核型多角体病资料指南课件

1、病 毒 学第一节 核型多角体病第二节 质型多角体病第三节 浓核病第四节 病毒(bngd)病的发病规律第五节 病毒病的防治第一页，共三十六页。核型多角体病资料指南病毒(bngd)的发现？19世纪末，钱伯伦创制细菌过滤器后，发现了许多毒素和过滤性因子。1892年，苏联学者伊万诺夫斯基证明存在过滤性病毒(bngd)（发现患花叶病的烟草叶汁通过过滤器后仍有侵染性）。19世纪末20世纪初，已经找到许多过滤性病毒。1915年，Twort首先发现细菌病毒。1935年，美国生化学家W.M.Stanleg获得了烟草花叶病毒结晶。（第一位）开始了对病毒本质的认识(rn shi)，促进病毒学的发展，而且成为分子生物

2、学发展的里程碑。第二页，共三十六页。核型多角体病资料指南超显微(xin wi)的，可以通过细菌过滤器。病毒粒子只含一种核酸。病毒粒子不能生长，也不能二等分裂。无细胞结构。病毒只能利用宿主细胞的核糖体进行Pr合成。病毒的主要(zhyo)特征：第三页，共三十六页。核型多角体病资料指南家蚕(jicn)病毒病的研究历史1149年陈敷所著农书中关于家蚕脓病病症(bngzhng)“高节”、“脚肿”的描述。1639年徐光启的农政全书中，有病蚕“游走而不安箔”的描述。1874年汪日桢湖蚕述记有病蚕“高节而足流白水”。1912年Acqua发现了第一个昆虫病毒BmNPV。迄今已发现12目1600余种昆虫，可被16

3、个科的病毒所感染。第四页，共三十六页。核型多角体病资料指南家蚕(jicn)病毒病的种类1 核型多角体病 由杆状病毒科的家蚕核型多角体病毒（BmNPV）寄生血细胞和体腔内各种( zhn)组织的细胞核，并形成多角体。2 质型多角体病 由呼肠病毒科的家蚕质型多角体病毒(bngd)（BmCPV）寄生中肠圆筒形细胞，并在胞质中形成多角体。复习内容：家蚕幼虫中肠上皮细胞的类型？第五页，共三十六页。核型多角体病资料指南家蚕(jicn)病毒病的种类3 浓核病 由细小(xxio)病毒科的家蚕浓核病病毒（BmDNV）寄生中肠圆筒形细胞的细胞核，不形成多角体。4 病毒性软化病 由小RNA病毒科的家蚕软化病病毒（Bm

4、FV）寄生中肠杯形细胞胞质中，不形成(xngchng)多角体，但形成(xngchng)类似多角体的包涵体（封入体）。第六页，共三十六页。核型多角体病资料指南家蚕(jicn)病毒病的危害情况病毒病是目前蚕茧生产中最为常见、危害(wihi)最重的一类病害，给蚕茧生产造成的损失约占蚕病造成损失的80%。上述四种病毒病在我国都有不同程度的发生，其危害也因各个蚕区而不同。南方蚕区以中肠型脓病为主；而北方蚕区则以血液型脓病造成的损失最大。浓核病常与CPV并发；病毒性软化病目前已很少发生。因此，本章重点讲解NPV、CPV，并介绍DNV.第七页，共三十六页。核型多角体病资料指南第一节 核型多角体病 核型多角体

5、病也称血液型脓病，农民(nngmn)常称之为脓病或脓肿。一 病原 家蚕核型多角体病毒（Bombyx mori Nuclear Polyhedrosis Virus NPV）。存在形式有两种：NPV与NPB（多角体）。（一）NPV 属杆状病毒科，核型多角体病毒属，病毒粒子杆状，33080 nm；dsDNA;Tm为87.5；第八页，共三十六页。核型多角体病资料指南NPV病毒(bngd)粒子的超微结构NPV膜髓核（dsDNA）囊膜胶粘层衣壳核衣壳一个(y )囊膜内只含一个核衣壳一个囊膜内包含两个(lin )以上核衣壳模式图单粒包埋型（SEV）与多粒包埋型（MEV）寄生部位 血体壁气管上皮 脑脂肪卵巢

