河北科技大学药物检验工第06讲 典型药物检验课件

1、第一部分维生素类药物的分析维生素： 是维持人体正常代谢机能所必需的 微量营养物资。 人体不能合成维生素。第一节 概 述1920年-发现人体可将胡萝卜转化为维生素A。1922年-维E被发现。1928年-科学家发现维B至少有两种类型。1933年-维E首次用于治疗。1948年-大剂量维C用于治疗炎症。1949年-维B3与维C用于治疗精神分裂症。1954年-自由基与人体老化的关系被揭开。1957年-Q10多酶被发现。1969年-体内超级抗氧化酶被发现。1970年-维C被用于治疗感冒。1993年-哈佛大学发表维生素E与心脏病关系的研究结果。返 回 VitA、D2、D3、 E、K1 等 脂溶性水溶性 Vi

2、tB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。分类按溶解性分L抗坏血酸第二节 维生素C维生素C的分析结构特点二烯醇结构，有强还原性C3显酸性，可成钠盐具共轭双键，有紫外吸收两个手性碳，有旋光性水中易溶，有糖类性质一、结构与性质（一）溶解性1、易溶于水有活性有活性无活性C3OH的pKa = 4.17C2OH的pKa = 11.57（四）酸性（一元酸）与碱反应（六）水解性单钠盐酮酸盐（一）与氧化剂的反应二、鉴别试验去氢抗坏血酸OVitC1、与AgNO3反应(ChP2005)维生素C被氧化，硝酸银被还原成黑色银沉淀2、与2，6 - 二氯靛酚反应(ChP2005)二氯靛酚被还原成无

3、色氧化型玫瑰红色还原型蓝色OH（玫瑰色：酸性）（无色）（二）利用糖类性质或盐酸50吡咯蓝色糠醛戊糖脱水三氯醋酸VitC（三）UV法（BP）溶于0.01mol/L HCl（四）IR法（ChP2005）指示剂：淀粉指示液1、原理维生素C分子中的烯二醇基具有还原性，能被I2定量的氧化成二酮基（一）碘量法四、含量测定H+（1）酸性环境：HCl （2）新沸冷H2O：赶走水中O2减慢VitC被O2氧化速度3、讨论（3）立即滴定：减少O2的干扰（二）2，6 - 二氯靛酚钠滴定法法（USP、JP）原理酚亚胺2，6 - 二氯靛酚Vit C1、碘量法测定维生素C 的含量是利用维生素C 的( D ) A碱性 B酸性

4、 C氧化性 D还原性 E水溶性Vc与氧化剂的典型鉴别反应碘量法测定维生素C要点（1）酸性环境：HCl ，减慢VitC被O2氧化速度（2）新沸冷H2O：赶走水中O2 （3）立即滴定：减少O2的干扰羧酸芳酸常见的芳酸及其酯类药物水杨酸类 贝诺酯苯甲酸类 氨甲苯酸羟苯乙酯丙磺舒（pKa3.4）布美他尼其他芳酸类药物 氯贝丁酯酚磺乙胺阿司匹林Acetyl Salicylic Acid副产物SAASA一、Aspirin生产工艺二、结构与性质1、结构2、性质 （1）物理性质 为固体，具有一定的熔点 分子结构中具有苯环和特征官能团，均具有紫外和红外特征吸收光谱 溶解性：微溶或几乎不溶于水，而溶于有机溶剂。（

5、2）化学性质 酸性：具游离羧基，属中等强度的酸或弱酸；（酚羟基：与FeCl3显色反应）酯键：阿司匹林有酯键，可在碱性条件下水解，产生对人体有害的水杨酸二、鉴别试验 （一）FeCl3反应 具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物 直接：水杨酸 间接（碱水解后）：阿司匹林（二）水解反应 （四）UV、IR苯环和特征官能团三、特殊杂质检查 1、阿司匹林中特殊杂质检查（1）溶液的澄清度：检查碳酸钠试液中不溶物，主要是生产过程可能引入的苯酚类和酯类。（2）游离水杨酸： 杂质来源：原料残存（生产过程中乙酰化不完全）；水解产生（贮存过程中水解产生）检查方法：对照法 反应原理：三氯化铁反应 限量： 原料药：0.1%；

6、 阿司匹林片：0.3%； 阿司匹林肠溶片：1.5%； 阿司匹林栓剂：1.0%（HPLC法） （3）易炭化物：检查被硫酸炭化呈色的低分子有机杂质。四、含量测定（一）酸碱滴定法1、直接滴定法 溶剂：中性乙醇 指示剂：酚酞指示剂 滴定液：0.1mol/ml NaOH滴定液中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性， 可消除滴定误差乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶 液中滴定过程易水解本法特点：简单注意点：1、若SA不合格，不宜采用本法2、方法1简单快速，但是终点会不太明确 Aspirin 丙磺舒(Ch.P. BP. JP等) 苯甲酸(Ch.P等)均采用本法2、水解后剩余滴定法 USP23方法：取本品约

