制备6份供试品溶液，各正确移取50l，根据“2.4项下要领操纵，测定吸光度A，盘算总皂苷含量。效

7、果均匀含量为3.07%,RSD为1.17%。2.8加样接纳率实行正确称取含量的桔梗药材已枯燥粉末6份，每份0.05g，参加桔梗皂苷D适量，根据“2.2项下要领制备样品溶液，各取50l样品液，根据“2.4项下要领显色后测定吸光度，盘算接纳率。效果见表1。均匀加样接纳率为96.97%,RSD为1.51%(n=6)。表1加样接纳率实行效果略2.9差异桔梗样品中总皂苷含量测定正确称取所网罗的14种差异桔梗选育品系12，各3份，根据“2.2项下要领制备供试品溶液，各细密移取50l，根据“2.4项下要领显色后测定吸光度，从回归方程中盘算供试品桔梗总皂苷的含量，其测定效果见表2。表2桔梗总皂苷含量测定效果略

8、3讨论?中国药典?(2022年版)接纳重量法测定桔梗总皂苷含量，划定其含量不得少于6%，但是重量法操纵繁琐，重复性不高，特殊是此中糖类身分等杂质会对测定效果产生严峻滋扰，造成检测效果大大高于现实总皂苷的含量，效果偏向较大。本要领接纳大孔树脂纯化桔梗总皂苷，然后用比色法测定，固然差异泉源桔梗中总皂苷的含量范畴为1.07%3.76%，低于药典划定，但是本实行所网罗样品均为一年生植株，且测定的是较纯的桔梗总皂苷，大大地淘汰了杂质的滋扰。该要领轻便，正确，且细密度高，重复性、不变性均较好，均匀接纳率为96.97%，可用于对桔梗药材举行质量评价。GP代表桔梗不育系测交质料，GS代表桔梗自交系质料，K为比

9、较样品;n=3通过大孔树脂纯化得到的提取液依“2.4项下要领显色，举行全波长扫描，得到的全波长扫描图，其最大汲取波长与尺度品相差很校同时弱极性的AB-8型大孔树脂的吸附率息争吸附率均比力抱负，故AB-8型大孔吸附树脂在样品的纯化中不失为较好的选择。可见该要领可以有用的去除滋扰，使测定效果越发正确。结合文献，为轻便桔梗总皂苷的提取，多接纳超声提取法取代回流提取法，笔者总结了超声提取法的提取条件为：用10倍量甲醇在40，100%功率下超声提取3次，30in/次。但与加热回流提取法所得提取液同时用紫外分光光度计测定吸光值，超声法所得提取液远远低于回流法。以是笔者放弃超声提取法，选用了更为正确的加热回

10、流提取法。【参考文献】1国度药典委员会.中国药典,部S.北京:化学产业出书社，2022:196.2魏尚洲.桔梗资源的综合开拓使用J.陕西科技大学学报,2022,23(5):141.3LeeJY，HangI，LiST.AntixidantandantianerativitiesfrganiextratsfrPlatydngrandiflruA，DeandllertsJJEthnpharal，2022，93(2-3)：409.4吴碧元，孙军，蒋红芳.桔梗提取工艺的研究J.中药材，2002，256：430.5何美莲，程小卫，陈家宽，等桔梗皂苷类身分及其质量阐发J中药新药与临床药理，2022，16(6)：457.6KiYS，KiJS，hiSUIslatinfanesapninandyttxieffetfsapninsfrthertfPlatydngrandiflrunhuanturelllinesJPlantaed，2022，71(6)：566.7石俊英，董其亭，巩丽丽，等.差异产地桔梗中总皂苷身分与质量的相干性研究J.山东中医药大学学报，2022，303：247.8李喜凤，薛秋萍，董诚明.桔梗中总皂苷的含量测定J.中医药学刊，2022，1224：2232.9魏建和，黄璐琦，陈士林，等桔梗柱头、花粉活力及自交亲和性研究J中国中药杂志，2022，31(5