HPLC法测定维生素E片含量

1、HPLC法测定维生素E片含量【摘要】目的建立测定维生素E(VitE)含量的高效液相色谱法。方法采用Shiadzu18色谱柱4.6250，5，以甲醇为流动相；检测波长为284n，流速1.5lin-1。结果维生素E在0.1255.0gl-1范围内，峰面积与其浓度线性关系良好r0.9999，高、中、低3种浓度的平均加样回收率为101.4102.7%，RSD为0.460.71%，最低检测限为0.4gl-1。结论本法准确、简便、快速，适用于维生素E片的含量测定。【关键词】维生素E；高效液相色谱法；含量测定Abstrat：bjetiveTestablishaRP-HPLfrdeterinatinfVita

2、inE.ethdVitainEasdeterinatednHPLinstruentfixedaShiadzu18lun(4.6250，5)ithUVdetetinat284n,andthebilephaseaseH,theflrateas1.5lin-1.ResultsThealibratinurveaslinear(r=0.9999)ithintherangef0.1255.0gl-1frVitainE,theaveragereveryrateserefr101.4%t102.7%frthreedifferentlevelsftheauntfVitainE,RSDasfr0.46t0.71%

3、,andLDas0.4gL-1.nlusinThisethdassiple，quik，aurateandeffetivefrdeterinatinfVitainE.ItassuitablefrthequalityntrlfrtabellaVitainE.Keyrds:VitainE;HPL;deterinatin维生素E又称生育酚，是一种脂溶性物质，在人体内主要参与生育功能、肌肉代谢等过程，具有强大的抗氧化性，是人体必须的微量元素之一。目前VitE的主要分析方法包括化学发光抑制法1、UV法2、G法3、荧光法4和HPL法5等。在这些方法中化学发光法仪器要求特殊，而荧光法、UV法、G法易受到辅料干

4、扰。本文采用反相HPL法测定VitE片含量，方法准确，不受其他成分干扰，获得比拟满意的效果。1仪器及试剂SPD-10A高效液相色谱仪日本岛津、L-10AT紫外检测器日本岛津；甲醇分析纯，山东省禹王实业总公司禹城化工厂、无水乙醇分析纯，沈阳正信高科技研究所试剂部、维生素E醋酸酯对照品日本信越制药株式会社、维生素E片沈阳药科大学药分教研室提供。2色谱条件与系统适用性试验色谱柱：Shiadzu18柱5,4.6250日本岛津公司；流动相：甲醇；流速：1.5l/in;进样体积：20l；检测波长：284n；柱温：35；理论塔板数按维生素E峰计算应不低于5000。3溶液的配制3.1对照品溶液制备取VitE对

5、照品适量，精细称定，加无水乙醇制成每1l含VitE1.5g的溶液，作为对照品溶液。3.2供试品溶液配制取VitE片10片，精细称定、研细。精细称取细粉适量加无水乙醇制成每1l中含VitE1.5g的溶液，摇匀。过滤，弃去初滤液，取续滤液作为含量测定的供试品溶液。4方法的专属性考察在上述色谱条件下,分别取对照品溶液、供试品溶液及流动相20l注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的主峰与对照品溶液的主峰位置一样约15in，空白辅料在VitE峰位置处无色谱峰，VitE峰与相邻杂质峰的别离度符合要求。试验说明该方法具有良好的专属性，见图1。5方法学考察5.1线性关系及检测限A.blankadfuvant

6、slutinB.ntrl.Saple图1维生素EHPL色谱图Fig.1HPLhratgrafVitainE取VitE对照品适量，精细称定，用无水乙醇制备成含VitE0.125、0.25、0.50、1.0、2.0、5.0gl-1的溶液，分别精细汲取20(l注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积Y对维生素E浓度X进展线性回归，得回归方程为：y=3149247x+4781.6r=0.9999(n=6)。VitE浓度与色谱峰面积在0.1255.0gl-1范围内线性关系良好r0.9999，检测限为0.4(gl-1S/N=3。转贴于论文联盟.ll.5.2精细度试验取VitE对照品适量，精细称定，用流动相制备

7、成含VitE0.5、1.0、2.0gl-1的溶液，分别精细汲取20l注入液相色谱仪，重复进样5次。各浓度峰面积的RSD分别为0.95%、0.55%、0.63%(n=5)。5.3重复性试验取维生素E片10片，按3.2项下方法平行制备6份，分别进样20l；同时取对照品溶液20l进样，按外标法测定标示百分含量。测得VitE标示百分含量的RSD为0.65%(n=6)。5.4回收率试验精细量取VitE对照品适量，照处方比例分别按高、中、低三个浓度每个浓度各3份与处方量的辅料混合均匀。按3项下方法制得供试品溶液，分别进样20l进展测定，按外标法分别测得高、中、低3浓度的回收率分别为102.7，102.2，

8、101.4；RSD分别为0.54，0.46，0.71。5.5稳定性考察用供试品溶液1.5gl-1，在不同时间1、2、3、4、6、8h进样20l，峰面积的RSD为1.2%。供试品溶液在8h内稳定。5.6样品测定分别取VitE片三批样品分别是690213、690219、690226及VitE对照品适量，照3项下方法制备。精细量取对照品溶液与供试品溶液各20l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算出各处方样品含量，三批VitE片中VitE的标示百分含量分别是99.97%，98.76%，102.09%，RSD分别为0.75%、0.62%、0.38%。6讨论本文比拟甲醇/水、甲醇/乙腈、甲醇/冰醋酸几种流动相，因VitE为脂溶性维生素，在甲醇/水流动相中出峰时间延长大于25in,峰形较差，故而没被采用。而甲醇/乙腈、甲醇/冰醋酸作为流动相，虽然可以得到较好的峰形和出峰时间，但均因溶液配制复杂，价钱昂贵等原因没被采用。【参考文献】1李利军，钟招亨,等.流动注射化学发光抑制法测定维生素EJ分析试验室，2022，259：107-111.2张洪，马俊玲.二阶导数分光光度法测定维生素E霜的含量J广东药学院学报，2000,16(2)：112-114.3国家药典委员会.中华人民共和国药典第二部K20