7、1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸15min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O43、两步滴定法Two-step titration重点适用于Aspirin片测定片剂中有稳定剂水解产物水杨酸SAHAc枸橼酸Citric acid酒石酸Trataric acid为了避免这些酸类的干扰，采用两步滴定法两步滴定法 适用范围：阿司匹林片、阿司匹林肠溶片、氯贝丁酯 反应步骤： 第一步 中和所有酸第二步水解，滴定（四）H

8、PLC阿司匹林栓剂的RP-HPLC ChP（2005）： 色谱条件：固定相ODS；流动相甲醇-0.1%二乙胺水溶液-冰醋酸（40：60：4）；检测280nm；内标咖啡因；理论塔板数2000以上。4、双相滴定法 Titrimetry in two phases（重点） Ch.P 2005用于苯甲酸钠的测定 苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断。 因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用双相滴定法。可在水中加入与水不相容的有机溶剂在分液漏斗中滴定，这样滴定中产生的苯甲酸转入有机相中，使滴定终点明显，清晰 HClHCl乙醚(苯甲酸)H2O(苯甲酸钠)0.5mol/

9、L25ml1.5g50ml2d甲基橙 橙红色利用苯甲酸溶于有机溶剂（如乙醚）这一性质，在水相中加入与水不相混溶的有机溶剂，在滴定过程中将生成的苯甲酸不断萃取入有机相，减小苯甲酸在水相中的浓度，提除反应生成物苯甲酸，并减少苯甲酸的解离，使滴定反应进行完全，同时也避免了苯甲酸在瓶中析出影响终点的观察。终点清晰。 苯甲酸钠双相滴定法测定含量：取本品1.4500g，精密称定，置分液漏斗中，加水25ml、乙醚50m1及甲基橙指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5050mol/L）滴定，边滴定边振摇，至水层显橙红色。分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中，加乙醚20ml，继续用盐酸滴定

10、液（0.5050mol/L）滴定，边滴定边振摇，至水层显持续的橙红色。消耗盐酸滴定液18.98ml。已知每1ml盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的苯甲酸钠（C7H5NaO2）。计算百分含量？消耗盐酸滴定液（0.5050mol/L）共1898ml已知每1ml盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的苯甲酸钠（C7H5NaO2），1898ml 0.5050mol/L折合为0.5mol/L相当于：18.98*0.5050/0.5=19.1698ml相当于苯甲酸钠：19.1698*72.06=1381.376mg=1.381376g=1.381本品1.4500g,含量为：1

11、.381/1.4500=95.2%维生素C鉴别阿司匹林两步法测定苯甲酸钠双相测定:原理、步骤、仪器、计算例1. 鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（ ）A. 碘化钾 B. 碘化汞钾C. 三氯化铁 D. 硫酸亚铁E. 亚铁氰化钾 C例4. 两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是（ ）A. 测定阿司匹林含量B. 消除共存酸性物质的干扰C. 使阿司匹林反应完全D. 便于观测终点 E. 有利于第二步滴定 B1、阿司匹林在生产中，由于乙酰化不完全或贮藏中水解产生对人体有害的物质 。水杨酸 测定阿司匹林片及肠溶片含量时，为了避免枸橼（元）酸、水杨酸、醋酸等干扰应选用（ D ）。

12、 A.直接酸碱滴定法 B.水解酸碱滴定法 C.双相酸碱滴定法 D.二步酸碱滴定法例3. 苯甲酸钠的含量测定，中国药典（2005年版）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为（ ）A. 水乙醇 B. 水冰醋酸C. 水氯仿 D. 水乙醚E. 水丙酮 D例2. 双相滴定法可适用的药物为（ ）A. 阿司匹林 B. 对乙酰氨基酚C. 水杨酸 D. 苯甲酸E. 苯甲酸钠 例3.采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是（A ）防止反应产物的干扰 乙醚层在水上面，防止样品被氧化C. 消除酸碱性杂质的干扰 D. 防止样品水解 E第三部分杂环类药物的分析 杂环化合物：指环状有机化合物的碳环中夹杂有非碳元素原子

