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文档简介

1、大孔树脂吸附解析甜菊糖甙实验实验目的了解大孔吸附树脂分离生物活性物质的基本原理；掌握大孔吸附树脂分离生物活性物质装置的基本流程；掌握大孔吸附树脂分离生物活性物质要注意的事项；大孔吸附树脂分离生物活性物质的基本原理大孔性树脂的特性大孔吸附树脂是一种不含交换基团的,具有大孔结构的高分子吸附剂。具有多孔性的巨大网状结构。吸附性原理-吸附力是范德华力或氢键作用的结果筛选性原理-树脂为多孔性结构，具有分子筛的作用分离原理：有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在树脂的吸附机理和筛分原理作用下实现分离。影响因素：般非极性化合物在水中易被非极性树脂吸附，极性化合物在水中易被极性树脂吸附。物质在溶剂中的溶

2、解度大，树脂对此物质的吸附力就小，反之就大。分子量小、极性小的化合物与非极性大孔吸附树脂吸附作用强；反之，与极性大孔吸附作用强。能与大孔吸附树脂形成氢键的化合物易吸附。3.应用：广泛应用于天然化合物如苷、糖类、生物碱、多糖、黄酮、三萜类化合物的分离和富集工作。4.洗脱液的选择：最常用的水、乙醇，此外甲醇、丙酮、乙酸乙酯也被应用。大孔树脂吸附技术优缺点优点应用范围广,理化性质稳定,分离性能优良,使用方便,溶剂用量少,可重复使用，降低成本缺点树脂价格贵,品种有限,操作繁琐5.大孔吸附树脂分离生物活性物质要注意的事项大孔吸附树脂的再生大孔吸附树脂的再生，一般用甲醇、乙醇效果比较好。当大孔吸附树脂用于

3、吸附弱酸性物质时，则用氢氧化钠再生；用于吸附弱碱性物质时用盐酸再生，吸附一般离子溶液时用水再生，吸附挥发性物质时用热水或通蒸汽再生。吸附解析VVM流速：上柱液每分钟以柱内树脂体积的某一百分比的体积流速流入或流出树脂柱；死体积：指树脂层上的清液体积，越小越好死角：指流道不连续导致主体流动离开流道边界而形成的区域，越少越好；短路、偏流、干柱6.大孔吸附树脂分离甜菊糖甙的基本流程取已再生好的湿态大孔吸附树脂装填入玻璃吸附柱至30ml标记处，检查气密性，检查有无分层、气泡等树脂不均匀状态，降液面至树脂界面；取定量（推荐120m1）固形物含量为N1的甜菊糖貳溶液缓慢注入树脂柱内，按7%VVM流速上柱直到流出液含显著甜味为止，停止上柱。记录上柱总量V1（柱出口上柱流出液量）；降液面至树脂界面；用2倍树脂体积的纯水按7%VVM流速洗柱，降液面；用两倍树脂体积的60%乙醇溶液以7%VVM流速解析，收集解析液测定体积V；用2倍树脂体积纯水以7%VVM流速再生树脂；准确取1毫升解析液置表面皿内测定105C恒重固形物含量N；计算吸附过程回收率=解析总量/上柱总量解析总量=N*V上柱总量=N1*V1装柱方法夹好柱出口，柱内加满去离子水，柱进口置玻璃漏斗，调节柱出口螺旋止水夹使柱内液面恒速缓慢下降，以合适的速率向漏斗内边搅拌边加入湿态树脂混悬液即可实现均匀树脂层的装填；思考题1.为什么要降

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