6、皮膜 丝腺精巢皮膜SEV（%） 9798 7289 63MEV（%） 23 1128 37环境温度：25 28 多形成SEV，33 35 多形成MEV。第九页，共三十六页。核型多角体病资料指南（二） NPB（多角体）1 构成(guchng)多角体多角体蛋白(dnbi)3%5%病毒(bngd)粒子核糖核酸聚合酶0.3%Si；微量Fe、Mg与宿主细胞Pr和病毒Pr均不同，分子量29000，由245个AA残基组成。2 理化特性 多为整齐六角形十八面体（偶有四方、三角或不正形）；26m（平均3.2）；光镜下易观察到；淡绿色，折光性强；比水重；不溶于水及有机溶剂；对浓酸不稳定；易溶于碱性溶液；苏丹不能使

7、其着色。第十页，共三十六页。核型多角体病资料指南扫描电镜照片NPB的形态(xngti)光镜照片N.bNPB第十一页，共三十六页。核型多角体病资料指南NPB形态(xngti)第十二页，共三十六页。核型多角体病资料指南NPB形态受下列因素(yn s)影响1 寄生部位：血细胞、气管上皮、体壁上皮、脂肪体中均六角形。而丝腺腺细胞中则巨型三角形。多角体且较其他组织大2倍左右。睾丸(o wn)、精室内膜上寄生则四方形。2 宿主：BmNPV接种二化螟后：1代六角形，7代后四方形，再将四角形NPB反接种于B.m.，则：第一代少量六角形，第四代达70%80%，第六代全部为六角形。第十三页，共三十六页。核型多角体

8、病资料指南3 与环境（温度）有关：BmNPV接种(jizhng)蛹体。接种(jizhng)后 2824hr后，再经35则产生四角形NPB 28下4896hr后,再经35则产生六角形。 35下2448hr后,再经28则产生六角形。 35下7296hr后,再经28则产生四角形。NPB形态(xngti)受下列因素影响第十四页，共三十六页。核型多角体病资料指南3 NPB的稳定性 处理 浓度 温度 失活时间(shjin)(min) 日光 40 20h 干热 100 45 湿热 100 3 甲醛 2% 25 15漂白粉 0.3% 25 3石灰浆 1% 25 3石灰水 清 25 24h 盐酸 比重1.025

9、 25 3第十五页，共三十六页。核型多角体病资料指南二 病症(bngzhng)1 典型病症（共同(gngtng)症状）第十六页，共三十六页。核型多角体病资料指南2 不同时期(shq)发病 不眠蚕：在蚕的催眠期间，蚕群体大部分快入眠时，NPV病蚕体壁紧张发亮，呈乳白色，行动活泼(hu po)，不能入眠，终于体皮破裂，流脓而死。 起节蚕：在起蚕时发病。病蚕生长停滞，体色乳白而不见转青。体壁松弛多皱，体躯缩小(suxio)。前节的节间膜向后套叠，终于出现典型的病征而死。 高节蚕：又称“竹节蚕”。源于病蚕各环节节间膜或环节后半部（靠近节间膜处）隆起，就象竹节。多在4、5龄蚕盛食期发病。第十七页，共三十

10、六页。核型多角体病资料指南2 不同时期(shq)发病 脓蚕：多发生于5龄后期至上簇前。环节肿胀拱起，呈算盘珠状，体壁紧张发亮，体色乳白，病重时，爬行缓慢，终因腹足失去把持力，从蚕匾或蔟中坠下，流脓(li nn)而死。发病迟者死于蔟中或结薄皮茧而死亡，生产上比较常见。 斑蚕：在生产(shngchn)上较少见，与蚕品种有关，现行品种少发生。发生时出现对称性的病斑，如黑褐色的焦脚、黑色气门及大的斑块等。 蛹期病症：在5龄后期、熟蚕、初蛹期感染可造成蛹期发病。病蛹体色暗褐或乳白，体壁易破，一经震动即流出浓汁而死，造成茧层污染，即内印茧或死茏茧。第十八页，共三十六页。核型多角体病资料指南2 不同时期(s

