DB1301-T250-2017蔬菜和水果中多种农药残留的测定液相色谱-串联质谱法

1、B 04DB1301石家庄市地方标准DB 1301/T 2502017蔬菜和水果中多种农药残留的测定液相色谱-串联质谱法12017-10-10 发布2017-11-30 实施石家庄市质量技术监督局发布DB 1301/T 2502017前言本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由石家庄市农业局提出。本标准起草单位：石家庄市农产品质量检测中心。本标准起草人：郭海谦、王雪、刘培、徐燕、梁宜品、武寒梅、谢圆丰、何焕肖、张晓伟。 PAGE 5 PAGE 6DB 1301/T 2502017蔬菜和水果中多种农药残留的测定 液相色谱-串联质谱法范围本标准规定了用液相色谱-串联质谱测定

2、蔬菜和水果中多种农药残留量的方法。本标准适用于蔬菜、水果中多种农药残留量的测定。本标准方法定量限参见附录A。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8855新鲜水果和蔬菜的取样方法原理样品中农残用乙腈提取，提取液盐析离心，使用液相色谱-串联质谱仪检测，根据保留时间定性，外标法定量。试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认的分析纯试剂和GB/T 6682 中规定的一级的水。乙腈：色谱纯。乙酸：色谱纯。无水乙酸钠(C

3、H3COONa)。无水硫酸镁(MgSO4)：研磨后在 500 马弗炉内烘 5 h，贮于干燥器中，冷却后备用。提取溶剂 0.1%乙酸乙腈溶液：移取 1 mL 乙酸加入乙腈，定容至 1000 mL，混匀装瓶备用。单种标准储备溶液：用 1000 mg/L 单种农药的高浓度储备液，根据每种农药在仪器上的灵敏度，确定其在混合标准储备液中的浓度，移取适量单个农药标准储备液于 10 mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度， 转移至棕色储备瓶中，4 保存。农药混合标准溶液：根据各农药在检测器上的响应值，逐一吸取一定体积的单个农药标准溶液（4.3.1）分别注入同一容量瓶中，用 50%的甲醇稀释至刻度配制成农药混合标准

4、溶液。PSA，粒度 40 m70 m。C18，粒度 40 m60 m。石墨化炭黑吸附剂：120 m400 m。十八烷基硅烷(ODS)键合相：40 m100 m。有机滤膜：0.22 m。仪器设备DB 1301/T 2502017液相色谱串联质谱仪：配 ESI 电离源。5.2电子天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g。5.3组织捣碎机。5.4离心机：1000 r/min10000 r/min。旋涡混合器。螺旋盖聚丙烯离心管：50 mL、15 mL。试样制备蔬菜、水果样品按GB/T 8855 取可食部分切碎、混匀，组织捣碎机捣碎制成浆状，放入低温冰箱（-16 -20 ）内贮藏备用。试验步骤提

5、取准确称取10.0 g试样，加入20.0 mL提取溶剂、3 g无水硫酸镁、1 g无水乙酸钠，震荡2 min，5000 r/min 离心5 min。净化移取适量上述提取液于15 mL螺旋盖聚丙烯离心管中，加入300 mg无水硫酸镁、250 mg PSA、500 mg ODS和10 mg石墨化炭黑，在旋涡混合器上混合2 min,5000 r/min 离心5 min。取上清液，过0.22 m滤膜供液相色谱串联质谱仪测定。测定液相色谱参考条件液相色谱条件如下：a）色谱柱：C18 不锈钢柱， 3.0 mm100 mm，2.5 m 粒度，或相当者； b）流速：0.4 mL/min，流动相梯度：见表 1表

6、1流动相梯度时间min0.05%甲酸水%0.05%甲酸甲醇%0802011090131090158020168020c）柱温：在 35 保持柱温恒定。d）进样量：5 L。质谱参考条件DB 1301/T 2502017质谱参考条件见表 2表 2质谱参考条件质谱条件参数离子源ESI 正电离扫描方式MRM源温度550 幕帘气压力206.8 KPa（30 psi），氮气去溶剂温度550 雾化气压力482.6 KPa（70 psi），氮气辅助气压力413.7 KPa（60 psi），氮气电喷雾电压5500 V碰撞室射出电压5 V监测离子对、碰撞气能量和锥孔电压和保留时间参见附录 A液相色谱-串联质谱测定

7、和确证根据样液中被测物的含量情况，选定浓度与样液相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中被测物响应值均应在仪器检测线性范围内。分别吸取5 L标准溶液和样品待测溶液，每种被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在上述实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与基质标准溶液的保留时间偏差在2.5%之内；且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表3规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。表 3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差参数范围相对离子丰度50%20%至 50%10%至 20%10%允许的最大偏差20%25%30%50%

8、试验数据处理试样中被测农药残留量用质量分数 计，单位以毫克每千克(mg/kg)表示，见公式(1)式中： = V AAs m（1） 蔬菜、水果中农药（质量分数计）含量，单位为毫克每千克(mg/kg)； V试样最终定容体积，单位为毫升(mL)；A样品溶液中被测农药的峰面积，积分单位； As农药标准溶液中被测农药的峰面积，积分单位； m样品溶液所代表的试样的质量，单位为克(g) ； 标准溶液中农药的质量浓度，单位为毫克每升(mg/L)。计算结果保留两位有效数字，含量超过1 mg/kg时保留三位有效数字。DB 1301/T 2502017精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均

9、值的比值（百分率），应符合实验室内重复性要求，见表 4。表 4实验室内重复性要求被测组分含量mg/kg精密度%0.001360.0010.01320.010.1220.1118114在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合实验室间再现性要求，见表 5。表 5实验室间再现性要求被测组分含量mg/kg精密度%0.001540.0010.01460.010.1340.1125119DB 1301/T 2502017附录A（资料性附录） 多反应监测条件化合物母离子(m/z)子离子(m/z)锥孔电压(V)碰撞能量(eV)相对保留时间(min)定量限(mg/kg

10、)甲胺磷14294*41210.400.00212541190.40涕灭威砜240148*40130.560.00176.140150.563-羟基克百威238181*65140.660.00116365200.66涕灭威116.189*47100.730.0037047100.73啶虫脒223.1126*50270.730.000799.150550.73克百威222.1165*42180.800.0007123.142310.80甲萘威202.1145*28160.800.000712728410.80嘧霉胺200107*71350.870.0028271370.87灭幼脲309156*4

11、6230.940.00313946420.94辛硫磷299.177*29411.000.007129*29191.00咪鲜胺376.2308*44171.040.00270.144421.04伏杀硫磷367.9182*40211.060.00797.140451.06哒螨灵365309*110171.200.02147110311.20注：表格中带“*”的离子为定量离子。DB 1301/T 2502017附 录 B（资料性附录） 各种农药精密度数据表农药名称质量浓度mg/kg重复性限r再现性限R质量浓度mg/kg重复性限r再现性限R质量浓度mg/kg重复性限r再现性限R甲胺磷0.050.003

12、10.00660.10.00780.00900.50.02010.0530涕灭威0.050.00290.00630.10.00860.00940.50.02040.0523克百威0.050.00300.00580.10.00860.01020.50.02120.0521啶虫脒0.050.00400.00500.10.00780.01070.50.02140.0528甲萘威0.050.00420.00590.10.00840.01030.50.02220.0532嘧霉胺0.050.00400.00610.10.00850.01080.50.02290.0530灭幼脲0.050.00330.00550.10.00760.01140.50.02330.0536辛硫磷0.0