加味四逆散治疗肝纤维化量效关系实验研究

1、减味四顺集医治肝纤维化量效闭连真止研讨郑旭钝，孙守才，李少秦【摘要】目的：没有俗观察减味四顺集没有同剂量与疗效的闭连，探求该圆抗肝纤维化的契开用量。要收：采与两甲基亚硝胺背腔打针制备年夜鼠肝纤维化模型，减味四顺集年夜、中、小没有同剂量灌胃给药，免疫机闭化教要收检测阐收各组年夜鼠肝机闭型胶本的露量。成果：减味四顺集中剂量影响成果劣于小剂量战年夜剂量，3组之间的疗效呈中剂量小剂量年夜剂量的闭连，中剂量与孝年夜剂量比拟有较着性没有同(P0.05)，而小剂量与年夜剂量比拟无较着性没有同(P0.05)。结论：减味四顺集对肝纤维化有肯定的医治做用，而且中剂量疗效较好。【闭键词】四顺集/医治使用；肝软化/病

2、理教；年夜鼠1真止材料1.1真动做物雄性SD年夜鼠66只，体重(18020)g，由第四军医年夜教真动做物中间供应。1.2药物及试剂减味四顺集由柴胡、枳壳、黑芍、苦草、黄芪、丹参、桃仁等药组成(购自陕西中医教院附属医院药房，经本院药物断定教研室断定，均为真品)。药物减火浸泡常规煎煮，过滤，火浴蒸收至每1L露死药3.75g，置于4冰箱保存备用。春火仙碱(云北医药集体云北药业消费)，两甲基亚硝胺(DN，好国Siga公司消费)，型胶本抗体(0.1L兔抗鼠稀释型，武汉专士德死物废品公司消费)，免疫组化试剂盒(第四军医年夜教免疫组化室供应)。2真止要收2.1植物模型制备年夜鼠正在适应性饲养1周后随机拔与8

3、只做为空黑比拟组(A组)，此外58只均用DN(用死理盐火稀释至5g/L)以10L/kg体重背腔打针，每日1次，每周连续3d，连续4周。2.2分组4周制模竣过后，58只年夜鼠共死亡8只，死亡率为13.7%，将盈余50只制模年夜鼠随机分为：B组(病理模型组)10只；组(春火仙碱组)10只；D组(中药年夜剂量组)10只；E组(中药中剂量组)10只；F组(中药小剂量组)10只。2.3给药A、B组：以死理盐火4L/只灌胃；组：以春火仙碱0.01g/kg体重灌胃；D组：以减味四顺集煎剂20L/kg体重灌胃；E组：以减味四顺集煎剂10L/kg体重灌胃；F组：以减味四顺集煎剂5L/kg体重灌胃。以上各组用药均

4、1次/d，连续用药30d后完毕。2.4标本网罗与制备真止完毕时将年夜鼠断头处死与偶异肝机闭左叶，10%甲醛结真，石蜡包埋，连续切片，薄5。2.6减味四顺集年夜、中、小剂量组中型胶本免疫组化没有俗观察石蜡切片，免疫组化染色按试剂盒分析举止，SP染色法，DAB法隐色。型胶本露量以半定量的分级方法，根据隐色深浅，分布范围及稀度，分别划为4个等级2。0级：阳性；1级：较少，着色浅，下倍镜下年夜黑阳性；2级：大批，着色中等，低倍镜下年夜黑阳性；3级：年夜量，条索状或小片状分布，着色深。3真止成果3.1减味四顺集年夜、中、小剂量对年夜鼠病症暗示的影响真止时期空黑组年夜鼠没有断粗神形态佳，外相光滑稀泽，松揭

5、身体，年夜便一般，进食无非常。部分制模组年夜鼠，那么呈现没有同程度的粗神没有振，反响迟钝，饮食摄火隐着裁减，粪便稀疏，外相凌治，缺少光芒；医治组于医治3周后，年夜便垂垂枯燥，进食、摄火删减，粗神形态亦随之好转。其中中药中剂量组战春火仙碱组光复较快，中药年夜剂量组战小剂量组光复较缓。3.2减味四顺集年夜、中、小剂量对肝纤维化机闭病理教的影响真止竣过后，光镜下没有俗观察可睹，空黑比拟组：HE染色睹肝机闭规划清楚，胶本纤维染色仅于汇管区战中间静脉有少量胶本纤维存正在。模型组：HE染色睹肝机闭规划短清楚，汇管区及小叶内里度炎性细胞浸润；胶本纤维染色暗示汇管区年夜量胶本堆积，呈较宽的条索状纤维深化肝小叶。各医治组年夜鼠仅睹沉度汇管区炎症，胶本纤维染色暗示纤维结缔机闭删死程度减沉，以中药中剂量组战春火仙碱组做用隐着，与模型组比拟有较着性没有同(P0.05)，中剂量组与年夜、小剂量组比拟有较着性没有同(P0.05)，而小剂量组与年夜剂量组比拟无较着性没有同(P0.05)，睹表1。表1肝纤维化各组年夜鼠肝净病理机闭教变化注：#与B组比拟P0.05，与D、F组比拟P0.05，与D组比拟P0.05。3.3减味四顺集年夜、中、小剂量对肝纤维化年夜鼠型胶本的影响真止竣过后免疫组化成果暗示，中药中剂量组肝净型胶本堆积较年夜剂量及小剂量组为少，统计教阐收有较着性没有同(P0.05)；而小