11、hq)发病高节狂躁爬行第十九页，共三十六页。核型多角体病资料指南2 不同时期(shq)发病腹足基部乳白(r bi)气门(qmn)周围水渍状病斑第二十页，共三十六页。核型多角体病资料指南2 不同时期(shq)发病第二十一页，共三十六页。核型多角体病资料指南2 不同时期(shq)发病第二十二页，共三十六页。核型多角体病资料指南2 不同时期(shq)发病第二十三页，共三十六页。核型多角体病资料指南三 病变(bngbin) NPV及其包涵体是在寄主细胞核内增殖和形成的，因而受感染的细胞核便发生一系列的病变过程。随着多角体的不断增多，使细胞核逐渐膨胀，随后细胞亦膨大破裂，这样(zhyng)多角体、病毒及

12、细胞碎片就游离于血液中。 血细胞、气管上皮、脂肪(zhfng)组织及真皮细胞易形成多角体。在生殖腺和神经细胞中只能形成少量多角体，而蜕皮脱、唾腺和马氏管等则很难形成，在丝腺中除前部丝腺不能形成多角体，中、后部丝腺细胞核均能形成大量多角体。目前已发现NPV可在中肠圆筒形细胞中增殖,但不能形成多角体.第二十四页，共三十六页。核型多角体病资料指南病 变第二十五页，共三十六页。核型多角体病资料指南病 变第二十六页，共三十六页。核型多角体病资料指南四 致病机理(j l)1 感染(gnrn)入侵NPB蚕食(cnsh)下放出NPV污染桑叶碱液溶解肠腔灭活排出RFP围食膜中肠上皮细胞复制胞核定位血液NPV创伤

13、NPV细胞间隙血细胞核定位第二十七页，共三十六页。核型多角体病资料指南2 病毒(bngd)复制dsDNAdsDNAStRNA rRNA病毒(bngd)Pr衣壳PrNPBPrssDNAmRNA胞质NPVNPB细胞核细胞质E3 装配(zhungpi)4 释放第二十八页，共三十六页。核型多角体病资料指南5 病毒(bngd)增殖NPV的增殖(zngzh)曲线隐潜期缓慢(hunmn)增殖期高速增殖期稳定增殖期第二十九页，共三十六页。核型多角体病资料指南五 发病(f bng)特点1 本病以食下传染为主（NPB），也可经伤口感染（NPV）。2 主要传染源为病蚕血液（脓汁）。3 本病主要发生在3龄老熟（蛹期）

14、，尤以5龄中期老熟前后最为严重。4 本病属于亚急性传染病，小蚕感染后经34天发病死亡，大蚕经46天发病；外温高时，病程加快。第三十页，共三十六页。核型多角体病资料指南5 病蚕体壁破裂流脓之前，蚕座二次感染的可能性较小。6 由于NPB对自然环境有强的抵抗力，故该病除具有水平传播外，尚具有较强的垂直传播能力。7 恶劣的环境条件及一些理化因素刺激可诱发本病。8 不同蚕品种对本病抗性不同。第三十一页，共三十六页。核型多角体病资料指南六 诊 断1 肉眼(ruyn)鉴别第三十二页，共三十六页。核型多角体病资料指南2 显微(xin wi)镜检查 此病在发病初期，外观病症往往(wngwng)不明显，但发育迟缓

15、，有时迟眠。取可疑蚕剪断尾角或腹足，滴一滴血液于载玻片上，加盖片与400600倍显微镜下观察。 如有折光性较强，大小较整齐的六角形多角体，即可确诊(quzhn)。如病蚕处于感染中期，可观察血细胞核内有无折光性强、大小不等的颗粒，据此确诊。 镜检时，脂肪球与多角体的区别方法：（1）Sudan 染色法；（2）有机溶剂溶解法；六 诊 断第三十三页，共三十六页。核型多角体病资料指南2 显微镜检查(jinch)3 PCR检测(jin c)与血清学方法以已知的抗体检查蚕体内是否存在相对应的抗原(kngyun)，从而做出蚕是否被某种病毒感染。第三十四页，共三十六页。核型多角体病资料指南家蚕(jicn)核型多角体病录 像第三十五页，共三十六页。核型多角体病资料指南