丹参酮ⅡA磺酸钠对兔在体心室电生理及实验性心律失常的影响

1、丹参酮-A磺酸钠对兔在体心室电生理及实验性心律失常的影响【摘要】目的：研究丹参酮-A磺酸钠(TSN)对兔在体心室电生理及实验性心律失常的影响。方法：使用心室壁插入自制电极，观察TSN(0.5，1，2，4g/kg)对兔心室电生理影响；采用Bal2、氯仿-肾上腺素等诱发心律失常模型研究TSN对心律失常的影响。结果：小剂量TSN对兔心室电生理无明显影响，大剂量那么能显著延长心室的相对不应期、有效不应期、室颤阈；且能降低Bal2、氯仿-肾上腺素等诱发心律失常。结论：TSN可能具有增加心电稳定性并减少心律失常发生的作用。【关键词】丹参酮-A磺酸钠；兔；心室电生理；心律失常Keyrdstashinnea-

2、sulfaid-natru;rabbit;ventriulareletrphysilgy;arrhythia丹参是活血化瘀中药，丹参酮-A是丹参根的乙醚或乙醇提取物中的一种成分1。研究说明，丹参酮具有去除自由基、天然抗氧化、抗动脉粥样硬化、降低心肌耗氧量、保护缺血心饥抑制血小板聚集、抗血栓、抑菌和抗肿瘤等作用。近期的膜片钳全细胞式记录方法观察到其磺化后的水溶性钠盐丹参酮-A磺酸钠(TSN)对大鼠单个心室肌细胞的内向整流钾电流(Ik1)和瞬时外向电流(It)具有抑制作用2，对心肌L-型钙通道也有阻滞作用3，但其在整体条件下对心脏的电生理作用的影响仍少见报道。本实验观察了整体条件下TSN对兔心室有

3、效不应期(VERP)、心室相对不应期(VRRP)、室颤阈(VFT)及其实验性心律失常的影响，旨在讨论TSN在整体条件下对心脏电生理作用的特点及潜在的抗心律失常机制。1材料与方法1.1实验动物及分组安康成年新西兰兔(南方医科大学动物实验中心提供，清洁级)56只，体质量(2.40.4)kg，雌雄不限。40只随机分为TSN(0.5、1、2和4g/kg)组及对照组GS(体积分数5%)组，每组8只，余16只随机分为TSN组和对照组(各8只)。SD大鼠南方医科大学动物实验中心提供，清洁级，体质量(240.236.2)g，雌雄不限20只，分为TSN组和对照组，各10只。1.2药品及实验仪器注射用TSN为红色

4、澄清液体(阿尔贝拉医药控股公司，中国。批号：060303，20g/支)，用体积分数5%的葡萄糖注射液稀释成0.5g/L，4冰箱保存；Plab16导生理记录仪(埃得公司，澳大利亚)；SE-2102型心脏程控刺激器(光电公司，日本)；自制四极心肌插入电极；刺激电极(张家口教学仪器厂，中国)。1.3实验方法4，5各组用体积分数3%的戊巴比妥钠30g/kg经耳缘静注麻醉，仰卧位固定，肝素1000U静注，用针状电极刺入兔四肢皮下记录其体表导联心电图，信号输入16导生理记录仪，行全程心电监护。胸骨左缘开胸，保持自主呼吸，维持窦性节律，剪开心包膜，缝制心包吊床，充分暴露心脏，将自制四极心肌插入电极插入左心耳

5、右下缘室间沟左室侧心室壁内，电极下缘位于左室心尖部，四极电极极间间隔 ：第12极(，左室前壁)，第34极(b，左室心尖部)均为1.5，第23极5，四极电极的第12极作为刺激电极，连接心脏程控刺激器，第34极作为记录电极，将生物电信号输入16导生理记录仪，测定电生理参数。根底刺激以高出窦律(1020)次/in的频率起搏心室，脉宽2s，首先测定心室起搏阈值(输出电压)，期前刺激S2脉宽和电压与S1一样，在连续发放8个起搏刺激后发放早搏刺激S2，S1S2自短于S1S150100s开场，步长5s，至S2不能引起心室去极化即为VRRP；以起搏阈值的2倍作为输出电压，期前刺激S2脉宽和电压与S1一样，在连

