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文档简介
1、实验十二 脂肪酸的氧化实验目的:了解脂肪酸的氧化作用实验原理: 脂肪酸 乙酰辅酶A。 2乙酰辅酶A 乙酰乙酸。 乙酰乙酸 丙酮 羟丁酸 缩 合氧化脱 羧还 原本实验用新鲜肝糜与丁酸保温,生成的丙酮在碱性条件下与碘生成碘仿: 2NaOH + I2 NaOI + NaI +H2O CH3COCH3 + 3NaOI CHI3 + CH3COONa +2NaOH 剩余的碘可用标准硫代硫酸钠溶液滴定: NaOI + NaI + 2HCl I2 + 2NaCl + H2O I2 + 2Na2S2O3 Na2S4O6 + 2NaI根据滴定样品与滴定对照所消耗的硫代硫酸钠溶液体积之差,可以计算由丁酸氧化生成丙
2、酮的量。 器 材:5ml微量滴定管恒温水裕吸管剪刀、镊子50ml锥形瓶漏斗试管、试管架试剂、材料家兔0.1淀粉溶液 20ml0.9氯化钠溶液 200ml0.5当量/升 丁酸溶液 150ml15三氯乙酸溶液 200ml10氢氧化钠溶液 150ml10盐酸溶液 150ml0.1当量/升 碘溶液 200ml标准0.02当量/升 硫代硫酸钠溶液 500ml1/15 mol/升 pH7.6磷酸盐缓冲液 200ml操作方法 制备肝糜 取样(有对照组) 沉淀蛋白 滤液 酮体的测定(滴定) 计算丙酮含量保温1.5小时(430C)过滤肝糜制备处死家兔,取出肝脏用0.9氯化钠溶液洗去血污,并吸去表面水分取5g肝组
3、织,少量0.9氯化钠溶液在研钵中研磨成细浆用0.9氯化钠溶液将细浆稀释至10ml取样1/15 mol/l pH7.6的磷酸缓冲液50ml锥形瓶(目的组)50ml锥形瓶(对照组)取3ml取3ml加入2ml正丁酸加入2ml肝组织糜加入2ml肝组织糜沉淀蛋白质目的组对照组加入3ml15三氯乙酸溶液加入3ml15三氯乙酸溶液加入2ml正丁酸静置15分钟后过滤酮体的测定目的组对照组取滤液2ml取滤液2ml加入加入50ml锥形瓶(新)50ml锥形瓶(新)加入3ml0.1当量/升碘溶液3ml10氢氧化钠溶液摇匀,静置加入6ml20盐酸加入3ml0.1当量/升碘溶液3ml10氢氧化钠溶液摇匀,静置加入6ml20盐酸用标准硫代硫酸钠滴定,滴至浅黄即加入淀粉溶液作指示剂,滴至蓝色消失1.已知1毫升0.1N的碘溶液(或Na2S2O3溶液)相当于0.9673毫克丙酮.根据实验过程试拟出丙酮含量的计算公式.思考题样品中丙酮的含量是多少?样品中丙酮的含量= (V1-V2) x C Na2S2O3 x 1/
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