13、（如O、S、N等）的化合物第一节 吡啶类药物的分析异烟肼（isoniazid）吡啶（pyridine）尼可刹米（nikethamide）异烟腙（ftivazide）以异烟肼为例一、结构与性质 1. 吡啶环 弱碱性 pKb8.8， 吡啶环可发生开环反应，可用于吡啶类药物的鉴别 2. 取代基 位上酰肼基： 弱酸性：非水酸量法 还原性：鉴别或氧化还原滴定法含量测定 可与某些羰基试剂发生缩合反应： 鉴别或比色法含量测定 酰胺键易水解引入特殊杂质游离肼 二、鉴别试验 （一）吡啶环的反应 1. 沉淀反应 与氯化汞的反应 2. 吡啶环的开环反应 适用于吡啶 、未取代，以及 、 为烷基或羧基的衍生物（1）戊烯

14、二醛反应（Knig反应）吡啶环的特性： 吡啶环开环 戊烯二醛反应（kning反应） 适用于、位无取代的异烟肼、尼克刹米 Chp2005尼克刹米鉴别反应：取本品1 滴，加水50ml，摇匀，分取2ml ，加溴化氰试液2ml 与2.5苯胺溶 液3ml ，摇匀，溶液渐显黄色。 异烟肼不经处理的反应：（二）酰肼基团的反应 还原反应 异烟肼吡啶环位被酰肼所取代，有较强的还原性，可被不同的氧化剂氧化异烟肼与硝酸银银镜反应 异烟肼 ChP（2005） 【鉴别】 （2）取异烟肼约10 mg，置试管中，加水2 ml溶解后，加氨制硝酸银试液1 m1，即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。 异烟肼： 溴酸钾2.

15、 缩合反应 异烟肼 ChP（2005） 【鉴别】 （1）取本品约0.1 g，加水5 ml溶解后，加10香草醛的乙醇溶液1 m1，摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，在105干燥后，测定熔点，其熔点为228231，熔融时同时分解。 异烟肼的其他鉴别反应与亚硒酸作用，可将其还原为红色硒的沉淀与1,2-萘醌-4-磺酸在碱性介质中，可缩合呈红色。红色紫外吸收光谱鉴别芳杂环在紫外光区有特征吸收药物溶剂max (nm)max (nm)异烟肼HCl (0.01mol/L)265约420水266234 378尼克刹米HCl (0.01mol/L)263 285NaOH (0.01mol/L

16、)255 840260 860硝苯地平无水乙醇333 140（五）IR【鉴别】（4）本品的红外吸收图谱应与对照的图谱一致。三、杂质检查 杂质来源 原料引入、降解产生 （一）异烟肼中游离肼(诱变剂和致癌物质)的检查 1. 薄层色谱法（TLC） ChP（2005） 杂质对照品法检查方法：取本品，加水制成每1ml 中含50mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼 加水制成每1ml 中含0.20mg（相当于游离肼50g ）的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录B）试验，吸取供试品溶液10l 与对照溶液2l，分别点于同一硅胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）上，以异丙醇丙醇(3:2) 为展开剂，展开后，

17、晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15分钟后检视。在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。 限度：0.02%。2、比浊法JP(14)采用样品中加水杨酸的乙醇溶液观察浑浊的方法专属性差3、差示分光光度法原理：肼对-二甲氨基苯甲醛黄色缩合物（对-二甲氨基苯甲醛连氮）465nm波长有最大吸收异烟肼对-二甲氨基苯甲醛缩合物（对-二甲氨基苄叉） 465nm波长无吸收加入3%丙酮，可使得黄色缩合物（对-二甲氨基苯甲醛连氮）变为无色的二甲基甲酮连氮，继而作为参比，用于测定A456nm，并以对照品比较法计算游离肼的含量。专属、准确、灵敏，最低检测限可达0.1g/ml。四、含量测定 （一

18、）异烟肼的含量测定 1. 氧化还原滴定法（1）溴酸钾法 （重点） ChP（2005）原料及制剂反应摩尔比 32 原理：异烟肼在强酸性介质中可被溴酸钾氧化为异烟酸，而溴酸钾被还原为溴化钾。终点时微过量的溴酸钾可将粉红色甲基橙指示剂氧化褪色，以指示终点的到达取标示量为100mg的异烟肼片20片，称得质量为2.422g，研细后，精密称取片粉0.2560g，置100ml量瓶中，加水适量，振摇使异烟肼溶解并稀释到刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液25ml，加水50ml，盐酸20ml与甲基橙指示剂1滴，用溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）滴定，至粉红色消失，消耗16.10ml。每1ml的溴酸钾滴定液（0.01000mol/L）相当于2.057mg的异烟肼。计算异烟肼的标示量百分含量。溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）滴定，至粉红色消失，消耗16.10ml,实验中取取续滤液25ml，实际所有液体为100ml,故应用溴酸钾滴定液：16.10/25*100=64.40ml相