6、续发放8个起搏刺激后发放早搏刺激S2，S1S2自短于S1S150100s开场，步长5s，至S2不能引起心室去极化即为VERP。接着，以第23极作为刺激电极，连接，心脏程控刺激器，以第14极作为记录电极,将生物电信号输入16导生理记录仪,记录室颤阈。致颤参数：50次/s、脉宽30s，刺激15s/次，每隔10in刺激1次，逐次进步刺激电压0.5V，直至室颤出现，此电压值(V)为电刺激兔心室室颤阈(VFT)。记录上述指标后稳定30in，各组经耳缘静脉输入相应的药物，30in后再次测量上述指标。TSN对Bal2诱发大鼠心律失常的影响SD大鼠以体积分数10%的水合氯醛(300g/kg)腹腔注射麻醉，颈外

7、静脉插管，监视体表肢体导联心电图。TSN组给予TSN1g/kg，对照组等体积GS，经颈外静脉缓慢注入，15in后经颈外静注Bal2(1g/kg)诱发心律失常，观察双相性室速发生率。TSN对氯仿-肾上腺素诱发兔心律失常的影响各组取平卧位固定，氯仿吸入麻醉至角膜反射迟钝,TSN组由耳缘静注TSN(2g/kg)，对照组给予等量GS，15in后两组均予体积分数0.01%的肾上腺素(50g/kg)由耳缘静脉快速注入，心电监视，记录心律失常持续时间。1.4统计学处理实验数据用xs表示，组内数据分析采用配对t检验(TSN对Bal2诱发大鼠心律失常影响组数据采用2检验)，组间数据分析采用方差分析，由SPSS1

8、3.0frinds软件完成统计学处理。2结果实验结果见表13：用药后30in，0.5、1g/kg组对兔心室的各项指标均无统计学意义；2、4g/kg组与对照组、0.5、1g/kg组比，VRRP、VERP、VFT显著延长(P0.05，P0.01)，TSN可明显减少Bal2致双相性室速的发生(P0.05)，且有对抗氯仿-肾上腺素诱发兔心律失常的作用(P0.01)。表1TSN对兔心室不应期的影响略表2TSN对Bal2诱发大鼠心律失常的影响略表3TSN对氯仿-肾上腺素诱发兔心律失常的影响略3讨论心律失常不仅发生于慢性心力衰竭、心肌缺血、心肌肥厚等器质性心脏病患者，还发生于心脏无明显器质性病变者，某些严重

9、心律失常现已成为人类死亡的主要原因。目前临床上抗心律失常药物仍是治疗心律失常的首眩抗心律失常药的作用机制包括降低自律性，减少后除极和触发活动、改变膜反响性(加快或减慢传导)、以及延长心肌细胞有效不应期等。本研究结果显示，TSN能延长心室的RRP及ERP，其机制可能是TSN能抑制心室肌细胞的Ik1和It2，这两种电流的抑制会使动作电位时程延长，同时也使RRP及ERP延长，从而能减少折返形成。VFT是心电稳定性的重要指标，直接反映心律失常发生的可能性。本实验发现，TSN能增加室颤阈，2g/kg时作用到达最大(与4g/kg组比无统计学意义),提示TSN具有增加心肌电稳定性的作用6。这提示TSN可能具

10、有一定抗心律失常的作用，且其作用并不与剂量成正比。在实验性心律失常模型中，本研究发现TSN能降低Bal2诱发大鼠双相性室速的发生率(P0.05)，缩短由氯仿-肾上腺素诱发的兔心律失常持续时间(P0.01)。Bal2诱发心律失常的机制与a2+相似,与心肌细胞膜上a2+的内流有关7;氯仿诱发兔室颤的机制可能是由于氯仿可促使植物神经或肾上腺髓质释放肾上腺素，大量肾上腺素兴奋-受体，引起肾上腺素受体依赖性a2+内流，以及氯仿对心肌的直接作用5。TSN能明显抑制Bal2诱发的大鼠双向性室性心律失常,缩短由氯仿-肾上腺素诱发的兔心律失常持续时间,提示TSN的抗心律失常机制可能与抑制K+及a2+的内流,减轻细胞内钙超载,降低心脏的自